人工接种测定水稻干尖线虫在水稻上的病害发展动态

 【目的】探讨近年来江苏水稻生产上的重要病害水稻—“小穗头”和水稻干尖线虫间的相互关系。【方法】在水稻“小穗头”上分离出干尖线虫，经人工培养，在温室中接种到镇稻2号和武运粳7号的芽鞘部和叶鞘部，通过测定发病程度，稻谷饱满度，谷粒中线虫虫量和线虫死亡率等指标来确定对“小穗头”形成以及对水稻生长发育的影响。【结果】 镇稻2号“小穗头”与健康稻穗相比水稻株高下降6.7%、稻穗长度减少16.4%、稻谷粒数下降13.5%。在开花期之前，线虫主要分布于叶鞘部和生长点周围，虫量增加40%;花期后，线虫主要分布于稻穗上并且虫量增幅达90.8%。饱粒种子中带虫率、线虫虫量最高，空粒种子则最低。线虫死亡率在胚乳发育正常的种子中要比胚乳发育不正常的种子低。【结论】水稻干尖线虫是造成水稻“小穗头”症状的病原。武运粳7号仅表现“小穗头”而无叶片干尖症状，说明该现象是干尖线虫在水稻上呈现的新症状。     

Population structure and species delimitation of rice white tip nematode,Aphelenchoides besseyi (Nematoda: Aphelenchoididae), in China

Aphelenchoides besseyi is a major nematode pathogen in rice known as the causal agent of white tip disease. In the present study, A. besseyi was recovered from 32 seed samples collected from the major rice-growing regions in China. Nine mitochondrial COI haplotypes and 95 ITS genotypes were identified, suggesting a high genetic diversity and endemism level of A. besseyi in China. Therefore, A. besseyi is likely to have experienced a long history of host–parasite coevolution in China, rather than being recently introduced from other countries. The results of population structure analysis indicated the presence of four clusters within Chinese A. besseyi, but these did not correspond to their geographic distribution. Haplotype H2 was found to be the most widespread. Haplotypes H9 and H13 were most genetically divergent and have been recognized as two cryptic species by molecular species delimitation methods, and with limited support from morphometric measurements. The COI-based phylogeny suggested the ability to parasitize rice has independently evolved at least four times in the genus Aphelenchoides.     

Hot water treatment prevents Aphelenchoides besseyi damage to Polianthes tuberosa crops in the Mekong Delta of Vietnam

Polianthes tuberosa is a commercially valuable flower crop in the Mekong Delta of Vietnam that is propagated by the harvesting and planting of bulbs. Cultivation of P. tuberosa is infected by an endemic Aphelenchoides besseyi nematode that damages a high proportion of plants and persists within the bulbs. Here we report on the comparison of hot water and pesticide treatments as control methods to protect P. tuberosa from A. besseyi damage, and conclude that a hot water treatment consisting of soaking bulbs in water for 30 min at 57 °C is the most efficacious method to produce healthy flowers in a cost effective manner.     

水稻黑点米形成原因初步研究

通过试验研究了水稻黑点米形成的原因。采用田间小区试验,通过98%杀螟丹可溶粉剂浸种杀灭种子中越冬干尖线虫,收获后调查各小区收获稻子中干尖线虫数量及黑点米率,初步明确了水稻黑点米形成是由于干尖线虫的刺吸引起。通过干尖线虫接种,收获的稻子出现黑点米症状,并从黑点米中分离到干尖线虫,进一步证明干尖线虫危害是导致黑点米形成的主要原因。     

从荷兰番红花种球中截获的次薄滑刃线虫的检疫鉴定

宁波口岸从荷兰番红花种球中分离到大量滑刃属线虫活虫,该荷兰群体的主要形态特征为:雌虫尾呈亚圆柱形,尾端半圆形,尾端腹侧有尾尖突长1.5~3.0μm;后阴子宫囊显著,长89.3~118μmm;侧线3条。基于28S、ITS和18S基因DNA序列构建NJ系统发育进化树显示该荷兰群体与次薄滑刃线虫亲缘关系极近且在同一进化分支中。通过形态特征和DNA序列分析,鉴定该荷兰群体为次薄滑刃线虫(Aphelenchoides subtenuis Cobb,1926)。     

水稻干尖线虫SPRYSEC基因的克隆及表达定位分析

效应蛋白是线虫食道腺分泌物的重要组分,广泛存在于植物寄生线虫中,在线虫整个生长发育及侵染寄生中起到重要作用。根据水稻干尖线虫转录组测序结果,并通过RACE法从水稻干尖线虫中克隆到一SPRY基因,命名为Ab-SPRYSEC。该序列全长为2089 bp,包含一个1962 bp的开放阅读框(ORF)。预测编码653个氨基酸,蛋白相对分子量为72.009 kDA,理论等电点为4.82,不稳定指数41.5,属于不稳定性蛋白;保守区预测分析表明,该蛋白含有B302_SPRY和CTLH两个保守结构域,属于SPRY超家族;多序列比对分析表明,该基因编码蛋白与马来丝虫的SPRY(XP_001891979.1)蛋白相似度最高为43 %;蛋白结构分析表明,β-折叠与无规则卷曲是Ab-SPRYSEC蛋白主要结构元件;表达定位分析显示,Ab-SPRYSEC基因的表达位置在水稻干尖线虫食道腺附近。Ab-SPRYSEC基因作为水稻干尖线虫一效应因子,可能在水稻干尖线虫侵染宿主中发挥了重要作用。     

台湾兰花植物寄生线虫的鉴定

 三次分离采集的28个台湾蝴蝶兰(Phalaenopsts)与卡特兰(Cattleya)样本,发现该批兰花带有4种植物寄生性线虫。经形态观察及形态测计,分别鉴定为Helicotylenchus pseudorobustus,Aphelenchoides besseyi,A.composticola及A.aligarchiensiso并认为这两种兰花均为此线虫的新寄主。     

生防细菌Snb331对水稻干尖线虫活性的影响

研究了生防细菌Snb331发酵液原液及不同稀释液对水稻干尖线虫活性及运动行为的影响。结果表明,在1×(原液),2×,4×,6×,8×,10×稀释浓度下,水稻干尖线虫的校正死亡率分别是87.24%,66.75%,57.30%,44.87%,22.75%,18.09%,均与无菌水对照差异显著;其不同浓度的发酵液对水稻干尖线虫的行为影响不同,随着浓度的增大和时间的延长,对水稻干尖线虫活动频率的抑制也增强。     

盆钵珠兰叶斑线虫病的研究——Ⅰ.病原鉴定

珠兰叶斑病的病原线虫,经人工接种尚能诱发草莓矮缩和引起菊花、四季海棠、牡丹和及已(Chloranthus serratus)的叶斑病,用稍加改良的Christie和Crossman平板上的柑桔交链孢(Alternaria citri)或PDA平板上的灰葡萄孢(Botrytis cinerea)培养,它们可以取食平板上的菌丝而繁殖。这种病原线虫的侧带区特有4条刻线,与国内外关于草莓芽线虫(Aphelenchoides,fragariae)都是2条刻线的已有报道不同,但除此以外,这两种线虫的所有其它形态特征几乎全部相似。本文根据上述,同时参照1987年Dr.Hooper为我们在英国复查典型草莓芽线虫侧带时所获得的“是4条刻线”而不是2条刻线的新结果,鉴定珠兰上的叶斑线虫为A.fragariae。     

谷氧还蛋白(AbGrx-1)对水稻干尖线虫在氧化胁迫下的保护作用

【目的】谷氧还蛋白(glutaredoxin, Grx)作为一种抗氧化酶，在通过清除多余活性氧来维持生物细胞氧化还原平衡、降低细胞膜损伤过程中发挥重要作用。水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)能在高温、渗透及氧化胁迫等多种逆境压力中存活。本研究旨在探究Grx在水稻干尖线虫抗氧化胁迫中的作用。【方法】通过cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)，获得了一个水稻干尖线虫谷氧还蛋白基因AbGrx-1，进行了序列比对和遗传进化分析；通过qRT-PCR检测了AbGrx-1在线虫响应氧化和温度胁迫中的表达差异，通过原核表达获得了AbGrx-1的重组蛋白，并分析了AbGrx-1蛋白浸泡对水稻干尖线虫在氧化和高温胁迫下存活的影响。【结果】AbGrx-1基因全长包括90 bp的5＇非翻译区(UTR)、321 bp的编码区和97 bp的3＇UTR，开发阅读框(横跨91至411位)编码106个氨基酸。AbGrx-1蛋白的第24至27位点具有谷氧还蛋白催化残基(CPYC)，分别在第69至第72和第83至第86位点存在保守的谷胱甘肽结合位点RSVP和GGDD，归为Ⅰ类谷氧还蛋白。遗传进化树显示AbGrx-1与燕麦真滑刃线虫(Aphelenchus avenae)Grx亲缘关系最近，位于同一进化分支。AbGrx-1在H2O2处理和12℃下时显著上调表达，但在0℃, 4℃, 37℃和45℃极端温度中下调表达。高浓度H2O2和高温导致水稻干尖线虫死亡率增加，AbGrx-1重组蛋白能显著提高暴露于高浓度H2O2中线虫的存活率，但不影响高温下线虫的存活率。【结论】AbGrx-1参与调控水稻干尖线虫的抗氧化免疫反应，在抵抗氧化损伤、维持线虫生存方面具有重要功能。