副猪嗜血杆菌D15蛋白的原核表达及免疫原性分析

为了对副猪嗜血杆菌D15蛋白进行原核表达,本试验通过PCR方法扩增D15基因,之后将其克隆入pET-28a(+)载体构建重组质粒,再将重组质粒转化BL21 (DE3)感受态中,使用0.5mM 部PTG经20℃诱导表达了52Ku的D15重组蛋白.经Western blot试验证明D15重组蛋白具有较高的免疫原性,免疫4周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA试验表明制备的血清效价在1∶20000以上,表明D15蛋白具有良好的免疫原性.     

用2,4-D处理获得可育甘薯组种间杂种

用50mg/L 2,4-D处理杂交不亲和组合甘薯(Ipomoea batatas (L.)Lam.)品种徐薯18(2n＝6x＝90)×L.lacunosa(2n＝2x＝30)以及I.trifida(2n＝4x＝60)×L triloba(2n＝2x＝30)的母本花器,获得了可育种间杂种植株,并对种间杂种进行了过氧化物酶同工酶分析和细胞学观察.特别是徐薯18×I.lacunosa的杂种后代具有明显的结薯性,这是首次报道获得具有结薯性的甘薯品种和第Ⅱ群近缘野生种种间杂种.     

维生素D3及其代谢物对肉鸡生长性能、骨参数及肉质的影响

本文旨在研究日粮添加维生素D3及其代谢物对肉鸡生长性能、骨参数及肉质的影响。试验采用完全随机设计的方法,将768只1?d日龄的雄性肉鸡随机分为4组,每组8个重复,每个重复24只鸡。各组肉鸡的日粮分别在基础日粮中以维生素D3、2,5-羟维生素D3、1,2,5-羟维生素D3和1-α-羟维生素D3的形式补充2000?IU/kg维生素D3。肉鸡分为1～7?d、8～21?d和22～42?d?3个阶段饲养。结果：日粮添加1-α羟-VD3显著降低所有阶段肉鸡的体重和料重比（P＜0.05）。在1～21?d时,2,5羟-VD3组的采食量低于VD3和1,2,5-羟VD3组（P＜0.05）。但在1～42?d时,1-α羟-VD3组较VD3和1,2,5-羟VD3组显著降低了采食量（P＜0.05）,同时,1-α羟-VD3组料重比显著高于其他组（P＜0.05）。1,2,5-羟-VD3组肉鸡屠宰15?min后胸肌亮度值显著高于VD3组（P＜0.05）。肉鸡屠宰后15?min,2,5-羟VD3组腿肌红度值显著高于VD3组（P＜0.05）,同时肉鸡屠宰后24?h,VD3组腿肌红度值显著高于1,2,5-羟-VD3组（P＜0.05）,而VD3和2,5-羟VD3组腿肌黄度值显著高于1-α羟-VD3组（P＜0.05）。结论：除了1-α-羟维生素D3外,肉鸡日粮添加维生素D3及其代谢物（均显示出类似的生长性能和骨性状。 [关键词]维生素D3|代谢物|肉鸡|生长性能|骨参数|肉质     

日粮维生素D3水平对肉兔生长性能、养分消化及血液指标的影响

文章旨在评估日粮添加不同水平的维生素D3对肉兔生长性能、养分表观消化率、肌肉成分及血清生化指标的影响。试验选择35?d断奶、平均初始体重为（893.48±8.06）g的肉兔120只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只。对照组饲喂不添加维生素D3的基础日粮,T1和T2组分别饲料基础日粮+400和800?IU/kg维生素D3的日粮,试验分为35～49?d和50～63?d两个阶段共4周。结果：与对照组相比,T1和T2组肉兔35～63?d平均日增重分别显著提高3.43%和3.0%（P＜0.05）,而T2组肉兔35～49?d料重比较对照组和T1组分别显著降低7.66%和7.29%（P＜0.05）,同时T2组肉兔35～63?d料重比较对照组显著降低2.92%（P＜0.05）。T1和T2组干物质表观消化率较对照组分别显著提高14.37%和12.81%（P＜0.05）,T1组有机物表观消化率较对照组显著提高10.24%（P＜0.05）。此外,T1和T2组氮摄入量较对照组分别显著提高10.4%和9.25%（P＜0.05）。与对照组相比,T1和T2组血清磷浓度分别显著提高27.07%和23.68%（P＜0.05）。结论：日粮补充400～800?IU/kg维生素D3提高了干物质表观消化率及血清磷浓度,其中800?IU/kg维生素D3可以使35～63?d肉兔饲料效率达到最佳。 [关键词]维生素D3|肉兔|生长性能|养分消化|血液指标     

低聚果糖与低聚半乳糖在婴幼儿配方乳粉中的精准化应用

母乳是婴幼儿营养配方的金标准,而低聚糖是母乳重要的活性成分。我国母乳喂养婴幼儿平均每天摄入3.5~6.4 g母乳低聚糖,而婴幼儿配方乳粉（以下简称“婴配粉”）喂养婴幼儿平均每天摄入的低聚果糖与低聚半乳糖仅0.6~3.0 g。为精准模拟母乳低聚糖的作用,低聚果糖与低聚半乳糖的含量至关重要。因此,低聚果糖与低聚半乳糖在婴配粉中的添加量有必要适当提高。     

猪流行性腹泻病毒S1D蛋白的优化表达及其单克隆抗体的制备

为进一步探究猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S蛋白的抗原表位及其功能,本试验通过优化S1D基因的密码子,构建了S1D基因未优化的重组原核表达质粒pET-S1D和已优化的pET-ΔS1D,并进行了诱导表达和纯化。使用SDS-PAGE和Western blotting方法验证S1D、ΔS1D蛋白在大肠杆菌内得到正确表达,利用Image J软件对S1D、ΔS1D蛋白表达量进行灰度扫描,通过t检验分析两者差异性。将纯化的ΔS1D 蛋白免疫 BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选及亚克隆,获得单克隆细胞株。利用体内诱生法制备抗PEDV S1D蛋白的单克隆抗体腹水,使用ELISA、Western blotting、间接免疫荧光试验3种方法对腹水效价及特异性进行检测和验证。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,表达S1D、ΔS1D蛋白的样品均在34 ku处出现正确的目的条带。t检验结果表明, S1D、ΔS1D两者蛋白表达量差异极显著(P<0.01)。ELISA结果显示, 腹水的抗体效价达到了1∶1 000 000,腹水与PEDV病毒粒子和纯化后的ΔS1D蛋白反应均呈阳性,与PEDV N蛋白、pET-32a(+)空载体蛋白和猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV) 5种病毒反应均呈阴性。Western blotting结果显示,腹水与ΔS1D蛋白和PEDV S蛋白分别在34和180 ku处有特异性条带出现,与pET-32a(+)空载体蛋白、正常Vero细胞蛋白均无特异性条带出现。间接免疫荧光试验结果显示,腹水及阳性对照组均能使细胞出现特异性绿色荧光信号,而空白及阴性对照组均未见绿色荧光信号。密码子优化可在原核表达系统中显著提高重组蛋白的表达水平,本研究基于高效表达的ΔS1D蛋白,成功制备了1株能稳定分泌与 PEDV S蛋白特异性结合的单克隆抗体的细胞株,为进一步探究 PEDV S蛋白抗原表位及蛋白功能的研究奠定了基础。     

3D打印技术在水利水电工程施工中应用研究

对3D打印技术进行应用研究,阐述其精度、强度和速度等关键性能指标合理性,能够有效避免特殊形式结构部位的施工带来的成本、工期及质量问题,增加工程效益,并对溢流堰面特殊部位计算表面曲线轮廓,进行实验3D打印,最后总结3D打印在水利水电工程施工中的优势。     

基于HYDRUS-2D的地下滴灌下水分运移数值模拟研究

利用HYDRUS-2D软件模拟了地下滴灌条件下滴头周围黏壤土的土壤水分动态,并与田间观测进行对比;通过分析不同滴头流量对试验地土壤湿润模式的影响,明确了最佳灌水技术参数。结果表明,HYDRUS-2D软件模拟结果与观测值一致,体积含水率均方根误差为1.2%~4.5%,湿润范围均方根误差变化范围为2.1~3.87cm。     

小麦D2型细胞质光敏雄性不育性的研究

1998-1999年,对具有Ae.Crassa细胞质的CN26、核质杂种NC2134、克引11和克引12在克山地区自然光照条件下的育性表现进行了观察研究,结果表明:在自然条件下,播种期对育性有影响,不育系的不育性表现为不同程度的雄蕊心皮化.为利用D2型细胞质光敏雄性不育资源和长日照自然光源进行"二系法"杂种小麦研究利用提供依据.