牛产气荚膜梭菌荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立特异性强、灵敏度高、重复性好的产气荚膜梭菌荧光定量PCR检测方法，本试验根据产气荚膜梭菌的plc基因保守序列设计合成特异性引物探针，摸索其最佳反应条件，进行灵敏性、特异性、重复性以及临床样本验证。结果表明：建立的方法具有较好的灵敏性、特异性及重复性，最低检出限度为8.26×10¹拷贝/μL，在8.26×10³～8.26×10⁸拷贝/μL的范围内具有良好的线性关系，同时不与其他致病菌发生交叉反应，组间及组内的变异系数均小于4%，应用比方法在采集的300份临床样品中检出24份阳性样品，与常规细菌分离鉴定方法结果符合率为94.12%。说明试验成功建立了牛产气荚膜梭菌荧光定量PCR检测方法，这将为牛产气荚膜梭菌的快速诊断提供技术支持。     

长链寡核苷酸生物合成方法的研究

化学合成长链寡核苷酸面临许多困难，研究通过对长链寡核苷酸生物合成方法的研究，成功合成并纯化了长链寡核苷酸，其长度达到146nt，并且其序列没有错误。生物合成的基本方法是：首先用一对PCR引物扩增DNA模板，     

豆粕采购套期保值方案

一、豆粕价格行情分析 1、大豆丰产预期承压，天气炒作未现，国内粕类整体弱势 经过7月份美国大豆的种植面积及郑易里产上调的利空打压，国内外豆类价格出现了大幅下挫。虽然近期市场有所企稳，国内蛋白粕价格出现了反弹，     

创业之初“三不得”

1. 速度快不得投资创业要按程序-办，这是不能违背的规律。企业全部活动的结果是销售收入。这个结果由若干单元在系统的平衡运动中产生。如果你套用别人的一套制度．或花几天时间就搞出一套制度．而不是从你企业的实际出发慢慢形成．那么．企业混乱的速度比你想象的还要快。新项目的风险通常来自两个方面．即市场的不确定性和所必需的能力．前者会在前进中逐渐变得清晰．后者也会在摸索中逐渐获得。只有当冰山浮出水面．又有了可以把握的底数，方可最后下决心。     

农民离期货市场有多远

<正>当前,我国基本建立了包括棉粮油糖等10多个品种在内的农产品期货品种体系。期货市场价格成为安排农业生产、调整种植结构的重要价格信号,有利于缓解农业小生产与大市场的矛盾。但如何让农民更好参与期货市场,如何有效利用期货市场的价格发现和套期保值功能,还存在很多制约因素。长期以来,靠天吃饭都是很多农民无法避免的现实,而农产品期货似乎与农村还有一些距离,农民看着近,但实际上离得还很远。实际上,有关文件多次提出,要创新农产品流     

横山县樟子松套笼造林成效调查

文章根据几个有代表性樟子松套笼造林的调查,旨在对有关技术问题进行初步探讨。     

陕西杨凌某蛋鸡场禽戊型肝炎病毒的检测

2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和粪便中的禽HEV RNA进行了实验室检测。ELISA检测结果发现,168份血清为禽HEV抗体阳性,阳性率为49.85%;套式RT-PCR检测结果发现,63份粪便为禽HEV RNA基因片段阳性,阳性率为23.51%。基因片段的序列同源性分析发现,杨凌地区的禽HEV分离株与国内的同源性为93.0%~99.2%;进化树分析表明,其与国内其他地区的分离株在同一进化分支上,同属禽HEV基因3型。     

进口热磨机蒸煮缸排料螺旋的改造维修

热磨机是中密度纤维板生产线上的关键设备。一台配套年产10万m~3中密度纤维板生产线的进口热磨机,主电机参数为:电压10kV,功率2 240kW。其木片蒸煮缸的排料螺旋由功率为26.6kW的直流电机变频驱动。该螺旋除起到排料作用外,还通过变频改变转速来实行对排料量的计量。该排料螺旋安装轴承的轴颈     

现代生物技术在水产养殖中的应用

核酸探针技术通过分析病原生物的遗传结构。根据这段基因结构的序列，就可以设计可与其互补的DNA探针，与病原生物的DNA进行杂交，以此来确定病原携带者和传播者的分子生物学技术。该技术具有灵敏度高、特异性强等优点，近年来在对虾病毒病的检测中倍受青睐。     

双芽巴贝斯虫TaqMan实时荧光PCR检测方法的建立

根据双芽巴贝斯虫(Babesia bigemina)18SrRNA基因的保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,建立了检测双芽巴贝斯虫的实时荧光PCR方法。该方法灵敏度高,最小检出量为1.1×101 copies/μL的标准质粒,比常规PCR灵敏1 000倍;重复性好,组内和组间重复性试验的变异系数分别为0.21%¹.14%和0.31%1.14%和0.31%¹.50%,均小于2%;特异性强,对牛常见的其他两种血液原虫和健康血液无交叉反应。用建立的实时荧光PCR和常规PCR分别对30份临床样品进行检测,实时荧光PCR和常规PCR的检出率分别为30%和16.7%。结果表明,本研究建立的荧光TaqMan实时荧光PCR方法可以灵敏、准确、快速检测双芽巴贝斯虫感染,将为蜱传牛梨形虫病的流行病学调查和防制提供新的方法。