野生黄蝉兰无菌快繁技术的研究

[目的]建立野生黄蝉兰的无菌快繁技术体系。[方法]以云南野生黄蝉兰为试材,以自交果实为外植体,通过在1／2MS基本培养基中,添加不同浓度的BA和NAA以及附加物质香蕉泥和活性碳进行培养,构建野生黄蝉兰的非共生萌发和快繁技术体系。[结果]野生黄蝉兰在2．0～2．5mg／LBA与0．5～1．0mg／LNAA的激素组合处理下,40d后种子萌发率可达93％;1／2MS＋2．5mg／LBA＋0．1mg／LNAA＋浓度8％香蕉泥培养的野生黄蝉兰丛芽增殖率为320％;1／2MS＋0．3mg／LNAA＋0．3％活性炭诱导生根率达100％,且植株长势正常。[结论]通过植物组织培养技术,成功构建了野生黄蝉兰的非共生萌发和快繁技术体系。     

植物生长调节剂对建兰开花的调控作用研究

【目的】阐述建兰花芽分化与发育过程,针对花芽不同发育阶段,利用植物生长调节剂进行调控,以解决建兰花期不统一、观赏期短的问题,为实现建兰周年生产提供参考。【方法】以建兰品种‘小桃红’为材料,通过解剖观察建兰花芽分化发育特点,分别在分化前期和花芽快速发育期喷施不同浓度的 6- 苄基腺嘌呤（6-BA）、赤霉素（GA3）、萘乙酸（NAA）、碳酰胺（CH4N2O）和 3% 赤霉酸乳油等植物生长调节剂,研究其对建兰各花期花序比例、开花数和花朵直径等开花性状的影响。此外,在排铃期喷施硫代硫酸银（STS）,分析其对建兰花朵开放持续期的影响。【结果】建兰花原基开始分化至花朵开放整个花分化与发育过程需要 30 d,可分为分化前期、花芽分化发育初期、花芽快速发育期、花梗伸长期、排铃期和开花期,共 6 个时期;处于不同发育期的花芽对植物生长调节剂反应不同,花芽分化前期喷施植物生长调节剂组合可促使建兰花期提前 1 个月左右,其中 200 mg/L 6-BA+ 75 mg/L NAA+ 10 mg/L CH4N2O + 50 mg/L 3% 赤霉酸乳油效果最为显著、花期提前 33.03 d;花芽快速发育期喷施植物生长调节剂可提前建兰花期 1 周左右,其中 150 mg/L 6-BA+ 75 mg/L GA3+ 50 mg/L NAA+ 10 mg/L CH4N2O 效果最佳、花期提前 8.30 d。排铃期喷施 100 μmol/L STS 处理可延长建兰单花花期 3.83 d。【结论】不同生长发育时期的建兰有其特殊的成花需求与反应,适宜浓度的植物生长调节剂可有效调控建兰花期,使建兰开花提前或花期延长。     

不同基质对西藏林芝地区杂交兰‘春蕙’品种光合和生理指标的影响

在西藏林芝地区,利用当地常见的腐熟牛粪和羊粪、柳树下采集的腐殖土、半腐熟的玉米和油菜秸秆以及碎石为材料,根据各种材料的特点设计出5个不同的基质配方,以单纯腐殖土作为对照,对杂交兰‘春蕙’品种进行盆栽试验。综合叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率和干物质的积累量等指标来看,腐殖土∶碎石=3∶1是‘春蕙’品种更适宜的基质配方,可在西藏林芝地区推广应用。     

建兰38个品种的RAPD分析

 应用RAPD标记对建兰38个品种的遗传多样性和亲缘关系进行分析。用筛选的18个10 bp随机引物对其DNA进行PCR扩增,共扩增出116个位点,其中多态位点103个,多态位点比率占88.79%,表明建兰38个品种具有丰富的遗传多样性。38个品种间的遗传距离为0.0420~0.5385(均值0.2902)。基于RAPD标记的建兰38个品种的UPGMA聚类结果支持将建兰分为彩心和素心两个变种,以及素心多由彩心变异而来的传统分类观点。研究发现：引物S153-650 bp位点是'闽西鱼魫'、 '鱼魫大贡'、 '鱼魫'和'银边鱼魫'的特异标记,引物S38-1 200 bp位点是'十六罗汉'和'鱼魫'的特异标记,引物S38-800 bp位点缺失是'马耳四季'的特异标记。     

寒兰的的种内变异

对同一居群寒兰的叶(上表皮细胞形状、气孔等)、花(萼片和花瓣的形态、大小、颜色等)及其花粉进行了观察.结果表明,寒兰的花和花粉存在丰富的变异,为培育出更多的优良品种提供了基础.     

兰属品种的RAPD鉴定和亲缘关系分析

用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对兰属7个种的9个品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。从60个随机引物中,筛选出6个对9个供试兰花品种均能产生多态性谱带的引物。在这6个引物所检测的64个位点中,61个位点为多态性位点,占总位点数的95.3%。聚类分析结果表明,不同兰花品种之间存在明显的遗传差异,而且根据RAPD标记进行的兰花品种聚类结果与传统的形态学分类结果基本一致,只是莲瓣兰与建兰组的分类地位有一些差异。     

5种中国兰花RAPD反应条件的优化

以5种中国兰花为材料,提取了其叶片基因组DNA;以春兰叶片的基因组DNA为模板,优化了RAPD的反应条件.试验结果表明：春兰基因组DNA的最适扩增条件为,25μL体系,Taq酶0.08 U/μL,dNTP 240μmol/L,Mg^2＋1.2mmol/L,随机引物0.5μmol/L,模板DNA6.2 ng/μL;反应因子低于最适值,会导致扩增带数减少甚至无带;但若高于最适值,则会出现带的弥散或缺失.     

杂交兰种质资源遗传多样性的SRAP分析

采用SRAP技术对24份杂交兰种质资源的遗传多样性进行分析。筛选出的11对引物组合共扩增出119条谱带,其中102条为多态带,多态性比率86.1%,平均每对引物组合产生9.3个多态性位点。各种质之间的相似系数变化范围为0.43~0.98,平均为0.67。UPGMA聚类分析表明:在遗传相似系数0.69处将24份供试材料划分为5个类群,较好地揭示了杂交兰种质间的遗传多样性与亲缘关系,可为杂交兰种质资源利用、杂交育种亲本选择及杂种后代鉴定提供科学依据。     

LED不同光质对兰花‘霞光’组培苗生长及生理特性的影响

以兰花‘霞光’组培苗为试验材料,采用LED光源发射的单色光谱红光(R)、蓝光(B)、绿光(G)和白光(W)等不同光质的配比组合光对组培苗进行处理,以荧光灯为对照(CK),研究不同光质对兰花‘霞光’组培苗生长和生理特性的影响。结果表明:(1)与CK相比,红蓝绿复合光(RBG)、单色红光(R)和红蓝复合光(1RB)对组培苗的株高、叶长、叶数、根长、根数等有影响,但与对照差异并不显著;1RB处理下植株的干重显著高于CK。(2)与CK相比,在白光光源(W)下,植株的可溶性蛋白含量最高,但与对照差异并不显著;在不同光质处理下,可溶性糖含量差异不显著。(3)红蓝白复合光(RBW)处理下,‘霞光’组培苗叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量最高,显著高于其他处理。相比之下,LED红蓝白复合光(RBW)处理下的‘霞光’组培苗长势最好,可替代普通荧光灯光源,作为‘霞光’组培苗生长的理想光源。     

不同LED光源对碧玉兰组培苗淀粉含量的影响

采用LED光源单色红光、蓝光、绿光及白光不同光质配比7种组合处理,以荧光灯为对照,研究其对野生碧玉兰组培苗叶片淀粉含量的影响。结果表明：在红蓝绿复合光(RBG)下,组培苗的淀粉含量最高,为9.977 8 mg/g,极显著高于荧光灯处理。在单色蓝光(B)下,组培苗的淀粉含量最低,为3.684 5 mg/g,极显著低于荧光灯(CK)和单色红光(R)处理,说明蓝光会明显抑制碧玉兰组培苗的淀粉合成。因此,在碧玉兰组培苗培育过程中,利用LED红蓝绿复合光源(RBG)取代传统的荧光灯光源是值得推荐的。