胡萝卜抗HgCl2变异细胞系的筛选

利用胡萝卜下胚轴愈伤组织，以HgCl2为选择剂，通过多步正筛选法，获得了抗性变异细胞系，抗性鉴定结果表明，在不同HgCl2浓度的培养基上，抗性系的愈佃组织存活率和鲜质量增殖率均显高过亲本系，抗性系的细胞膜透性也发生了变化，对抗性系和亲本系愈伤组织进行再分化的结果表明，在连续3－4代的分化培养之后，愈伤组织都能再生绿苗，提出了该项研究在预防和治理重金属污染方面的重要意义。     

4℃平衡时间对PCK细胞低温保存的影响(英文)

主要阐述了在以二甲亚砜为抗冻剂,不同的4℃平衡时间对PCK细胞低温保存的影响。把第24代PCK细胞悬浮于含10％二甲亚砜(DMSO)的冻存保护液,置于4℃冰箱,按不同的时间间隔取出细胞,重新培养,用来研究不同的平衡时间对细胞的贴壁率及生长的影响。将19代PCK细胞,按40min、1h、2h三种不同的4℃平衡时间进行-700℃冻存,再以较低的细胞密度(2×10~4个/mL)复苏细胞,用以研究不同的平衡时间对细胞冻存的复苏率及形态学的影响。结果表明,较长时间放置在4℃,DMSO的毒副作用明显,不利于细胞的生长。同直接传代的细胞相比,放置24h以上明显影响细胞的贴壁率及单层形成时间。在PCK细胞的-70℃保存中,4℃下平衡40min,DMSO不能对细胞形成充分的保护,细胞碎片较多;平衡2h以上,DMSO有影响了细胞对低温伤害的抵御能力,同样不利于细胞的冻存;平衡1h,细胞复苏及生长情况最佳。     

城乡协调发展与我国农民就业困境探讨

分析了农业就业非连续性造成农民就业困难的原因,提出了城乡协调发展解决农业就业不连续性的机理。     

水稻胚性悬浮细胞系建立的细胞学研究

胚性悬浮细胞是禾谷类作物原生质体培养的理想材料。本文研究了水稻广亲和中粳品系02428胚性悬浮细胞系建立过程中的细胞学动态变化,结果表明:建成的胚性悬浮细胞系(后期悬浮细胞系)和前、中期悬浮细胞系相比较,细胞团内细胞结合紧凑,细胞壁簿,细胞质浓厚,颗粒状内含物丰富,细胞活力强,质膜凹陷较浅,较平整,质膜强度高。本研究结果从细胞学角度初步探讨了水稻胚性悬浮细胞系适应于原生质体培养的机理。     

A型肉毒毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定

制备了A型肉毒毒素(BoNT/A)单克隆抗体(mAb),并对其免疫学特性进行了初步鉴定.用BoNT/A重组抗原(BoNT/A Hc)免疫Balb/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经3次亚克隆建立了3个稳定分泌抗BoNT/A抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A8、4F7和2F2,3株抗体均属IgG1亚型,效价为10-4～10-5,3株单抗抗相同抗原表位,交叉反应结果表明,3株单抗与BoNT/A的类似物均无交叉反应,具有较高的特异性.     

粉纹夜蛾（Trichoplusia ni）卵巢细胞系克隆株Tn5B1—4特性的研究

通过用限稀释法由粉纹夜蛾Ｔｎ５Ｂ１细胞系中分离出多个细胞株，经筛选获得一个理想的克隆株Ｔｎ５Ｂ１－４，该克隆株的特性不同于原细胞系Ｔｎ５Ｂ１。该克隆株的细胞形态一致，细胞群体倍增时间较原细胞株短，而且细胞活力强，特别是在维持粉纹夜蛾单粒包埋核型多角体病毒的复制能力方面高于原细胞系，另外经生物测定看出，在该克隆株中增殖的病毒毒力与虫体内增殖的病毒无显著差异。     

小麦禾谷镰刀菌毒素抗性系的筛选及抗性特性

以稳定生长的小麦（抗盐０３×Ｎｏ１８）Ｆ１花药愈伤组织为材料，小麦强致病禾谷镰刀菌的粗毒素为选择剂，进行抗毒素变异细胞系的离体筛选。结果从多步正筛选系统和一步正筛选系统分别获得抗性变异细胞系ＫＮｒ－ａ和ＫＮｒ－ｂ．抗性系的毒素抗性具有显著提高，且其细胞膜透性、硝酸还原酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性、游离氨基酸组成均发生了明显变化。据此提出了细胞水平上禾谷镰刀菌毒素作用的机理及抗性变异细胞系对毒素表现出一定抗性的可能原因     

滨州畜牧兽医研究院新获两项省级科研基金资助

近日,省科技厅自然基金项目立项公布,滨州畜牧兽医研究院高三阳博士申报的《蜂胶在小鼠B一淋巴细胞IgM表达中的活化调节机制研究》（项目编号：2011ZRAl6002）项目成功立项,并获得省自然科学基金资助。同时,该院王文秀博士申报的《永生化鸭胚成纤维细胞系的建立及DHV增殖特性研究》（项目编号：2011BSAl6009）项目获省优秀青年科学家科研奖励基金（博士基金）资助。     

岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

采集岷县黑裘皮羊肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法进行继代培养和细胞纯化,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示:原代和传代细胞生长形态均好,群体倍增时间为28.3 h;染色体2 n=54,二倍体占主体(84%)乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,未见LDH4、LDH5谱带,与其它羊有明显区别;外源性荧光蛋白转染质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明该研究已成功建立岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系,为在细胞水平上保存岷县黑裘皮羊种质资源以及进行相关研究提供了理想的生物材料。     

稳定表达乙型脑炎病毒NS1蛋白细胞系的建立

为建立稳定表达乙型脑炎病毒(JEV) NS1蛋白的真核细胞系,本研究将编码JEV NS1蛋白的人工合成基因克隆到真核表达载体pCAGG-TK-neo中,构建了重组质粒pCAGG-opti-NS1.重组质粒经脂质体转染RK-13细胞,以含G418的选择性培养基选择培养,经细胞克隆纯化,以间接免疫荧光试验(IEA)筛选表达目的基因的细胞.结果表明,转染的RK-13细胞经G418加压及IFA筛选后,获得表达JEV NS1蛋白的阳性RK-13细胞系.经RT-PCR、western blot和IFA鉴定,该细胞系在传代至第15代后仍然可以稳定表达NS1蛋白.本实验获得了能够稳定表达JEV NS1蛋白的细胞系,为进一步开展JEV相关的研究奠定了基础.