以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶

用含有TaqDNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株，IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶，利用该酶的热稳定性，反复2次－70℃，75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆；以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的。PCR扩增反应和SDS－PAGE分析表明所制备的Tap DNA聚合酶的纯度，活力，敏感性，特异性均达到试验要求。该方法具有快速简便的优点。     

林海雅马哈摩托生产管理系统研究

为了满足多品种生产的需要，林海雅马哈摩托有限公司导入了雅马哈的PC-PYMAC生产管理系统。介绍了该系统的制造基础信息模块、计划模块、实绩管理模块和盘点模块；针对该系统在林海雅马哈摩托生产应用过程中产生的问题提出了相应的解决错施。     

台湾农产品“希望广场”的考察与启示

为提高我国农产品流通的效率,寻求防止农产品价格大起大落现象的办法,作者于今年五月赴台北农产品＂希望广场＂进行了考察。本文介绍了＂希望广场＂的组建历史、运营模式及绩效、得到的支持及其作用机制等,归纳了对大陆农民组织和农产品流通体系的政策启示。作者认为,农产品直销市场在农产品流通中发挥着显著的作用,对提高消费者福利和增加农民收入有很大帮助,加强农产品直销市场建设刻不容缓。应该将农业市场化建立在农民组织的载体之上,充分发挥农民合作组织在农产品流通中的作用。     

热带果蔬生产农资供应链信息管理关键技术研究

分析农资供应链及农资供应链信息管理的研究现状，提出将无线传感网络、电子标签、二维码、数据库等信息技术应用于热带果蔬生产农资供应链信息管理中的思路，并初步设计了信息管理平台，为今后更深入的研究奠定了基础。     

基于18S rRNA的鸡组织滴虫病PCR诊断方法的建立

河南某鸡场约4周龄鸡疑似发生鸡组织滴虫病.根据鸡组织滴虫18 S rRNA序列设计引物,提取肝脏、盲肠内客物寄生虫DNA,采用PCR方法检测.结果表明,PCR扩增到与预期大小一致的产物,经测序比对,证实为鸡组织滴虫感染.所建立的PCR方法具有灵敏、特异、快速等优点,不仅能用于鸡组织滴虫病临床诊断,还能用于开展流行病学研...     

基于食品安全的供应链合作伙伴关系研究

针对国内近年来频繁的食品安全问题,从食品供应链角度进行分析,查找现有食品供应链影响食品安全的隐患,指出构建食品供应链合作伙伴关系对于保障食品安全的重要意义,并提出构建食品供应链合作伙伴关系的措施,更有效保证食品安全。     

转基因油菜TOPAS 19/2质粒分子多家协同实验及不确定度评定

质粒分子是转基因产品核酸定量检测的一类新型标准物质,具有易制备、周期短、成本低等特点。采用实时荧光定量PCR技术,并协同7家实验室对转基因油菜TOPAS 19/2质粒分子进行了基因组的可替代性研究、协同实验研究及不确定度评定。T检验表明,质粒和基因组所产生的内源和外源基因标准曲线的斜率和线性相关系数没有显著性差异。对多家定值的数据进行了统计分析得出,TOPAS19/2质粒分子的量值结果0.910,扩展标准不确定度（K=2）为0.013。     

One-step RT-PCR for the Detection of Infectious Bursal Disease Virus in Clinical Samples

A single-tube, non-interrupted, one-step RT-PCR has been standardized to amplify the hypervariable region of the VP2 gene sequence of infectious bursal disease virus (IBDV). The technique standardized on purified viral RNA was successfully applied to the detection of the virus directly in clinical samples. The amplified products were confirmed to be IBDV specific by their size in ethidium bromide-stained agarose gel, nested PCR and restriction enzyme digestion. Digestion of the amplicons with StyI restriction enzyme also differentiated classical virus from six very virulent field isolates. The sensitivity of the one-step RT-PCR was found to be 0.2 pg of viral RNA.     

Genotyping of Bovine Viral Diarrhoea Viruses Isolated from Cattle in Northern Italy

Following the first official report of a clinically severe outbreak of bovine viral diarrhoea disease occurring in a farm in northern Italy, which had originated from the use of a live vaccine contaminated with a strain of BVD genotype II virus, a retrospective study on the prevalence of BVDV genotypes in Italy became highly relevant. For this purpose, the genotype of 78 BVDV-positive specimens, obtained in 1998–1999 from dairy cattle in an area near to where the outbreak occurred, was characterized by PCR technology. Two sets of primers, spanning the 5 UTR of BVDV genome, were used sequentially in a first round of RT-PCR, performed on viral RNA extracted directly from 15 clinical samples and 63 BVDV-infected cell-culture fluids; a second PCR assay followed to selectively amplify only BVDV genotype II. All the viruses under study were characterized as BVDV genotype I. As well as contributing to a better understanding of the prevalence of BVDV genotypes in the field, the results of the present study illustrate the possibility that novel BVDV strains can emerge in susceptible animals through the use of contaminated immunobiological products for bovine use.     

PCR技术在农药学研究中的应用

聚合酶链式反应具有灵敏度高、特异性强和操作简便等优点,是应用最为广泛的分子生物技术之一。目前,农药学越来越多的研究涉及分子和基因,PCR技术有着广泛的应用前景。本文简要介绍PCR技术的基本原理和特点,以及其在靶标生物抗药性研究、农药环境毒理、农药作用机理、生物农药的开发等方面的应用。