Dammarane-type glycosides and long chain sesquiterpene glycosides from Gynostemma yixingense

A new dammarane-type glycoside and a new long chain sesquiterpene glycoside, along with nine known compounds 20(S)-ginsenoside Rh1 (3), 20(R)-ginsenoside Rh1 (4), ginsenoside F1 (5), amarantholidoside IV (6), ginsenoside Rc (7), 20(S)-ginsenoside Rg2 (8), 20(R)-ginsenoside Rg2 (9), ginsenoside Rd (10) and gypenoside XLVI (11) were isolated from Gynostemma yixingense. The structures of the new compounds were determined on the basis of spectroscopic analysis, including 1D-, 2D-NMR and ESI-MS techniques as well as by comparison of the spectral data with those of related compounds as 2α,3β,20(S)-trihydroxydammar-24-ene-3-O-[β-d-glucopyranosyl((1 → 2)-β-d-glucopyranosyl]-20-O-[β-d-xylopyranosyl((1 → 6)-β-d-glucopyranoside] (1) (2E,6E)-10-β-d-glucopyranosyl-1,10,11-trihydroxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,6-diene (2).     

绞股蓝籽油食品安全毒理学评价及抗衰老研究

【目的】对绞股蓝籽油(GPSO)进行毒理学分析与评价,为绞股蓝籽油的生物学功能研究及其新资源的开发提供科学依据。【方法】通过小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,对GPSO进行食品安全毒理学评估。在小鼠急性经口毒性试验中,于小鼠禁食16h后,各试验组分别经口一次性灌胃0,4.6,10.0及21.5g/kg GPSO,连续观察14d,记录小鼠的饮食、运动、排泄、中毒表现及死亡情况;在小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验中,试验组小鼠以2.5,5.0,10.0g/kg的剂量分别灌胃GPSO,空白对照组以环磷酰胺为阳性药物腹腔注射给药,每天1次,持续5d,处死后取骨髓制作骨髓细胞涂片,镜下观察并计算微核率;在小鼠精子畸形试验中,以性成熟雄性小鼠为试验动物,其中试验组小鼠以2.5,5.0,10.0g/kg的剂量分别灌胃GPSO,空白对照组以环磷酰胺为阳性药物腹腔注射给药,每天1次,持续5d,在最后1次灌胃7,14,21,28和35d后分别处死小鼠,取附睾制作精子涂片,镜检并计算精子畸形率。通过注射D-半乳糖建立衰老模型,同时以绞股蓝籽油作为抗衰老试验药物,按2.0,3.0,4.0mL/kg的剂量进行灌胃给药,60d后检测小鼠体质量、各脏器指数及血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)浓度,以及小鼠肝脏、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,并观察小鼠肝脏组织的病理变化。【结果】绞股蓝籽油对雌雄小鼠急性经口半数致死剂量LD50值大于10.0g/kg,依据急性毒性剂量分级标准属于实际无毒物质;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验表明,绞股蓝籽油3个剂量组中雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率为2.0‰~3.8‰,与空白对照组相比无显著差异(P0.05),证明绞股蓝籽油不会对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核数造成显著影响;小鼠精子畸形试验表明,绞股蓝籽油低、中、高剂量组与空白对照组之间无显著差异(P0.05),表明绞股蓝籽油对小鼠精子无致畸变作用。抗衰老试验表明,与空白对照组相比,衰老模型组小鼠TC、TG、LDL浓度均显著升高(P0.05),HDL浓度显著降低(P0.05),肝、脑组织中SOD活性和T-AOC能力降低(P0.05),MDA含量升高(P0.05),证实衰老小鼠建模成功;绞股蓝籽油低、中、高剂量组均可缓解因注射D-半乳糖导致的小鼠饮食量下降、毛皮光泽度变差、行动缓慢、体质量增加缓慢甚至下降等症状;与衰老模型组相比,绞股蓝籽油可以显著降低小鼠血清中的TC、TG、LDL浓度(P0.05),显著提高血清中的HDL浓度(P0.05);小鼠肝、脑组织生化指标测定发现,与衰老模型组相比,GPSO中、低剂量组能极显著增强SOD活性(P0.05),显著或极显著降低MDA含量(P0.05),极显著提高T-AOC能力(P0.05),表明绞股蓝籽油可能通过增强机体的总抗氧化能力从而有效清除多余的自由基,降低机体细胞损伤程度,间接保护正常细胞,从而起到抗衰老作用。【结论】初步判定绞股蓝籽油无明显毒副作用,且有一定的抗衰老活性。     

甘味绞股蓝富硒栽培技术

以甘味绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)恩五叶蜜为试验材料,研究了不同浓度的常规硒肥、配合硒肥对甘味绞股蓝中硒含量的影响。结果表明,喷施硒肥后甘味绞股蓝中硒含量明显增加,其中以喷施100 mg/kg常规硒肥效果最好,硒含量达到5.865 mg/kg。     

绞股蓝在水产养殖中的作用探讨

分析了绞股蓝在水产养殖中的药理作用、营养成分和应用方法。     

超声辅助提取绞股蓝多糖工艺研究

[目的]优化超声提取绞股蓝多糖的工艺。[方法]以绞股蓝多糖含量为考察指标,利用响应面法确定绞股蓝多糖的最佳超声提取条件。[结果]结果表明,超声提取的最佳工艺为：提取温度83℃,液料比26ml／g,时间31min,多糖提取率为3.356％。[结论]该研究首次得到了以超声法从绞股蓝中提取多糖的工艺路线,与传统工艺比较超声法省时、节能、提取率高。     

中国绞股蓝种质资源研究进展*

 采用手检和机检相结合的方法,查阅了近20年国内相关文献,从绞股蓝的本草考证与研究历史、分类地位与分类系统、资源调查与资源分布、品种选育与品种推广、分子水平的种质研究以及种质资源的保存利用方面综述了我国绞股蓝种质资源研究的成就和问题,旨在进一步推动绞股蓝种质资源研究。     

低温胁迫对绞股蓝和五柱绞股蓝抗寒性生理指标的影响

对绞股蓝和五柱绞股蓝的幼苗进行lO、5、O和一3℃的低温胁迫处理,以20℃处理为对照,24 h后测定相关抗寒性生理指标.结果表明,随着温度的降低,绞股蓝和五柱绞股蓝植株的电解质外渗率、丙二醛含量以及脯氨酸含量和保护酶SOD、POD和CAT的活性增加.在低温条件下,五柱绞股蓝的电解质外渗率和丙二醛含量显著低于绞股蓝,但脯氨酸含量和保护酶SOD、POD和CAT的活性显著高于绞股蓝,表明五柱绞股蓝的抗寒性强于绞股蓝.     

微波辅助提取绞股蓝皂甙的初步研究

以绞股蓝叶片为材料,采用单因素设计组合,进行了微波辅助提取绞股蓝皂甙的试验。结果表明,微波辅助提取绞股蓝皂甙的最佳条件为:料液比1/25、溶剂pH值为8、浸提温度70℃、浸提时间120 min、微波辐射强度中等、微波辐射处理时间180 s。     

绞股蓝皂苷生物合成后修饰酶基因的cDNA克隆和组织表达特征

从绞股蓝转录组挖掘可能与绞股蓝皂苷生物合成相关修饰酶基因细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)及UDP-糖基转移酶(UDP-dependent glycosyltransferase,UGT)基因的cDNA进行克隆并开展了以下研究。根据课题组前期绞股蓝转录组数据,筛选CYP及UGT Unigenes,利用RT-PCR克隆ORF全长,并结合生物信息学对其编码蛋白进行功能分析,最后通过荧光定量PCR验证其在根、茎、叶的差异性表达。结果克隆得到两个ORF序列,分别命名为CYP94A1和UGT91A1;CYP94A1序列包含1509 bp的开放阅读框架,编码一条含503个氨基酸残基的肽链,具有CYP保守结构域;UGT91A1序列包含1383 bp的开放阅读框架,编码一条含461个氨基酸残基的肽链,具有UGT保守结构域。这两个基因的转录表达均具有组织特异性,在叶或茎中的表达均高于根。CYP94A1和UGT91A1的克隆、转录表达及生物信息学分析为进一步挖掘绞股蓝中CYPs、UGTs及功能验证提供了帮助,增加对CYP和UGT两个超基因家族的认识。     

绞股蓝提取物对自由基清除能力的初步研究

用NBT光还原反应 ,在体外对绞股蓝提取物清除超氧阴离子自由基 (O 2 )的能力进行评价 ,结果显示具有不同口味特征的绞股蓝干草清除O 2 的能力不同 ,以淡味的绞股蓝清除能力最强 ,其叶提取物的清除能力达 74.0 8%。但清除O 2 的能力易受到加热 ,尤其是活性碳和硅藻土处理等因素影响而降低