猪肚菇粗多糖脱蛋白脱色工艺优化研究

以猪肚菇粗多糖为原料，对其脱蛋白和脱色工艺条件进行优化。采用蛋白酶法和sevag法联合除蛋白，研究不同酶添加量、处理温度、pH值和处理时间等因素对蛋白脱除率的影响，采用正交设计对工艺条件进行了优化。猪肚菇多糖脱色采用大孔吸附树脂，系统研究树脂静态吸附与动态吸附试验。结果表明：最佳脱蛋白工艺为：2 mg/mL猪肚菇粗多糖溶液，木瓜蛋白酶用量1 mg，酶解温度60 ℃，酶解pH值5.5，酶解时间5 h，sevag试剂处理2次，猪肚菇多糖蛋白质脱除率和多糖损失率分别为85.18％和23.41％；最佳脱色工艺为：选用NKA-9树脂脱色，静态吸附时树脂用量1 ∶ 10，时间5 h，温度30 ℃，动态吸附时pH6.0，洗脱速率3 BV/h，猪肚菇多糖脱色率和多糖损失率分别为84.19％和20.79％。     

蜱半胱氨酸蛋白酶抑制分子研究进展

蜱是以吸血为生的体外寄生虫,能传播多种病原体。控制蜱的传统方法是使用杀虫剂,但会产生药物残留等问题。为了找到控制蜱及蜱传病的新方法,必须在分子水平上了解蜱的相关生理过程。蜱半胱氨酸蛋白酶抑制分子是一类抗蛋白酶分子,主要作用于半胱氨酸蛋白酶的抑制调控。论文介绍了蜱半胱氨酸蛋白酶抑制分子的结构和分类,以及在蜱的吸血、血液消化、蜱的先天免疫及对宿主免疫调节等生理过程的重要作用,同时也综述了半胱氨酸蛋白酶抑制分子具有抗寄生虫和抗癌的作用,为全面了解蜱半胱氨酸蛋白酶抑制分子提供参考。     

橡胶树半胱氨酸蛋白酶基因(HbCP2和HbCP3)的克隆与表达分析

半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase,CP)是参与植物多种生理过程的一类重要的蛋白酶。为探究CP家族基因在橡胶树(Hevea brasiliensis)中的生理作用,本研究从橡胶树胶乳中克隆了两个CP基因的全长cDNA,分别命名为HbCP2(1 245 bp)(GenBank登录号:KF771829)和HbCP3(1 268 bp)(GenBank登录号:KF771830),分别编码约41和40 kD的蛋白质;获得的基因DNA序列全长分别为1 919和1 634 bp,均包含4个外显子和3个内含子;属于木瓜蛋白酶(C1)家族,分别与同属大戟科植物蓖麻(Ricinus communis)(86.86%)及麻风树(Jatropha curas)(84.74%)的一个CP的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,HbCP2在雄花而HbCP3在胶乳中的表达量最高;HbCP2和HbCP3的表达受割胶、伤害、乙烯利、赤霉素和茉莉酸调控,但不同基因对同一种处理或同一基因对不同处理的反应程度存在较明显差异。研究结果表明,HbCP2可能参与橡胶树的环境胁迫应答和细胞组织衰老过程的调控,而HbCP3可能参与橡胶树的胶乳再生调控以及病害胁迫应答。本研究为橡胶树CP基因家族的研究,探讨CP在橡胶树中对胁迫应答和胶乳再生调控机制提供了相关信息。     

碱性蛋白酶对大豆浓缩蛋白起泡性的影响

制取低成本、高蛋白含量的大豆浓缩蛋白时,乙醇产生变性作用,从而降低了大豆浓缩蛋白的功能特性,因此本研究采用碱性蛋白酶对醇法大豆浓缩蛋白进行改性.通过对酶浓度、底物浓度、改性时间与改性温度的单因素实验,针对起泡性进行研究,然后进行正交实验,最终得出碱性蛋白酶提高醇法大豆浓缩蛋白起泡性最佳工艺条件:酶用量(E/S)为6%、底物浓度为(W/V)8%、酶解时间为2h、酶解温度为50℃,在此条件下测得的起泡能力为113.3%,起泡稳定性为56.7%,分别提高到酶改性前的2.5、3.6倍.     

不同来源福林试剂对蛋白酶活测定结果的影响

福林试剂是蛋白酶活检测的重要试剂之一。试验室配制福林试剂和市售福林试剂对蛋白酶活检测进行研究,结果表明:试验室配制福林试剂放置30d后与酪氨酸反应的显色液的吸光度值与市售福林试剂在5%水平上没有显著性差异。试验室配制福林试剂的RSD在0.30～1.67之间,市售福林试剂的RSD在0.63～1.49之间,其精密度均较高。试验室配制与市售福林试剂分别与酪氨酸反应,显色液吸收波长趋势一致,最大吸收波长均在736～755nm,没有显著性差异。试验室配制与市售福林试剂分别检测同一种样品时,检测值经方差显著性分析,在p<0.05水平上没有显著性差异。按照GB/T23527-2009法制得的福林试剂性质与市售福林试剂均可用于蛋白酶活检测,结果没有显著性差异。     

肌苷发酵条件及含量分析研究

发酵液中肌苷和次黄嘌呤含量的分析,可采用薄层层析法,展开剂选用醋酸丁酯:正了醇:冰醋酸:水.这种方法省时,经济,分离效果好,本实验以枯草杆菌营养缺陷型(ade~-,his~-,thi~-)为肌苷产生菌,主要通过改变培养基的成份来提高肌苷产量,通过几次发酵试验,肌苷产量从4.2g/l升到9.0g/l.     

中性蛋白酶制剂包埋研究

用海藻酸钠和单硬脂酸甘油酯作壳材料,氯化钙作固化剂,对中性蛋白酶制剂进行了包埋研究,结果表明,在100 mL,0.7%的海藻酸钠溶液中加入0.5 g单硬脂酸甘油酯,10 g中性蛋白酶粉,滴入1%的氯化钙溶液后固化5 min,经干燥和涂膜能明显提高抗胃蛋白酶分解能力和耐胃酸能力.     

利用贝类加工废弃物生产水产调味料的技术研究

近年来,随着国内外快餐食品、方便食品的迅猛发展,鲜味剂尤其是营养型天然鲜味剂的需求也快速增长。现阶段,营养型天然鲜味剂主要包括水解动物蛋白(HAP)、水解植物蛋白(HVP)、酵母抽提物等。随着贝类养殖量的增大,冻贝柱及干贝柱的加工量也相应增加,加工产生大量的贝类废弃物没能得到很好的利用,     

不同酶处理对再造烟叶梗膏的提质效果

为梗膏在再造烟叶生产上的提质增效提供技术支撑，通过设置蛋白酶、木瓜蛋白酶和多酚氧化酶不同酶处理梗膏，对不同酶处理梗膏进行致香成分分析，并对不同酶处理梗膏制备成再造烟叶产品进行有害成分分析和感官质量评价。结果表明：在醇类、醛类和酮类等8个大类致香成分中，除酯类致香成分含量木瓜蛋白酶-酸性蛋白酶处理梗膏较未经过酶处理的梗膏有所降低外，其余类别致香成分含量木瓜蛋白酶-酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶-多酚氧化酶处理梗膏均较未经过酶处理梗膏增加；木瓜蛋白酶-酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶-多酚氧化酶处理梗膏再造烟叶产品感官评价总分均高于未经过酶处理的梗膏，分别提高13.38%和21.83%；危害性指数，未经过酶处理梗膏再造烟叶产品最高，为5.19，木瓜蛋白酶-多酚氧化酶处理梗膏再造烟叶产品最低，为3.29，木瓜蛋白酶-酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶-多酚氧化酶处理梗膏再造烟叶产品较未经过酶处理梗膏再造烟叶产品分别下降17.92%和36.61%。不同酶处理后的梗膏能有效改善再造烟叶产品的感官品质，降低木质杂气和刺激，从而提高梗膏的利用率。     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂防治桑天牛的室内生测

从双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensisG rube)cDNA文库中筛选出半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPI)的编码基因,将该编码基因转化到大肠杆菌Escherichia coliDH5α并实现胞外表达,得到转基因工程菌E.coliDH5α。对工程菌的杀桑天牛作用进行了研究,结果表明该工程菌对桑天牛成虫和幼虫较对照具有显著致死作用。