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对血液中提取基因组DNA的方法加以改进,获得了一种提取猪肾组织中DNA的有效方法.试验表明,利用SDS裂解,氯仿、异戊醇抽提母猪肝脏中基因组DNA,得到的DNA纯度较高,可用来进一步进行RAPD分析和PCR扩增,用于各种分子生物学实验. 相似文献
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鹅血液基因组DNA的简单快速提取方法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究针对家禽血液红细胞有细胞核的特点,研究适合鹅血液基因组DNA的廉价、简便、快速的DNA提取方法,并为其它禽(鸟)类相关操作提供参考。通过裂解细胞,利用简便快速的操作方法将蛋白质和核酸分离,去除杂质,沉淀核酸,获得大量基因组DNA,并通过基因扩增检测其质量和效果。该方法提取的基因组DNA电泳检测条带明量,无拖尾,含量及纯度均较高,能够用于分子生物学实验研究。与传统的酚-氯仿DNA抽提方法相比,本实验建立的血液基因组DNA提取方法具有成本低、操作步骤简便和快速的特点,特别是对大量样品的提取更为实用。 相似文献
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乙醇浸泡蜜蜂标本DNA的提取纯化 总被引:3,自引:0,他引:3
利用RAPD、PCR、RFLP、分子杂交等分子生物学技术研究生物的遗传变异、遗传多态、分子进化等,必须以DNA作为模板,目前所见有关DNA提取纯化的报道均用活体或冰冻蜜蜂,这给样品采集、保存带来不便。本实验以采自云南不同地区以及马来西亚的蜜蜂乙醇(75%)浸泡标本为材料,参照王文(1994年)的蛋白酶K提取法并加以改进,对DNA进行提取纯化。1实验仪器眼科剪刀 eppendoff管 恒温箱 旋转架或脱色摇床 微量加样器 高速冰冻离心机 电泳仪 紫外凝胶成像系统2实验步骤21 全基因组DNA的提取211 乙醇浸泡的蜜蜂… 相似文献
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褐马鸡是中国特有的国家Ⅰ级保护濒危鸟类,为了解决野生褐马鸡分子生物学研究中存在的取样局限性,采用非伤害性取样和非损伤性取样,对褐马鸡微量血液、皮、脚垫、指甲、羽毛、陈旧标本的皮以及粪便的DNA提取进行了初步研究。结果表明,从褐马鸡微量血液(10μL)中可以提取到浓度和纯度高的基因组DNA(41.85μg);从褐马鸡的皮、脚垫、指甲、羽毛中可以提取出基因组DNA并扩增出目标片断;陈旧标本的皮能够提取到基因组DNA。该研究将拓宽褐马鸡分子生物学研究的采样范围,并可以提高野外非损伤性取样在保护遗传学中的应用。 相似文献
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东方蜜蜂DNA提取纯化和检测 总被引:6,自引:0,他引:6
以云南东方蜜蜂作为材料,用两种方法提取不同发育时期、不同部位、不同性别的蜜蜂的DNA,并进行纯化和检测。为将来开展蜜蜂分子遗传学、分子进化等研究打下一定基础。 相似文献
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为筛选一种高效、快捷的血液基因组DNA提取试剂盒,采集24份新鲜西藏绵羊血液样本,选用6种市售商业化试剂盒(LifeFeng柱式试剂盒DK601和非柱式试剂盒DK602,康为世纪非柱式试剂盒CW0544和柱式试剂盒CW0546,上海生工非柱式试剂盒SK8224和柱式试剂盒SK8254),比较所提DNA的浓度、纯度、得率以及对嗜吞噬细胞无形体16S rRNA进行巢式PCR扩增,综合评价不同试剂盒DNA提取效果.结果表明,应用LifeFeng柱式试剂盒DK601提取的DNA浓度和纯度均最高,得率较高,分别达到75.63 ng/μL、1.894(OD260/OD280)、18.91 ng/μL;且嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因的PCR扩增条带清晰度最优.因此,LifeFeng DK601可作为提取绵羊血液基因组DNA及嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)病原鉴定的首选试剂盒. 相似文献
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血液中DNA提取方法的比较研究 总被引:5,自引:0,他引:5
通过蛋白酶K和SDS消化破碎细胞,用酚-氯仿去除蛋白质,用异丙醇沉淀解离出DNA。此法获取的DNA与用酚抽提法,甲酰胺解聚法,异丙醇沉淀法,血细胞DNA快速提取法获得的DNA比较,分子长度较大,纯度较高,能够同时满足以噬菌体为载体的DNA构基因组文库和PCR实验的要求。 相似文献
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奶牛血液保存条件和DNA提取方法的优化 总被引:2,自引:0,他引:2
本文研究中国荷斯坦牛血液在不同温度、时间保存的条件下(4℃保存0d为A组;-70℃保存30d为B组;4℃保存7d为C组)对DNA提取效果的影响和对比试剂盒法(E)、试剂盒改良法(F)、酚-氯仿法(G)提取中国荷斯坦牛血液基因组DNA的效果。试验结果表明:A组与B组差异不显著(P〉0.05);A组、B组与C组差异显著(P〈0.05)。4℃保存0d对DNA提取效果影响最小。在A组中,E与F差异不显著(P〉0.05);E、F与G差异显著(P〈0.05)。综合各方面因素。试剂盒改良法最好。 相似文献
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牛磺酸作为营养强化剂已在食品中,尤其是婴幼儿食品、保健品中得到广泛的应用.综述了天然牛磺酸提取及分离纯化方法研究的最新进展,以期为牛磺酸的深入研究提供参考. 相似文献
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经凝胶过滤层析-离子交换层析-凝胶过滤层析分离方法将蛇毒中的神经生长因子提取并纯化。得到的神经生长因子经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为17000,由231个氨基酸组成。在220.6nm处有1个特征吸收峰。最低活性单位为10ng/mL。 相似文献
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为了全面了解家兔盲肠中的微生物信息,本文采用非培养技术,通过化学、物理裂解和酶解相结合,建立了直接从家兔盲肠内容物中提取总DNA的方法。结果从1g新鲜的盲肠内容物中提取出5.4μg总DNA;所得的DNA能被核酸限制性内切酶降解;经纯化后能用作模板进行PCR扩增。 相似文献
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桑天牛卵啮小蜂基因组DNA的提取及RAPD反应体系的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
桑天牛卵啮小蜂是抑制桑天牛的有效天敌。为使天敌能大量人工繁殖,从分子生物学角度对单头桑天牛卵啮小蜂基因组DNA的提取方法及RAPD反应条件进行了探索。结果表明,采用改良的SDS方法,提取的DNA质量较高,适宜于RAPD-PCR扩增分析。在25μL反应体系中,RAPD分析的优化反应体系为:1.5mmol/L Mg~(2+)、2μL的dNTPs(2.5mmol/L)、320nmol/L随机引物、80ng模板DNA、0.8U TaqDNA聚合酶。 相似文献
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