TFDG对IL-1β体外诱导大鼠软骨细胞炎性损伤的保护作用研究

体外分离培养SD雄性大鼠膝关节软骨细胞,经甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫荧光染色鉴定后,加入白介素-1β(IL-1β)诱导建立骨关节炎(OA)细胞模型,探讨茶黄素双没食子酸酯(TFDG)对OA软骨细胞的保护作用。细胞形态观察发现TFDG能明显改善OA软骨细胞形态。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)结果显示,TFDG不仅可以上调软骨细胞分子标志物Col Ⅱ mRNA的表达,还可以下调炎症因子IL-1β、IL-6mRNA的表达。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测结果进一步表明TFDG可明显降低炎症因子的分泌。免疫印迹(Western blot)检测结果证明,TFDG预干扰可降低炎症诱导酶环氧化酶COX-2蛋白表达量。这些结果说明TFDG通过减弱炎症反应,从而对IL-1β体外诱导大鼠软骨细胞炎性损伤起到保护作用。     

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鸡胚原代软骨细胞的分离培养及表型鉴定

选取不同日龄的SPF鸡胚进行骨架染色,确定软骨最佳取材日龄为15日龄,分离关节软骨,采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶两步消化法获取软骨细胞。CCK-8法检测细胞增殖率,阿利新蓝染色及实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞标志性基因表达来鉴定分离培养的软骨细胞。结果显示,分离培养的软骨细胞3～5 d时增殖较快,阿利新蓝染色阳性,能够表达sox9、colⅡ、acan、vegfA和mmp13等不同分化阶段标志性基因,且随着体外培养时间的增加,晚期表达基因vegfA和mmp13 mRNA表达上调。结果表明,分离培养的鸡胚软骨细胞具有软骨细胞表型,可作为家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病研究模型。本试验旨在建立鸡胚原代软骨细胞的体外培养体系,以期为家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病研究提供理论依据。     

鹿茸生长的影响因素分析

1．1鹿茸的生长鹿茸和骨化的角统称为茸角,茸角着生于额骨的顶部。在正常情况下,茸角每年新生和脱落一次。茸角的新生和脱落都有一定的规律：茸角的脱落是在每年的春夏季节,这同时也是气温升高的季节,因此,茸角的脱落和新生与季节的变化是相互相承的。茸角的形成过程包括两个明显不同的阶段：一是从新茸萌发到茸皮脱落,此阶段上的茸角称为鹿茸;二是从茸皮脱落到骨角脱落,这阶段上的茸角称为鹿角。     

鹿茸生长的影响因素分析

1 鹿茸生长及其注意事项 1.1 鹿茸的生长 鹿茸和骨化的角统称为茸角,茸角着生于额骨的顶部.在正常情况下,茸角每年新生和脱落一次.茸角的新生和脱落都有一定的规律:茸角的脱落足在每年的春夏季节,这同时也是气温升高的季节,因此,茸角的脱落和新生与季节的变化是相互相承的.     

养鹿前景与鹿的饲养技术

一、前景 鹿属于反刍性的哺乳动物,凡是茸角有医疗保健价值的鹿,统称茸用鹿或茸鹿。茸鹿是一种珍贵的药用经济动物,耐粗饲、抗病力强,饲养成本低,易于管理。我国是世界上驯养茸鹿最早和最先进的国家之一,不但茸鹿种类繁多,而且分布面广,资源丰富。鹿的全身都是宝,鹿皮是珍贵皮革,鹿肉、鹿血都是较好的营养补品,鹿茸是名贵药材,其价值很高。鹿的平均寿命为25年,一只公鹿年产鹿茸5.35～7.26kg,价值万元;母鹿年繁一只仔鹿,三月龄即可卖到5000元以上;而国     

鹿茸对雌性小鼠生殖功能的影响

目的本试验旨在探究鹿茸对雌性小鼠生殖功能的影响。方法雌性昆明小鼠48只随机分为空白对照组以及3mg/kg低剂量组、6mg/kg中剂量组和12mg/kg高剂量组,连续经口灌胃鹿茸14d。结果高剂量组小鼠的雌二醇水平、性器官脏器指数显著高于空白对照组;中剂量组和高剂量组小鼠的子宫外径显著高于空白对照组。结论灌胃给药12mg/kg鹿茸时,可使雌二醇含量增高,促进雌性器官生长发育,增强雌性昆明小鼠生殖功能。     

鹿茸对昆明小鼠精子质量的影响

目的本试验旨在探究鹿茸对昆明小鼠精子质量的影响。方法雄性昆明小鼠48只随机分为空白对照组以及3mg/kg低剂量组、6mg/kg中剂量组和12mg/kg高剂量组,连续经口灌胃鹿茸14d。结果灌胃给雄性昆明小鼠6mg/kg鹿茸和12mg/kg鹿茸时精子活动率、精子数量和精子成活率显著高于对照组;高、中、低三个剂量组对精子畸形率均无显著影响。结论灌胃给药6mg/kg和12mg/kg鹿茸时,可提高雄性昆明小鼠的精子质量。     

灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原（COL-Ⅱ）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的影响。方法 选取C518 大鼠膝关节软骨细胞株,随机分为中药组（灵仙通络方）、西药组（氨糖美辛）和对照组（氯化钠溶液）,进行培养、诱导退变等处理,于给药后第 1、2、3 d,分别检测中药组、西药组和对照组不同浓度下对软骨细胞增殖、COL-Ⅱ及MMP-13表达的影响。结果 同一时间点的中药组、西药组不同浓度之间噻唑蓝（MTT）值差异有统计学意义（P<0.01）。对照组不同浓度氯化钠溶液的MTT值差异不具有统计学意义（P>0.05）。在COL-Ⅱ免疫组化染色中,中药组与西药组和对照组相比差异有统计学意义（P<0.01）,且中药组优于西药组（染色指数χ²=16.26,df=2,P<0.01）。在 MMP-13 免疫组化染色中,对照组较中药组、西药组差异有统计学意义（P<0.01）,且中药组优于西药组（染色指数χ²=54.31,df=2,P<0.01）。结论 C518 大鼠膝关节退变软骨细胞经灵仙通络方干预后能够促进其增殖,调节COL-Ⅱ、MMP-13的表达,延缓膝关节骨性关节炎疾病的发展进程。