表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。     

大骨鸡中MSTN基因表达规律性的研究

本实验以大骨鸡为试材,采用RT-PCR法检测了MSTN基因在大骨鸡不同器官、不同时间的表达情况,结果表明MSTN基因在骨骼肌中表达水平较高,在心肌、肾脏、脑、肠、舌中也有微量表达,但在肺、肝脏中未检测出MSTNmRNA,而且在14日龄时表达水平明显低于35日龄和56日龄,而且在孵化后一周时胸肌中MSTN基因的表达水平达到最低。     

转抗菌肽基因酵母安全评价及在饲料中应用

1945年弗莱明(Fleming)发现青霉素,1952年瓦克斯曼(Waksman)发现链霉素,先后获得诺贝尔奖。抗生素的发现造福人类作出很大贡献。近来,由于滥用抗生素而诱发耐药性病原菌的产生,造成医疗上的困难,又由于抗生素的毒副作用及残留问题,日益引起社会的重视。1998年欧共体禁止抗生素用作畜禽饲料添加剂,     

猪雌激素受体基因研究进展

雌激素受体(ESR)是一种核酸受体，具有转录调控蛋白质的功能，影响着雌激素基因在雌性脊椎动物组织的表达，从而对第二性征、繁殖周期、生殖力、妊娠维持等方面产生影响。本文对雌激素受体的分布、生物学作用、分子结构、基因定位、多态性及其与猪繁殖性能的关系等方面作一综述。     

cDNA Cloning and Sequence Analysis of Rice Sbel and Sbe3 Genes

Two starch-branching enzyme (SBE) in rice, is known to be a key enzyme in amylopectin biosynthesis. The cDNA of two SBE(starch-branching enzyme) genes SheI and Shed encoding SBE Ⅰ and SBE Ⅲ (two major isoforms in rice) were cloned by an improved RT-PCR technique, from a template cDNA libray, derived from the total mRNAs extracted from the immature seeds of a japonica rice Wuyunjing 7. DNA sequence analysis showed that the size of the cloned SheI and Shed cDNAs were 2490 and 2481 bp long, respectively, including their entire coding sequences. Comparison analysis indicated that the nucleotide sequence of She3 was the same as that of shed (Genbank Accession No. D16201) as reported previously. There were only four base-pairs difference,which resulted in changes of two deduced amino acids between the cloned She1 cDNA and the reported she1 (Genbank Accession No. D11082). The cloned SheI and Shed cDNAs make it possible to improve rice starch quality through genetic engineering.     

嗜水气单胞菌gyrA氟喹诺酮抗性决定区的克隆与分析

研究了从病鱼体内分离的嗜水气单胞菌对氟喹诺酮类药物耐药性的分子机理。以4株对诺氟沙星等氟喹诺酮类药物耐药菌株及2株敏感菌株为模板，参照杀鲑气单胞菌gyrA基因序列，设计了1对引物，进行gyrA基因氟喹诺酮抗性决定区PCR扩增，将扩增产物克隆入pMD18-T载体，转化入大肠埃希氏菌DH5α中，小提质粒，酶切鉴定，测序并分析比较耐药菌和敏感菌的氨基酸残基序列。发现耐药菌有5个氨基酸突变位点，分别是83位点的Ser→Ile,92位点的Leu→Met,174位点的Ile→Phe,202位点的Asn→Asp,203位点的Leu→Arg，耐药菌突变后的氨基酸残基均比敏感菌正常的相对应氨基酸残基分子量大。83位点的突变与大肠埃希氏菌的耐药性突变一致。122位点具有保守的Try。     

迪卡配套系猪RYR1的PCR分析及其利用的研究

试验从鸡东县永安猪场随机抽取迪卡配套系猪B系和E系42头，通过PCR扩增技术和酶切鉴定．采用克隆技术进行测序，来检测是否含有氟烷基因序列。经过以上技术检测这42头猪均没有氟烷基因。     

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)研究进展

猪传染性胃肠炎 (TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)引起的一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病。 TGE首次由Doyle和 Hutchings1 946年在美国报道 ,日本 (1 95 6年 )和英国 (1 95 7年 )先后报道该病 ,这之后欧洲、北美、亚洲等多个国家相继报道发生了 TGE,现已成为一种世界性猪的疾病。我国从 6 0年代起就有TGE的报道 ,近些年来有进一步流行的趋势 ,尤其是冬季和早春寒冷季节常呈地方性暴发流行 ,给养猪业造成极大危害。在 1 984年和 1 986年间 ,欧洲北美等地又报道了一种特别的 TGEV自然缺失变异株 -猪呼吸…