苇状羊茅与多年生黑麦草内生真菌菌丝基因组DNA提取的优化及PCR初步检测

感染内生真菌的禾草在牧草和草坪业上具有重要的生态和经济意义，家畜采食感染Neotyphodium coenophialum和N.lolii的苇状羊茅和多年生黑麦草会发生中毒。本研究收集天津口岸1998年以来进境的部分苇状羊茅和多年生黑麦草种子，对经镜检确认带有内生真菌的种子进行分离培养，对疑似菌株的菌丝用改进的Moiler等方法进行基因组DNA抽提，测定浓度及纯度，对照原方法，DNA的纯度有较大提高，浓度略有上升。Tubulin2基因的引物IS1-IS3扩增结果显示为单一的条带，结合形态学和序列比对，分离培养得到的菌株可以基本确定为N．coenophialum和N。lolii。根据Genbank中N.coenophialum和N.lolii的NC25基因序列设计出引物F1-R1，扩增得到能区分开N.coenophialum和N．lolii的单一条带（相差160bp），建立了N．coenophialum和N．lolii的PCR检测方法，结果准确可靠。     

菠萝DNA的提取及AFLP反应体系的建立

为了应用AFLP分子标记对菠萝种资源进行种质鉴定、分类及亲缘关系等方面的研究,最重要的是要获得高质量的DNA,菠萝叶片革质化程度较高,且纤维、多糖、多酚等次生代谢物质含量较多,严重干扰DNA的抽提或影响其后的AFLP双酶切及其扩增反应,本研究以菠萝叶片为材料,利用改良CTAB法得到了39个高质量的菠萝分类群的DNA基因组,并进行了AFLP分析,得到了条带清晰、多态性好的菠萝品种指纹图谱,这为菠萝基因库的建立、优良品种选育以及亲缘关系的系列研究提供理论依据。     

植物源农药中生物碱提取和纯化技术进展

生物碱是广泛存在于植物中的碱性含氮化合物,一些生物碱因其具有一定的防治病虫害等作用,成为近年来研究的热点。为了使生物碱提取率和纯度不断提高,生物碱的提取与纯化技术也在不断地改进与发展。本文综述了近年来植物源农药中生物碱在提取和纯化新技术的进展,并分析探讨新技术原理、优缺点以及发展前景。     

水貂Mustla Vison微量血DNA的提取与纯化

作者通过采取活体水貂少量血液 ( 5 0 μL) ,利用蛋白酶K消化 ,酚、氯仿法抽取DNA ,结果测量获得的数据和曲线表明 :用 5 0～ 5 0 0 μL冻存血可以获得具有一定纯度和数量的DNA ,完全可以满足RAPD分析的PCR反应所需     

Research Progress on Rapid Serological Assays for Diagnosis of Japanese Encephalitis B

Japanese encephalitis B (JE) is a zoonosis caused by Japanese encephalitis virus which invades the central nervous system,infected by mosquito.Various animals could be the sower and reservoir of JE including swine,horse,cattle and avian.JE could cause a major public health trouble and a horrible crisis of the farm all in Asia and the Western Pacific region.Therefore,it is necessary to diagnose it rapidly and accurately.This review article made a sketch of approaches for the rapid serological assays of JE,including traditional method,emerging technologies and specific improvements of the assay,so as to provide references for the study of rapid,simple and accurate JE diagnose methods.     

热水法提取香菇多糖和茶树菇多糖研究

真菌多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒和免疫调节等多种生理功能,且对机体毒副作用小,具有广阔的开发前景。以营养价值和药用价值均较高的香菇(Lentinus edodes)、茶树菇(Agrocybe aegirit)为原料,用热水提取法在90℃、料液比1∶20(g∶m L)、提取1次、4 h的条件下,提取两种真菌多糖。结果表明,热水法提取香菇多糖的得率为9.70%,茶树菇多糖的得率为13.10%,说明茶树菇中的多糖含量高于香菇。该研究可为后续开发利用真菌多糖提供重要依据。     

Protein extraction from defatted wheat germ by reverse micelles: Optimization of the forward extraction

In this work, the forward extraction of defatted wheat germ protein (DWGP) by reverse micelles was studied. The reverse micellar systems were formed by sulphosuccinic acid bis (2-ethylhexyl) ester sodium salt (AOT), isooctane and KCl solution. The effects of AOT concentration, pH, KCl concentration, extraction time, the amounts of defatted wheat germ flour (DWGF), W₀ (the molar ratio of water to surfactant, i.e. W₀ = [H₂O]/[AOT]) and temperature on the forward extraction efficiency of DWGP were tested. On the basis of single-factor experiments, the optimum extraction was achieved by response surface methodology (RSM). The experimental results lead to the conclusion that the highest forward extraction efficiency of DWGP was reached at the AOT concentration 0.06 g/mL, pH 8, KCl concentration 0.1 mol/L, time 30 min, the amounts of DWGF 0.500 g, W₀ 25 and temperature 36 °C. Under these conditions, the forward extraction efficiency of DWGP achieved 37%.     

超临界CO_2提取茶叶中咖啡碱

用超临界萃取技术分离提取茶叶中的咖啡碱，再用CH2Cl2萃取分离，得到纯度为95．16％的咖啡碱，萃取率和得率分别为16．85％、0．55％。试验结果还表明，在一定条件下，利用超临界萃取技术能够有效地分离茶多酚和咖啡碱。     

槟榔叶片总蛋白质提取及双向电泳条件初探

采用3种提取植物组织蛋白的方法(TCA/丙酮沉淀法、E-TCA法、酚法)提取槟榔叶片总蛋白,在蛋白产量,一维和二维电泳图谱等方面对3种方法的提取效果进行比较.结果表明,TCA/丙酮沉淀法效果较好,是槟榔叶片总蛋白提取的可选方法,同时优化了双向电泳的条件和上样量.     

刺槐叶蛋白提取工艺条件的初步研究

对配合使用酸法、碱法以及加热法提取刺槐叶蛋白的工艺及其工艺条件进行了研究．结果表明，刺槐叶蛋白的提取条件为：常温下料液比为１∶５，ｐＨ值为７；刺槐叶蛋白的分离条件为：温度为６０℃时，沉淀分离得到叶绿体蛋白，调节ｐＨ值为１０时分离出细胞质叶蛋白Ｉ，调节ｐＨ值为２时分离出细胞质叶蛋白质Ｉ；刺槐叶蛋白产品的干燥条件为：５０～７０℃条件下真空干燥．采用此工艺提取刺槐叶蛋白得率为４．７％，提取物中蛋白质含量为５０％～８０％，原料总氮提取率为７５．９％．