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31.
用RT—PCR技术检测蓝乱病病毒的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
蓝舌病病毒非结构蛋白NS1基因在各型中具有高同源性,可作为群特异检测的依据。采用NS1基因中210bp的区段作为PCR扩增模板,经逆转录酶合成第一股cDNA后,再进行PCR扩增。结果对BTV可扩增出特异片段,而鹿流行性出血病病毒和茨城病病毒则不出现扩增。 相似文献
32.
33.
PCR方法鉴别肉骨粉中的动物成份种类 总被引:9,自引:0,他引:9
为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片断大小分别为271bp、199bp、196bp、148bp,运用PCR技术建立了鉴定这四种动物源性成分的方法。结果分别扩增出四种动物的特异性条带,证明该PCR方法具有很高的特异性和敏感性,而且成本低廉,简便易行,因此可以作为鉴别肉骨粉种类的常规方法。 相似文献
34.
二温式多重PCR同时检测鸡的6种呼吸道病病原方法的建立 总被引:8,自引:1,他引:7
设计了6对分别针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV),禽流感病毒(AVI)、鸡毒素霉形体(MG)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、新城疫病毒(NDV)和滑液霉形体(MS)的特异性引物,根据反转录滞酶链反应(RT-PCR)和多重PCR原则,优化建立了一次PCR反应同时检测6种禽呼吸道病原的二温式多重PCR。该方法可同时扩增出6条区段大小与设计相符符的特异性片段,即IBV 1720bp,AIV 1050bp,ILTV647bp,NDV310bp,MS207bp,对人工感染鸡临床样品检测结果证明,该方法可用于临床诊断。 相似文献
35.
36.
RT-PCR方法快速诊断猪传染性胃肠炎 总被引:7,自引:0,他引:7
根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)标准毒株(Purdue-115)的ORF6(N基因)的基因序列,设计俣成了一对引物Li01/Li02用反转录聚俣酶链反应(RT-PCR)技术对发病猪的粪便进行检测。结果得到与预期大小相一致的约1174bp(N基因)的PCR产物,与从参照毒株TGEV TH-98扩增出的片段大小相一致。进一步用限制性内切酶进行分析,发现从发病猪火花名扩增出的N基因与参照毒株TH-98株具有相同的限制性内切酶图谱,从而证实本病例致病病毒为TGEV。 相似文献
37.
38.
PCR技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究 总被引:22,自引:1,他引:21
本研究合成了伪狂犬毒糖蛋白gp50基因引笺,该引物能够扩增糖蛋白gp50基因中434-651之间的217bpDNA片段,该片段含 SalI酶切位点,应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应扩增结果全为阳性。 相似文献
39.
为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速,准确的鉴定,东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体DNA进行特异性扩增的PCR方法。 虎线粒体DNA细胞色素B(Ctyb)段由1140个碱基组成,通过用Wdnasis软件比较10只苏门达腊虎、15只东北虎、7只孟加拉虎、3只印支虎及5只华南虎Ctyb的碱荃序列,寻找到它在Ctyb段的保守区域,再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿,黑麂、赤鹿、獐、… 相似文献
40.
荧光PCR法定量检测动物源性饲料中的牛、羊成分 总被引:1,自引:0,他引:1
疯牛稿是由于健康牛食入含有致病性朊粗的人工蛋白质饲料(肉骨粉)所致,而目前尚未见能有效、快速地检测饲料中牛、羊成分的技术报道。本文在前期研究的基础上.运用荧光定量PCR法.针对牛、羊、鸡、猪几种不同动物的特异性基因序列设计了牛、羊两种动物的特异性探针,通过对整个PCR过程的实对荧光监测,来鉴定饲料中的牛、羊成分,并对其定量范围做了简单的计论。本方法能有效解决普通PCR的样品污染问题,具有特异性强、是敏度高、重复性好等特点。 相似文献