山羊TNNT3基因可变剪切及其对骨骼肌细胞分化的作用

【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T（fast skeletal troponin T3,TNNT3）作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因（NM_001314210.1）和牛TNNT3基因（XM_010821200）mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量（real-time PCR,RT-qPCR）及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织（背最长肌（longissimus dorsi muscle,LD）、半膜肌（semimembranosus muscle,SM）、心、肝、脾、肺、肾）和7个发育阶段（胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300）肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells,MuSCs）中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3（NM_001314210.1）CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本（TNNT3_1—5）,其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌（P<0.05）;出生后则背最长肌中高于半膜肌（P<0.05）。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11（138bp）,体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符（37 kD）;相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。     

浅谈原蚕桑园的冬期管理

主要从清园、冬耕、挖补、剪枝、施肥、及病虫害防治等方面介绍了桑园冬季管理技术。     

影响中药药理作用的几项因素

1中药基原(原植物、动物和矿物)中药材绝大多数是中国自产的,少数为移植或进口的。在品种上,历代本草著作中屡有增加,不少本草书指出了历史上中药品种的混乱情况。故现在对其进行认真的考证、分析、鉴定的工作,是十分重要的。例如,目前全国用的贯众、独活、厚朴等中药,就来源于20多种不同种属植物。同一中药大青叶,     

优质稻津原E-28特征特性与栽培技术

津原E-28常规粳稻品种,在天津稻区全生育期177d左右,株高117.3cm,穗长22.0cm,千粒重30.2g,对稻曲病、条纹叶枯病表现高抗(HR),稻瘟病表现中抗(MR)。抗早衰,茎秆粗壮坚韧,抗倒伏。后期活秆成熟。米质指标达到国标等级优1标准。适于机插秧新技术栽培。     

信息集锦

<正>舟曲泥石流灾后动物防疫工作全面展开甘肃省舟曲县特大泥石流灾害发生后,农业部第一时间派出动物防疫工作组和专家组,迅速开展救灾和灾后防疫工作,目前,各项工作正在积极有序进行中。一是协调有关部门开展农牧系统人员救助     

小龙虾土池提早繁育试验

2010年10月起,姜堰市溱湖龙虾养殖专业合作社实施了由泰州市水产站承担、姜堰市水产站参与实施的克氏原螯虾规模化高效生态养殖技术示范与推广,现将本次繁育试验情况介绍如下。1材料与方法1.1池塘条件池塘选择在靠近河沟,水源充足、水质良好、无污染且进排水方便、池底铺设塑料网布,配备微孔增氧设备,试验池塘6口,面积分别为10×667m2、5×667m2、8×667m2、9×667m2、11×667m2、7×667m2,合计50×667m2。池塘水深0.8～1.2m,pH值     

一个六能级原子系统的交叉克尔效应分析

对六能级原子与2个强激光场和2个弱探测场相互作用产生的交叉克尔效应进行了研究。通过建立相关物理模型推导出系统有效哈密顿量。结果表明，交叉克尔效应随着2个弱探测场的增强而增强。     

乌拉特中旗草原沙漠化成因及防治

一、沙漠化成因 1、自然因素 巴彦淖尔市乌拉特中旗草原总面积19328平方公里，由高平原、山地、丘陵及少数河谷构成。     

甘肃省主要农作物种子（马铃薯脱毒种薯（原原种、原种））生产许可证核发办事指南

项目名称：马铃薯脱毒种薯（原原种、原种）生产许可证核发 项目类型：前审后批 核准内容：是否具备生产马铃薯种薯（原原种、原种）的资格 法律依据：     

饲料原料成分的检测及保证产品质量的措施

饲料原料中各种营养成分的含量是合理配制饲粮的最重要依据,只有掌握实际购人的饲料原料的各种营养成分含量,才能设计出最佳的合理的饲料配方。 采用“国标”饲料养分检测方法对玉米、豆粕、小麦麸、进口骨粉、贝粉及维生素A、E、B_1、B_2、B_6等原料中的主要养分做了检测,发现有的养分