猪α干扰素基因突变、表达及其高效抗病毒活性筛选研究

利用RT-PCR方法从猪肝细胞总RNA中扩增出编码猪α干扰素基因,根据大肠杆菌偏嗜性及活性位点改造基因并克隆至原核表达载体p ET21a,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白诱导表达和鉴定。重组蛋白以包涵体形式表达,经变-复性及纯化处理后,获得多种不同基因型的高纯度猪α干扰素。用细胞病变抑制法在MDBK/VSV系统上进行抗病毒活性测定,结果表明经过基因改造的猪α干扰素(Po IFN-M6)具有更高抗病毒活性,约为2.97×108U/mg。本研究为猪α干扰素基因工程产品的研发及其在临床兽医的应用奠定基础。     

蛙皮抗菌肽的提取及抗肿瘤活性检测

<正>抗菌肽是一类防御性生物活性物质,广泛存在于细菌、植物、昆虫及动物中,具有抗菌、抗病毒及抗原虫作用。此外,抗菌肽还具有较强的抗肿瘤活性。抗菌肽的抗肿瘤机制特殊,可以选择性地作用于肿瘤细胞,通过破坏细胞膜、细胞骨架、细胞器等达到杀伤肿瘤细胞的目的,具有对动物正常细胞毒性较低,作用迅速,不易产生耐药性的特点[1]。基于以上特点,寻     

蜂胶作为动物疫苗佐剂的研究及应用

<正>蜂胶(Propolis)是一种具有芳香气味的胶状固体物,由蜜蜂从树干或植物芽孢上采集树脂(树胶)后,与其上腭腺、蜡腺自身分泌的的分泌物混合加工而成。其内含有丰富的生物活性物质,具有多种生物学特性,兼具广谱抗病毒、抗细菌、抗霉菌、消炎、止痒、增强免疫、抗氧化、降血糖、降血脂等多种功能,广泛应用于人类的医疗、保健行业,作为新兴的保健品也倍受推崇,现已成为各国科学研究的热点[1]。蜂胶用作疫苗佐剂优势明显,获得了良好效果,迅速成为了当前佐剂开发热潮中的佼佼者,被广泛应用于动物疫苗领域,并     

扶正解毒散及其超微粉体外抗鸡传染性法氏囊病病毒药效比较

采用鸡胚法和细胞法2种体外抗病毒试验比较扶正解毒超微粉(FZSM)和扶正解毒散(FZ)的抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)效果。鸡胚法:在FZSM和FZ 2种煎煮液对鸡胚安全浓度范围内分别选取3个浓度,采用先加煎煮液后接种病毒和先接种病毒后加煎煮液2种方式,接种10日龄SPF鸡胚,测定2种煎煮液对IBDV ELD50的影响。细胞法:在FZSM和FZ 2种煎煮液对鸡胚成纤维细胞(CEF)安全浓度范围内分别选取3个浓度,采用先加煎煮液后接种病毒和先接种病毒后加煎煮液2种方式,加入到长成单层的CEF中继续培养,观察并统计各孔的细胞病变(CPE)。结果显示,FZSM和FZ 2种煎煮液均可以降低IBDV的病毒滴度和CPE抑制率,高浓度效果优于低浓度;同浓度FZSM效果优于FZ;预防作用效果优于治疗作用效果。结果表明FZSM和FZ均具有体外抗IBDV的作用,且FZSM效果优于FZ。     

桂枝复方水煎液和大黄复方水煎液体外对猪圆环病毒2型抗病毒效果初探

[目的]通过对某猪场采集的组织样本进行猪圆环病毒2型分离鉴定及培养,探讨桂枝复方水煎液和大黄复方水煎液体外对猪圆环病毒2型抗病毒效果.[方法]将从某猪场采集的疑似猪圆环病毒2型阳性病料经无菌处理后接种于猪肾细胞进行病毒的分离培养,PCR方法鉴定,细胞体外培养分离株病毒并分析其生长特性,然后通过桂枝复方水煎液和大黄复方水煎液处理病毒侵染的细胞,荧光定量PCR方法测定细胞内病毒载量.[结果]分离培养出猪圆环病毒2型分离株BY-F6代与GenBank中已收录的猪圆环病毒2型ORF2序列同源性可达到99.47％～99.60％;该病毒可在猪肾细胞中进行体外培养,48 h为病毒的复制高峰期,TCID50为10-4,3/0.1mL.6.25 mg/mL的桂枝复方水煎液体外对猪圆环病毒2型具有显著的预防作用(P＜0.05)及极显著的治疗作用(P＜0.01),3.13 mg/mL的桂枝复方水煎液可显著降低细胞内猪圆环病毒2型的复制(P＜0.05),桂枝复方水煎液不具有体外直接杀灭猪圆环病毒2型的能力.5.00 mg/mL的大黄复方水煎液体外对猪圆环病毒2型具有显著的预防作用(P＜0.05)及极显著的杀灭作用(P＜0.01),2.50 mg/mL的大黄复方水煎液可直接参与杀灭猪圆环病毒2型,显著降低细胞内该病毒的载量(P＜0.05),大黄复方水煎液体外对猪圆环病毒2型感染后的治疗作用不佳.[结论]桂枝复方水煎液和大黄复方水煎液体外对从某猪场分离及鉴定的猪圆环病毒2型具有一定的抑制作用.     

中草药在猪生产中的研究进展

生猪养殖生产效率低、发病率高、饲养成本较高仍是制约我国养猪业快速发展的一大难题.中草药具有耐药性、毒副作用小、残留少、安全性高等优点受到广泛关注,可提高生猪生产性能、生产效率、免疫等.综述近年来中草药在猪生产性能、抗氧化、免疫力、抗病毒和疾病防治等方面的作用,并提出尚需要进一步研究的问题,以期为中草药在生态养猪生产上的应用提供参考.     

海产食品中药理活性成分研究进展

对近几年来海洋水产食品中抗肿瘤、抗菌抗病毒、抗溃疡、抗心血管疾病等方面的活性物质的研究进行了综述，旨在为水产品的开发和综合利用提供帮助。     

抗猪繁殖与呼吸综合征病毒中药多糖复方的体外筛选

为了筛选出抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)效果较好的多糖复方,以前期筛选出的枸杞多糖、当归多糖、板蓝根多糖、淫羊藿多糖、黄芪多糖、黄精多糖组成8个多糖复方,以OD570值和病毒的抑制率为评价指标,采用MTT法测定3种不同的作用方式下各多糖复方抗PRRSV感染细胞能力。结果表明,多糖复方的3种作用方式,以对病毒的直接杀灭作用效果最好,其中复方②(淫羊藿-黄精-当归-黄芪)和复方③(淫羊藿-黄精-板蓝根-黄芪)3种加药方式的抗病毒效果均较好,可作为抗PRRS的候选方剂。     

三种中药提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用

在前期筛选具有抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)作用的中药研究基础上,选取药效较好的三种中药：穿心莲、芦根和夏枯草。为进一步研究其有效抗病毒成分,采用MTT 法观察了穿心莲内酯盐、芦根多糖和夏枯草多糖成分对猴肾上皮细胞系(Marc-145) 生长的影响,分别采用阻断、抑制、直接杀灭3种作用方式观察了各成分抗RPPSV感染作用。结果显示：穿心莲内酯盐对细胞最大安全浓度为0.16 mg/mL,芦根多糖为0.575 mg/mL,夏枯草多糖为1.125 mg/mL;芦根多糖在三种方式上均有不同程度的抗PRRSV作用,而穿心莲内酯盐和夏枯草多糖阻断PRRSV作用不明显,抑制和杀灭PRRSV作用明显。结果表明穿心莲内酯盐、芦根多糖和夏枯草多糖均有抗病毒作用,为抗病毒中药的主要药效成分。     

团头鲂血清抗病毒半乳糖凝集素样蛋白的分离与鉴定

将草鱼出血病病毒(GCHV)的结构蛋白与Sepherose-4B偶联制备亲和柱，经亲和层析从团头鲂血清中分离到一种蛋白，能凝集兔红细胞，其血凝性依赖于β巯基乙醇的存在。红细胞凝集抑制实验证实该蛋白与D半乳糖有最高的亲和力，其次为甘露糖。梯度PAGE测得其分子量约为240000，SDS梯度PAGE证实该蛋白由分子量为15000的单个亚基组成，亚基之间没有共价连接。以上特性与半乳糖凝集素相符，故称其为团头鲂抗病毒半乳糖凝集素样蛋白。抗体阻断试验证实，此种凝集素样蛋白是团头鲂血清抗病毒及红细胞凝集活性的主要成分。N末段的氨基酸序列为Lys-Val-Asn-Leu-Asp-Glu-Lys-Cys-Pro-Phe，检索GenBank，未发现与这一段序列同源的蛋白质。