四环素对人肝细胞L02的损伤作用

采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和Hoechst 33258染色法研究了四环素(1、10、100、1 000、10 000和100 000 μg/L)对人肝细胞L-02的毒性作用,并通过测定细胞培养上清液中和细胞内生化指标,明确了四环素诱导L-02损伤的作用机制。结果表明,四环素对L-02细胞有毒性作用,且随着四环素浓度的增加,其存活率下降。同时,细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性均显著增加,并随着四环素处理剂量的增加而逐渐升高;而细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均降低,丙二醛(MDA)含量显著升高。上述研究结果表明,四环素对人体外肝细胞L-02具有毒害作用,四环素诱导L-02细胞的损伤机制与破坏肝细胞膜的完整性、影响肝功能和诱导氧化应激效应有关。     

香椿芽中亚硝酸盐含量的比较研究

采用盐酸萘乙二胺分光光度法对焯水椿芽、新鲜椿芽用食盐水腌渍一段时间后,测定其亚硝酸盐的含量,为人们的日常饮食、蔬菜加工提供科学依据^[1]。结果表明：香椿芽用开水焯过后其亚硝酸盐的含量有大幅度降低,且腌渍8天后,亚硝酸盐含量逐渐降低并趋于平稳,低温储存有利于亚硝酸盐含量的降低。     

添加不同基质对含四环素土壤玉米幼苗生理特性的影响

为探究兽用四环素对玉米幼苗生理特性的影响,通过玉米盆栽试验,研究四环素外源污染胁迫下施用不同基质(单施蚯蚓粪、菌糠、菌剂、生物炭及其与菌剂配施)对玉米生长的影响。结果表明,四环素对玉米生物量有明显的抑制作用,其中对根长的抑制作用显著大于株高,而添加不同基质均能缓解四环素对玉米株高和根长的抑制作用,且JK和JJ处理效果最显著,升幅分别为17.29%和30.08%;四环素显著诱导玉米SOD活性上升,升幅为3.34%,抑制CAT和POD活性,降幅分别为10.98%和46.68%,添加不同基质处理中,QY处理对促进抗氧化酶系统平衡的效果最显著;四环素会增加玉米脯氨酸、丙二醛、可溶性糖、可溶性蛋白及总黄酮含量,添加不同基质处理中,对其减少效果最显著的依次为JK、JJ、QY、S和JK处理,降幅分别为29.09%,50.88%,42.01%,50.23%和35.79%;相关性分析表明,脯氨酸、丙二醛均与可溶性蛋白和总黄酮呈极显著正相关,POD活性与可溶性糖、丙二醛与总黄酮相关性最强。综上所述,添加不同基质可有效缓解四环素对玉米幼苗的毒害作用,总趋势为JK(菌糠)、JJ(菌糠+菌剂)和QY(蚯蚓粪)处理效果较好。通过此研究,可筛选有效减少四环素对植物生长影响的基质及其施用方式,可为四环素对植物生理毒性的研究提供参考,也可为抗生素对植物的风险评价提供科学依据。     

黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究

为了探究盐酸小檗碱在植物病原真菌方面的抑制作用,以黄连根粉为材料,采用酸水法提取和乙醇重结晶获得盐酸小檗碱纯品,采用生长速率法研究了盐酸小檗碱对常见植物病原菌的抑制活性。结果表明,盐酸小檗碱的提取率为3.3%,经高效液相色谱法测得其含量为93.56%;抑菌活性试验表明,盐酸小檗碱在100μg/mL时对玉米大斑病菌的抑制率达99.9%,EC_(50)为8.20μg/mL,表现出比药剂对照噁霉灵和百菌清更高的抑制活性;进一步的试验表明,与噁霉灵及百菌清相比,盐酸小檗碱对玉米大斑病菌的抑制作用具有持效期长的特点。     

Optimization of Stachydrine Hydrochloride in Leonurus Extraction Method by HPLC-ELSD

The study was aimed to extract stachydrine hydrochloride in leonurus by HPLC-ELSD,and establish hydrochloride stachydrine determination methods for providing theoretical basis of leonurus extraction process optimization.The chromatographic conditions:venusil HILIC hydrophilic column;Mobile phase was acetonitrile -0.2% acetic acid solution (volume ratio 80:20);The flow rate was 1.0 mL/min;And the column temperature was 30 ℃;The detector was ELSD and drift tube temperature was 80 ℃ with the atomization chamber temperature 50 ℃ and carrier gas volume flow 1.0000 mL/min.The results showed that there was a good linear relationship when the stachydrine hydrochloride content was 0.49 to 4.91 μg (R²=0.9993);There was the highest rate of active ingredients extraction of when the extraction time was 1 h,material to water ratio was 20:1 and extracted for 2 times.Combined with production practice,the final optimization scheme was that the extraction time was 1.5 h,material to water ratio was 20:1 and extracted for 2 times.In summary,the determination of stachydrine hydrochloride in leonurus should use HPLC-ELSD method which had high specificity,good stability,response and reproducibility and easy to handle.This method could provide the theoretical basis for optimizing the leonurus extraction process.     

土霉素在鸡蛋中的残留消除研究

研究临床使用常规剂量及养殖环节加大盐酸土霉素可溶性粉剂量后其在鸡蛋中的残留消除规律。对产蛋期蛋鸡分别给予500 mg/L和667 mg/L 50%盐酸土霉素可溶性粉,集中饮水给药,每日1次,连续5 d。分别采集停药后1～12 d的鸡蛋样品,采用UPLC-MS/MS测定鸡蛋中土霉素的残留量。按上述方法给药后,低、高剂量组分别在停药第1天和停药第2天达到土霉素残留量最高。低、高剂量组的最高残留量分别为142. 72、82. 84μg/kg,均低于国家规定的最高残留限量(200μg/kg),不会造成土霉素残留超标。本试验通过研究土霉素可溶性粉在鸡蛋中的残留情况,确定弃蛋期前后土霉素残留量,以期为蛋鸡产蛋期安全用药,保障食品安全提供科学依据。     

加味当归四逆壳聚糖喷膜剂的研制

研制加味当归四逆壳聚糖喷膜剂,并且制定生产工艺和质量标准。试验采用水煎法提取处方药材;通过正交试验确定壳聚糖盐酸盐、PVPK-30以及乙醇成膜材料的最佳配比;按照药典相关规定,采用紫外分光光度法测定每瓶总黄酮的含量。成膜材料的最佳配比为壳聚糖盐酸盐1%,3%PVPK-30和40%乙醇。通过TLC鉴定样品含有阿魏酸和芍药苷成分。质量标准中性状为澄清有清凉气味的红棕色液体,总黄酮的含量1.83 mg/mL。以处方为219 mg/mL中药复方,1%的壳聚糖盐酸盐,3%的PVPK-30以及40%的乙醇制备出加味当归四逆壳聚糖喷膜剂,且制定质量标准中样品含有阿魏酸和芍药苷并且每瓶总黄酮含量满足1.83 mg/mL。     

对碘量法测定日粮、肠道食糜及排泄物中半胱胺盐酸盐含量的改进研究

试验旨在探讨碘量法测定日粮、食糜及排泄物中半胱胺盐酸盐(cysteamine hydrochloride,CSH)含量的改进方法,为评估包膜CSH在动物胃肠道内释放过程中CSH的定量提供参考。试验分3部分:试验一:检验包膜CSH的上样量对碘标准液消耗量的线性关系,以确定碘量法检验包膜产品的准确度,采用单因素完全随机设计,CSH的上样量设6个水平,分别为28.28、113.12、226.24、339.36、452.48和565.61mg;试验二:考察H2SO4预处理对消除日粮、食糜和排泄物对碘量法测定CSH含量的影响,采用单因素完全随机设计,日粮、十二指肠食糜、空肠食糜、回肠食糜及排泄物样品中CSH(试剂级)的含量均设3个水平,即30、100和300mg/2g,形成15个含有CSH的样品,H2SO4溶液(6mol/L)设3个水平,即0.1、0.5和1mL,每个处理设3个重复;试验三:考察传统碘量法与试验二建立的改进方法在测定日粮、食糜及排泄物中包膜CSH含量的差异,采用两样本试验设计,日粮、十二指肠食糜、空肠食糜、回肠食糜及排泄物中CSH的含量均设28.73、84.84、141.47和200.56mg/2g。结果表明:①CSH的上样量对碘标准液消耗量及CSH测定值均呈显著的线性关系(P<0.01,R2=0.9999)。②在含有CSH的日粮中,H2SO4溶液处理后由碘量法测定的CSH质量对实际质量的回归均符合Y=X(P>0.05)。在含有CSH的十二指肠食糜和回肠食糜中,所有H2SO4溶液处理下CSH质量对实际质量的回归均不符合Y=X(P<0.05),但0.5和1.0mL比0.1mL H2SO4溶液处理使测定值更接近实际值。在含有CSH的空肠食糜及排泄物中,0.5和1.0mL H2SO4溶液处理使测定值对实际值的回归符合Y=X(P>0.05),而0.1mL H2SO4溶液处理下CSH测定值显著低于实际值(P<0.01)。③在含有CSH的日粮、十二指肠食糜、空肠食糜、回肠食糜及排泄物样品中,常规方法测定的CSH对实际质量均偏离Y=X(P<0.05),而1.0mL H2SO4溶液处理后的测值对实际质量均符合Y=X(P>0.05)。由此可见,采用适量H2SO4溶液进行处理后,可以排除日粮、食糜及排泄物对CSH测定的干扰。     

Antibacterial activity of TiO2 nanotube arrays on periodontal pathogens before and after loaded with minocycline hydrochloride

AIM:To investigate the effects of titanium dioxide (TiO₂) nanotube arrays on the early adhesion behavior of Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf) and Actinobacillus actinomycetemcomitans (Aa) before and after loaded with minocycline hydrochloride (MN). METHODS:TiO₂ nanotube arrays were prepared by ano-dization and loaded with MN. Titanium slices were divided into 3 groups according to different treatment methods:pure polishing titanium (Ti) group, TiO₂ nanotube titanium (TiO₂) group, and MN (120 μg) TiO₂ nanotube titanium (MN TiO₂) group. The antibacterial properties of the titanium tablets were evaluated by the bacteriostasis test.RESULTS:The Ti had no antibacterial activity. The antibacterial activity of TiO₂ to Aa, Pg and Tf was poor, with only about 20% of antibacterial rate after 4 h. After loaded with MN, its antibacterial activity was enhanced, and the antibacterial rate was up to 77% after 4 h.CONCLUSION:No antibacterial activity in the Ti group was observed. If TiO₂ nanotube arrays were formed on the surface and MN was loaded, the antibacterial activity on periodontal pathogens was stronger.     

HPLC-PDA方法同时检测黄连解毒散中非法添加的对乙酰氨基酚和盐酸溴己新

为同时检测黄连解毒散中非法添加的对乙酰氨基酚和盐酸溴己新,以十八烷基键合硅胶为填充剂,1%冰醋酸溶液(用三乙胺调剂p H值至4.0)为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,波长扫描范围为210~400 nm,柱温25℃,建立了HPLC-PAD检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。结果显示,对乙酰氨基酚和盐酸溴己新的回收率分别为98.6%和99.4%,RSD分别为0.6%和0.2%;线性方程分别为y=43408x-401.96,R2=1和y=14331x-1682.4,R2=1;检测限分别为1和5 mg/g;定量限分别为2和10 mg/g。本方法简洁、灵敏、可靠,可同时对黄连解毒散中非法添加的对乙酰氨基酚和盐酸溴己新违禁药物进行定性和定量检测。