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【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T(fast skeletal troponin T3,TNNT3)作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因(NM_001314210.1)和牛TNNT3基因(XM_010821200)mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量(real-time PCR,RT-qPCR)及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织(背最长肌(longissimus dorsi muscle,LD)、半膜肌(semimembranosus muscle,SM)、心、肝、脾、肺、肾)和7个发育阶段(胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300)肌肉组织(背最长肌和半膜肌)中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,MuSCs)中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3(NM_001314210.1)CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本(TNNT3_1—5),其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌(P<0.05);出生后则背最长肌中高于半膜肌(P<0.05)。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11(138bp),体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符(37 kD);相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织(背最长肌和半膜肌)中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。 相似文献
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梨树经过一个夏季的挂果,其体内营养逐渐消耗,且采果后又要进入花芽分化时期‘。这一时期正是为次年丰收打好基础的关键生理时期。然而,我们不少果农对此重要生理时期认识不足,忽视了对采果后的生产管理,导致梨园中的叶片衰黄、病虫猖獗、土壤干旱等不良现象发生。再加上“小阳春”的到来,相当比例的植株便会在10月底至11月初开放花朵,此即为梨树的“二次花”现象。“二次花”的出现,就意味着树体的极其衰弱,次年的少花少果与减产必将产生。因此,如何对梨树采后进行科学管理,保证次年丰收f稳产)优质,是梨树管理的重要环节和重点技术。 相似文献
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9月份以来.CBOT大豆在美豆产量前景改善、南美新豆产量将创下历史最高纪录等预期背景下见顶回落。由最高纪录1789美分/蒲式耳一路回落在1500美分/蒲式耳之下.回落幅度超16%。在市场供应偏紧、需求仍旧旺盛的背景下, 相似文献
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1.幼菇不分化幼菇不分化的原因有两方面。(1)棚温偏低棚温低不适合幼蕾发育分化。处理方法:通过提高棚温即可解决。(2)药物影响为防发病有的菇农使用大量农药拌料,甚至发菌期间也喷洒农药,结果使菌袋内废气浓重,抑制菌丝发生。处理方法:将料面划 相似文献
77.
抗生素对大白菜组织培养形态发生的影响 总被引:14,自引:0,他引:14
研究了卡那霉素(Km)、噻孢霉素(Cef)、羧苄青霉素(Crb)和氨苄青霉素(Amp)对大白菜子叶培养形态发生的影响。研究结果表明,4种抗生素对愈伤组织的诱导作用不大,但对根和芽的分化影响各异。即使低浓度Km也严重抑制根和芽的形态发生。Cef强烈抑制再分化,并有推迟芽和根形态发生的作用。Crb对根和芽的分化无明显抑制作用,分化频率均在70%以上。Amp对根和芽的分化有显著的促进作用,随浓度增加,分化频率逐渐提高,当Amp=1000mg/L时,芽分化频率达96.67%。Crb和Amp也有缩短再分化进程的作用。 相似文献
78.
吴石金 《江西畜牧兽医杂志》1999,(2):5-7
T细胞早期分化是指来自骨髓处于发育分化中的不成熟T细胞,在胸腺内经历筛选,发育成不同表现型分化群,仅有少数成长为免疫功能T细胞。其间,由前体细胞发育至具备免疫活性功能细胞的过程,以免疫细胞编程性死亡(programmedceudeath)或细胞凋亡(... 相似文献
79.
玉米灰斑病现已成为北方玉米产区的主要病害之一,但国内外关于玉米灰斑病菌Cercospora zeaemaydis Tehon & Daniels致病力分化等方面的研究较少,尚未建立该病菌生理分化的鉴别寄主系统,无法明确我国是否存在玉米灰斑病菌致病性分化类群或生理小种及优势菌群和分布,限制了有针对性地进行品种合理布局和抗病育种工作,因此研究玉米灰斑病菌致病性分化鉴别寄主体系是一项重要的基础性工作。作者采用田间成株期鉴定技术,对不同的玉米灰斑病菌菌株进行致病力划分,研究其鉴别寄主体系。 相似文献
80.
胚胎干细胞向神经细胞定向诱导分化方法的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能,有望成为治疗神经系统疾病重要的种子细胞来源。如何高效地诱导胚胎干细胞向特定神经细胞分化是目前研究的热点。本文就胚胎干细胞定向分化成神经细胞的3种方法:RA诱导法、谱系选择法和SDIA法及其移植研究做一综述。 相似文献