用中药复方防治鲫细菌性败血症及对鲫免疫力的影响

采用药效检验和免疫系统检测试验,验证由黄芩、斑地锦等中药复方制成的中药药饵对防治鲫Carassius auratus auratus细菌性败血症的有效性及其对鲫免疫活力的影响。试验采用随机区组试验设计,处理因素按中药复方添加量(质量分数)设0.5%、2.0%、4.0%3个水平,区组因素菌液浓度按预试验结果(感染发病死亡率为50%~80%)设3 000、6 000万个/mL 2个水平。试验各组分别为菌液浓度为0(对照组),无药饲料(空白A1、A2组),菌液浓度为3 000万个/mL(B1、C1、D1组)和6 000万个/mL(B2、C2、D2组)。将鲫暂养几天后,分别投喂无药饲料和不同剂量的药饵,连续投喂7 d后,分组在鲫胸鳍处腹腔注射0.1 mL细菌浊液,给对照组鱼注射0.1 mL灭菌生理盐水。结果表明:该中药复方添加量为2.0%与4.0%时,对鲫的防治效果最佳,防治率为85%,这两种剂量的药饵组与空白组(A1组)的差异显著(P<0.05),表明该中药复方能有效防治鲫细菌性败血症;在不同添加剂量的药饵中(3 000万个/mL),投喂剂量为2.0%药饵组鱼的外周血淋巴ANAE阳性率最高,为(25.08±7.42)%,与空白组的差异极显著(P<0.01),与对照组的差异显著(P<0.05);随着药饵添加剂量的增加与投喂时间的延长,对鲫吞噬细胞的吞噬活性影响呈上升趋势。     

斑点叉尾鮰肠败血症PCR诊断方法的建立

为了建立快速、敏感的聚合酶链式反应(PCR)诊断斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus的肠败血症技术,作者根据NCBI公布的鮰爱德华氏细菌序列,设计了一对特异性诊断引物CM3/CM4,对鮰爱德华氏细菌特异基因片段进行PCR扩增试验,PCR反应条件的优化以及不同检测材料的比较,同时测试了该方法的特异性和敏感性,并对广西4个市县临床样品进行了检测.结果表明:用该引物可以扩增到与预计大小相符的276 bp鮰爱德华氏菌特异性片段;PCR反应与Ⅰ型荧光假单胞菌、点状产气单胞菌点状亚种、鳗弧菌、温和气单胞菌、肠型点状产气单胞菌、柱状黄杆菌、嗜水气单胞菌、河弧菌、迟缓爱德华氏菌及海豚链球菌无交叉反应;用该PCR法可以检测出病鱼脑、肝、肾及脾中的病原菌,检测的最低细菌数为12个,且病鱼内脏组织、菌落及菌液均可直接用于该PCR扩增;临床菌株检测结果与基于菌株16S rRNA基因序列系统进化分析和生化鉴定结果一致.因此,本试验中所建立的PCR检测方法在斑点叉尾鮰肠败血症的诊断和防治方面具有较好的应用前景.     

淡水养殖鱼类细菌出血性败血病药物防治研究↑（*）

通过对防治淡水养殖鱼类细菌出血性败血病的口服药物败血宁的系列实验研究表明：败血宁主药（ＢＬ）对嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）的ＭＩＣ为４μｇ／ｍｌ，在剂量１０～３０ｍｇ／ｋｇ范围内进行鱼体内抗菌试验，对鲢、银鲫的预防和治疗性给药有效率皆在８０％以上，其ＬＤ５０为６１５．２ｍｇ／ｋｇ，属低毒，对鱼类较为安全；以３０、６０ｍｇ／ｋｇ的剂量口灌银鲫进行微核试验证实ＢＬ诱发红细胞微核率不明显，无潜在致突变作用。用ＨＰＬＣ法测定ＢＬ在鱼体内治疗浓度维持时间为８～９ｈ，消除半衰期ｔ（１／２β）为２．５ｈ，连续灌药３ｄ后停药５ｄ在银鲫血浆中未检测到ＢＬ的含量。以３０ｍｇ／ｋｇ的剂量进行了四年的池塘应用试验，统计有效率为９２．９％，疗效肯定。     

养殖鱼类细菌性败血症的菌苗制备技术

选择对养殖鱼类致病的嗜水气单胞菌强毒株，用福尔马林以０．０５％－１．０％的６个浓度及４、２５和６３℃等３种温度灭活制成菌苗，进行安全性和免疫保护试验。结果表明：福尔马林的最佳灭活浓度为０．０５％－０．２％，浓度过高会影响菌苗的抗原性和对鲫的安全性；灭活温度以４℃明显优于６３℃。     

斑点叉尾鮰鱼肠型败血症病例治疗实报

斑点叉尾鮰肠型败血症是其养殖期一种常见的细菌性鱼病,在中国南方较多发,在北方的内蒙古自治区此病的报道尚属首次。此次对该病的治疗分别采用了土霉素、磺胺甲基异嗯唑、氟苯尼考等3种抗菌素。并结合内服中草药、外泼聚维酮碘和益生菌调节水质的方法,很好地控制了该病,对今后防治该病具有指导作用。     

Efficacy of a Live‐attenuated Edwardsiella ictaluri Oral Vaccine in Channel and Hybrid Catfish

This study evaluated the efficacy of an oral live‐attenuated Edwardsiella ictaluri vaccine against enteric septicemia of catfish (ESC) in channel and hybrid catfish. The vaccine was delivered one time orally by feeding fish a diet coated with an attenuated E. ictaluri isolate at four doses to deliver between 4 × 10⁶ to 3.2 × 10⁷ viable vaccine cells/g wet feed. Thirty‐five days postvaccination, control and vaccinated fish were challenged with virulent E. ictaluri and mortality was examined for 30 d postchallenge. Mortality of nonvaccinated hybrids (85%) and nonvaccinated channel catfish (73%) was similar but significantly greater than all groups of vaccinated fish. In channel catfish, a trend toward increasing mortality with decreasing dose was observed. Mortality of channel catfish vaccinated with the lowest dose (26.6%) was significantly higher than fish vaccinated with the highest dose (14.1%) but similar to fish vaccinated at the intermediate doses (17.5 and 19.4%). In contrast, mortality of four doses of vaccinated hybrid catfish was similar and ranged between 10.4 and 14.0%. The data demonstrate that the attenuated E. ictaluri vaccine at all four doses tested is effective at reducing ESC‐related mortalities in hybrid and channel catfish.     

黄鳝出血病三联微胶囊口服疫苗制备及免疫效果研究

【目的】制备出能有效防御黄鳝出血病的三联微胶囊口服疫苗,促进黄鳝养殖业健康发展。【方法】以嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌及温和气单胞菌为抗原,海藻酸钠为壁材,利用乳化法制备三联微胶囊口服疫苗,然后直接拌入饵料对健康黄鳝进行口服免疫,7 d后进行加强免疫,测定各项血清免疫指标。加强免疫结束15 d后,经腹腔注射3种活菌(1.0×109 CFU/mL)进行攻毒试验,检验三联微胶囊口服疫苗对黄鳝的免疫保护率。【结果】制备获得的三联微胶囊口服疫苗的平均粒径为44.5μm,平均含菌量为4.56×109 CFU/mg。按0.4和0.6 g/kg的剂量口服免疫黄鳝,其血清补体C3含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性均显著高于对照组(P<0.05),血清平均抗体效价分别为7.5949和11.0651,对应的免疫保护率为60%和65%,且0.6 g/kg剂量组的各项指标均高于0.4 g/kg剂量组。【结论】制备获得的三联微胶囊口服疫苗能显著提高黄鳝血清SOD、ACP活性及刺激血清补体C3产生,有效抵御由嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌引起的出血病,生产使用时须进行加强免疫,并适当加大免疫剂量。     

神仙鱼细菌性败血病病原及防治的研究

１９９６年１０月,长春一水族馆神仙鱼暴发死亡,死亡率达９１．２％,病鱼以出血性败血症为特征,经病原分离,人工感染试验,菌株的生理生化试验和ＳＰＡ－ＣＯＡ鉴定等证实,病原为嗜水气单胞菌。药敏试验结果显示,致病菌株对环丙沙星,庆大霉素,氟哌酸,呋喃唑酮及链霉素敏感,使用呋喃唑酮及链霉素敏感,使用呋喃唑酮１０－２０ｇ／ｍ６３或氟哌酸３－５ｇ／ｍ＾３浸浴病鱼２４－７２ｈ治疗效果较好。     

接种不同种类病原菌脂多糖对翘嘴鳜细菌性败血症的免疫保护力比较

用柱状嗜纤维菌（Ｃ．ｃｏｌｕｍｎａｒｉｄ）、嗜水气单胞菌（Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）和迟缓爱德华氏菌（Ｅ．ｔａｒｄａ）等３种菌中提取的脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原,分别接种翘嘴鳜后,通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价、血液中白细胞的吞噬活性和Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ活菌攻毒的方法,比较了接种３种ＬＰＳ对翘嘴鳜细菌性败血症的免疫保护力（ＲＰＳ）。结果表明,与对照组相比,受免鱼血中均可产生较高的凝集及交叉凝集抗体效价,血液中白细胞的吞噬活性极显著地升高,而且具有较高的交叉ＲＰＳ。推测ＬＰＳ对翘嘴鳜既具有特异性免疫活性,也存在较强的非特异性免疫活性。