山麦冬果实花青素生物合成中内参基因的筛选与验证

  目的  为山麦冬Liriope spicata果实花青素生物合成研究筛选最佳内参基因。  方法  基于山麦冬转录数据,通过变异系数以及变化倍数初步筛选出山麦冬15个候选内参基因。以幼果期和成熟期山麦冬果实为材料,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术测定候选内参基因的表达,采用ΔC_t值法、geNorm、NormFinder和BestKeeper等软件包分析候选基因的表达稳定性,最后选取来自6个基因家族(C4H、CHS、MT、UFGT、MYB和bHLH)的10个目的基因(C4H、CHS-1、CHS-2、MT、UFGT-1、UFGT-2、MYB-1、MYB-2、MYB-3、bHLH),对所选内参基因组合进行验证。  结果  4种方法分析得出的候选内参排序存在一定差异,需综合4种方法的几何平均值作为综合排序。根据geNorm软件推荐的最适内参数目为4个,即CNNM、GPR107、EF1-α、G6PD-2最稳定,PDP最不稳定。对10个目的基因表达量标准化验证发现:以CNNM、GPR107为内参组合与选用4个基因作为内参组合无显著差异,相关系数可达0.999 9,且选用双内参组合比4个内参组合的可操作性强,而不适合的内参基因(PDP)会对RT-qPCR结果产生严重偏差。  结论  以CNNM、GPR107作为组合是山麦冬果实花青素生物合成研究的最佳内参基因。图6表5参39     

基于无人机遥感的湿地松花青素含量预测

[目的]花青素是植物叶片中的第三大色素,功能多样,抗氧化性较强,不仅有助于叶片损伤修复,而且可以通过吸收光能而减少叶绿素对光的吸收,调节光合作用,从而起到光保护的作用.因此,了解花青素含量的动态信息,可以间接了解植物的营养健康状况,为植物培育管理提供一种可靠的参考指标.湿地松(Pinus elliottii)作为我国重要的造林树种,适时测定湿地松针叶中花青素含量对于了解湿地松生长生理状态具有重要的意义.提出一种用无人机遥感技术反演湿地松叶片花青素含量的方法.为利用多光谱无人机选择湿地松试验林中高花青素含量资源提供技术基础.[方法]以湿地松苗为试验对象,利用便携式紫外-可见光荧光仪获取湿地松冠层叶片的花青素含量实测值以及利用多光谱无人机同步获取湿地松冠层叶片的多光谱反射率.选取了5个光谱值(RED、GREEN、BLUE、NIR、REG)以及与湿地松花青素含量关系较密切的植被指数GNDVI、LCI、NDRE、NDVI、OSAVI、R/G、MACI、ARI和MARI共9种.对14种光谱指数进行不同的数据处理后分别基于偏最小二乘、支持向量机、BP神经网络方法建立花青素含量的预测模型,并分别验证,比较选出最优建模方法和预测模型.[结果]比较经5种数据预处理方法(Original(OG)、Standard Normal Variate(SNV)、blockScale(BS)、blockNorm(BN)、Detrend(DET))和5种重要变量选择方法(不处理、遗传算法与PLS回归相结合(ga_pls)、逆向变量消除(bve_pls)、正则化消除(rep_pls)、显著多元相关算法(smc))组合处理后,发现数据经过去趋势化处理和逆向变量消除处理后,基于支持向量机建立的模型为最优建模方法,此模型对湿地松冠层花青素含量预测可以达到最佳效果,验证集决定系数R2为0.61,均方根误差RMSE为1.34％.[结论]基于无人机多光谱技术,去趋势化处理和逆向变量消除处理与支持向量机相结合的建模方法可实现对湿地松冠层花青素含量的预测.     

紫花含笑开花进程中花被生理生化与色素变化

紫花含笑(Michelia crassipes)为木兰科含笑属唯一开紫色花的植物,其花色和观赏期受开花进程影响。本研究以紫花含笑花被为试材,通过测定自然花期过程中花被各项生理指标及色素质量分数,利用主成分分析法筛选出花被片衰老生理的主要影响因子,探讨开花进程中生理生化与色素变化对花被衰老的作用机理。结果表明:丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、过氧化物酶(POD)活性、叶绿素质量分数、可溶性糖质量分数、花青素质量分数、类胡萝卜素质量分数、游离脯氨酸质量分数和超氧化物歧化酶(SOD)活性8个参数可作为反映花被衰老的有效生理指标。初步认为,活性氧自由基积累是引起紫花含笑花被发生生理衰老的重要原因,可溶性蛋白质量分数增加与花青素质量分数降解是影响花衰老进程的主要生理因子。     

水稻紫色颖壳突变体的转录组分析

鉴定水稻花青素新基因及揭示其代谢机制,用于水稻新品种选育,是创制功能性水稻的手段之一.为探讨水稻紫色颖壳形成对花青素积累代谢途径的作用,以从水稻籼稻转化体组织培养中筛选获得的1个紫色颖壳杂合突变体(PiX)为材料,采用Illumina HiSeqTM 6000高通量转录组学(RNA-Seq)技术对其自交获得的突变型、正...     

脂质体介导RNA干扰质粒转染鸡成骨细胞条件的优化

本试验的目的是优化转染条件,提高在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导下鸡TRPV6基因RNA干扰(RNAi)质粒转染入成骨细胞的效率。将携带绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pSIREN-retroQ-shTRPV6在LipofectamineTM2000介导下转染至鸡成骨细胞,对转染前细胞融合度、质粒质量与脂质体体积比及转染时间进行优化,在荧光倒置显微镜下观察并计算转染效率,MTT法检测在不同质粒质量与脂质体体积比条件下成骨细胞的活性。结果表明,在转染前细胞融合达到90%以上,质粒DNA与脂质体比例为1∶2.5时转染效率最高,并且在转染后48 h转染效果最好,对细胞的毒性作用较小。本试验优化了脂质体介导转染鸡成骨细胞的条件,提高了转染效率,为用RNA干扰技术研究鸡TRPV6基因功能奠定了基础。     

紫娟茶与勐海地区紫芽茶生化成分含量分析

以紫鹃和勐海县各大叶群体品种茶园的紫芽茶为材料,对不同色度紫芽茶中的生化成分含量进行了测定。结果表明,在勐海茶叶种群中,不同颜色芽叶的茶树叶片中茶多酚、咖啡碱、儿茶素和水浸出物差异较小,但叶片中氨基酸、水溶性糖、黄酮类物质含量差异较大,变异系数分别为12.61%、13.68%、12.56%;试验所取样品均采自勐海县大叶群体品种茶园,但是花青素含量变异系数达到109.72%,且茶树芽叶颜色深浅与花青素含量高低表现出明显的正相关性。     

重庆不同品种葡萄酿酒过程中原花青素含量变化

[目的]为葡萄原花青素利用提供理论依据。[方法]测定重庆地区4个不同品种葡萄酿酒前后、酿酒过程中不同阶段原花青素含量变化,以及原花青素含量与pH、色度的关系。[结果]不同品种葡萄果汁和酒液原花青素含量不同,同一品种在不同发酵阶段酒液原花青素含量不同,葡萄酒原花青素含量与果汁原花青素含量、酒液酸度和色度呈显著正相关;果汁原花青素含量越高,所酿葡萄酒液原花青素含量越高。在一定范围内(3.2~4.0)酒液pH越高,原花青素含量越高,酒液色度值越大。[结论]葡萄原花青素利用价值较大,可进一步研究利用。     

紫甘蓝花青素智能指示膜的制备及其在牛乳新鲜度监测中应用

为研究不同紫甘蓝花青素含量对大豆分离蛋白基智能指示膜性能的影响,提高指示膜的综合包装性能,考察指示膜对巴氏杀菌乳新鲜度的监测效果。以大豆分离蛋白（Soy Protein Isolate,SPI）为原料,添加紫甘蓝花青素（Purple Cabbage Anthocyanins,PCA）制备指示膜,对其结构、热性能、机械性能、色度及其稳定性和pH敏感性进行表征和分析,并将指示膜应用于巴氏杀菌乳新鲜度监测中。结果表明：相对于大豆分离蛋白膜,含有4%（质量分数紫甘蓝花青素的指示膜,拉伸强度从2.46 MPa增加到3.77 MPa,断裂伸长率从105%增加到131%;与标准白的色差从21.23增加到52.88,指示膜明度降低,色度偏黄绿色,结晶温度比SPI膜升高了3 ℃。指示膜的色度在常温下5 d内不出现可视性色差,但pH敏感性强。将指示膜应用于巴氏杀菌乳新鲜度监测中,指示膜的颜色随着牛乳变质由绿变红,指示膜与原始膜的色差变化与巴氏杀菌乳的pH值变化呈相反趋势,且色差可视。因此,该指示膜具有监测巴氏杀菌乳腐败过程的潜力,应用前景广阔。     

原花青素的提取方法及稳定性研究进展

综述溶剂提取法、超临界二氧化碳提取法、仪器辅助提取法等国内常用的原花青素提取方法,分析 pH、温度、光、金属离子、添加剂等因素对原花青素稳定性的影响,并探讨今后原花青素的研究方向与趋势,以期为原花青素的深入研究提供理论支持。     

不同金属离子和还原剂对落叶松松塔原花青素热稳定性影响的研究

[目的]研究落叶松松塔原花青素的热稳定性,建立原花青素变化的动力学模型。[方法]以落叶松松塔为原料,通过添加几种食品中常见的金属离子(Mg2+、Zn2+、Fe2+)和还原剂(NaHSO3),探讨了落叶松松塔中原花青素的热稳定性和降解情况。[结果]Mg2+、Zn2+或Fe2+的存在不利于原花青素的热稳定性,其降解反应活化能分别为15.01、27.88、21.60 kJ/mol,反应符合一级动力学模型(R20.744 4);NaHSO3的存在会提高原花青素的热稳定性,反应符合一级动力学模型(R20.656 3),其降解活化能为36.36 kJ/mol。并建立起几种条件下的原花青素的降解动力学模型,通过验证表明模型与实测值拟合程度好。[结论]该研究为落叶松松塔原花青素保质期和残留率的预测提供了科学依据。