采用ASPCR技术检测抗药性雨久花ALS突变基因 碱基种类的探讨

等位基因特异性扩增(Allele-specific PCR简称:ASPCR)技术是一项快速、简便、低成本的检测等位基因单核苷酸多态性的新方法。作者针对雨久花感抗磺酰脲类生态型ALS基因编码区第592位碱基密码(ALS氨基酸第197位)特征,采用在引物3′末端设有胸腺嘧啶核苷酸(感性)或鸟嘌呤(抗性)核苷酸的2种引物,对延边稻田发生的雨久花感抗磺酰脲类生态型ALS基因编码区第592位进行了ASPCR。检测结果显示,当以引物3′末端设有胸腺嘧啶引物时,感性类型出现ASPCR扩增带,而抗性类型无带出现,反之抗性类型有带而感性类型无带,检测到延边稻田发生的抗磺酰脲类雨久花生态型的ALS 197位点的脯氨酸被组氨酸替代,证明了该方法的有效性和可靠性。     

杀菌剂羟菌唑对油菜菌核病菌生长发育的影响

用电子显微镜技术和细胞化学技术,研究了羟菌唑对油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)生长发育的影响。扫描电镜观察发现,药剂处理后病菌菌丝生长明显受到抑制,菌丝粗细不均匀,呈不规则肿大或缢缩,分枝明显增多。超微结构研究表明,药剂处理后,病菌菌丝细胞壁不规则加厚,以菌丝顶端细胞壁加厚尤为明显,并有大量电子致密度高的物质存在;与对照菌丝相比,病菌菌丝隔膜肿大、畸形,发育受阻;有的菌丝体内有新菌丝产生,且染色较深。细胞化学标记分析结果表明,药剂处理后,病菌菌丝细胞壁的β-1,3-葡聚糖和几丁质的标记密度明显高于对照菌丝,说明药剂处理后,这2种成分在细胞壁内显著增加。病菌菌丝细胞壁成分的变化表明,羟菌唑影响了病菌细胞结构及其功能。     

几丁质酶与植物的抗病性

综述了几丁质酶在植物抗病性方面的研究进展。几丁质酶在体外抑制病原菌的生长；病原物的侵染诱导植物几丁质酶活性升高和产生新的几丁质酶同工酶，这些高活性的几丁质酶或特异性的同工酶提高了植物的抗病性；构成组成型表达几丁质酶基因的转基因植物，可有效地抵抗病原物的侵袭。由于几丁质酶和病原菌的多样性及其在植物体内分布的不同，使得各种几丁质酶在植物抗病性中的作用也不尽一样。     

薰衣草DXS基因的克隆、表达分析及原核表达

【目的】 研究拟克隆薰衣草DXS基因,并分析其表达,为揭示该基因在调控薰衣草萜类物质合成中的分子机理提供研究基础。【方法】 以薰衣草杂花为试材,同源克隆薰衣草DXS基因,进行基因序列分析、表达量比较和原核表达。【结果】 (1)薰衣草DXS基因开放阅读框长为2 181 bp,编码由726个氨基酸组成的蛋白质序列;薰衣草DXS蛋白等电点为6.57,分子量约为78.39 KDa,具有高度的保守性,与狭叶薰衣草、冬凌草、毛喉鞘蕊花的DXS蛋白亲缘关系相近;(2)DXS基因在杂花花器官的衰败期表达量最高,在法国蓝花器官的盛开期表达量最高,DXS基因在杂花花器官五个不同发育时期的表达量均高于法国蓝;DXS基因在杂花花萼中表达量最高,在法国蓝雄蕊中表达量最高,DXS基因在杂花花器官5个不同组织表达量均高于法国蓝(雌蕊、雄蕊除外);(3)在37℃、IPTG 0.8 mM条件下诱导4 h后,DXS蛋白表达量最大。【结论】 DXS基因表达量与薰衣草精油产量存在正相关关系。     

栗疫病菌对板栗几丁质酶活性的诱导

以板栗 (Castanea mollissima Bl.)实生苗和嫁接苗 (怀黄 )为试材 ,研究了栗疫病菌 (Cryphonectriaparasitica)菌块、CFE、ME等对板栗几丁质酶的诱导 ,测定了几丁质酶活性、比活性 ,并对其进行初步纯化。结果表明 ,菌块对板栗几丁质酶总活性、比活性的诱导效果最佳 ;接种后 35～ 4 0 h几丁质酶活性持续上升并达到高峰 ,之后开始下降。能够同时检测到板栗几丁质酶的内切酶和外切酶 ,以内切酶活性稍高。初步确定板栗几丁质酶的分子质量为 6 0 ku     

G protein signalling involved in host recognition and mycoparasitismrelated chitinase expression in Trichoderma atroviride

Mycoparasitic species of Trichoderma are commercially applied as biological control agents against various fungal pathogens. The mycoparasitic interaction is host specific and includes recognition, attack and subsequent penetration and killing of the host. Investigations on the underlying events revealed that Trichoderma responds to multiple signals from the host (e.g. lectins or other ligands such as low molecular weight components released from the host's cell wall) and host attack is ac…     

鲜黄梨不同树形果实糖分积累与蔗糖代谢相关酶活性研究

研究了平棚形、"V"字形、"Y"字形和疏散分层形整形修剪下鲜黄梨果实的糖分积累过程及其与蔗糖代谢相关酶活性的关系。结果表明,鲜黄梨果实成熟时糖组分以果糖、蔗糖、葡萄糖为主,果糖含量最高,蔗糖和葡萄糖含量差异不大;不同树形果实中,果糖、蔗糖和葡萄糖以及蔗糖代谢相关酶的活性变化趋势一致,但不同树形梨果含糖量均以平棚形果实最高,蔗糖合酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)的活性也以平棚形果实最高,"V"字形的次之,疏散分层形的最低。     

La（Ⅲ）与UV-B胁迫对查尔酮合成酶（CHS）结构影响的初步研究

前文已证明La（Ⅲ）与查尔酮合成酶（CHS）多肽链上O或者N原子发生作用,进而影响CHS分子内部酪氨酸（Tyr）、色氨酸（Trp）残基,导致CHS微结构改变。但随着La（Ⅲ）浓度的改变,Tyr和Trp残基随之发生改变的机理尚不清楚。CHS分子中的Tyr及Trp残基有内源荧光,同步荧光光谱是研究蛋白质与外源物质作用的有效方法。鉴此,本文以不同剂量La（Ⅲ）和UV-B辐射胁迫处理后的CHS为研究对象,运用同步荧光光谱（波长差（Δλ）=70nm）,初步研究了La（Ⅲ）和UV-B对CHS分子结构的影响。     

玉米蛋白多肽对鹅不同组织脂肪酸合成酶定位表达的影响

选用免疫组化技术,探讨玉米蛋白多肽对鹅不同组织脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,FAS）定位表达的影响。选取1日龄昌图豁鹅240只,公母各半,随机分为4组,每组设6个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础日粮低、中、高剂量组分别于基础日粮中添加玉米蛋白多肽100、300、500 mg/kg。于30和60日龄分别采集动物肝脏和皮下脂肪组织,运用免疫组化法分析两种组织中FAS的表达量及分布。结果表明,鹅两种组织中FAS的表达主要分布在肝脏内皮细胞胞质和胞核及脂肪细胞膜上,且随着鹅日龄增加,FAS含量均增加;玉米蛋白多肽的添加可促进鹅肝脏中FAS的表达,抑制脂肪组织中FAS的表达;高、中、低3个剂量组肝脏中FAS含量,鹅60日龄时分别比30日龄升高47.75%、36.21%、158.74%,增幅均高于对照组（11.00%）;而60日龄时,3个剂量组脂肪组织中FAS含量分别比30日龄降低22.34%、46.43%、49.17%。结果提示,玉米蛋白多肽呈现双重作用,在鹅日粮中较长时间低剂量水平（100 mg/kg日粮）添加,可有效促进肝脏中FAS表达,降低脂肪组织中FAS含量,从而有利于调控机体脂类代谢,提高动物胴体品质。     

中国北方部分地区麦田荠菜对苯磺隆的抗性水平

为明确北方地区冬小麦田荠菜对苯磺隆的抗性水平,运用培养皿法和温室盆栽法分别测定了山东、山西、河南、河北、陕西5省13个地区采集点麦田潜在抗药性生物型对苯磺隆的抗性水平,并分别测定了驻马店梁祝镇采集点荠菜潜在抗药性生物型和敏感生物型乙酰乳酸合成酶(ALS)对苯磺隆的敏感性。培养皿法测定结果表明:驻马店梁祝镇采集点荠菜抗药性生物型对苯磺隆的抗性水平最高,抗性倍数为6.17倍,其他采集点荠菜抗性倍数在0.94～2.04倍之间,仍处于较为敏感状态。温室盆栽法测定结果表明:驻马店梁祝镇采集点荠菜抗性倍数仍为最高,达到233倍, 其他地区采集点荠菜抗性倍数在1.23～3.73倍之间,尚未产生明显的抗药性。离体条件下,苯磺隆对荠菜抗药性和敏感生物型ALS的抑制中浓度(IC50)分别为0.664 μmol/L和0.053 3 μmol/L,抗药性生物型的抗性倍数达12.5倍。结果表明,驻马店梁祝镇采集点荠菜已对苯磺隆产生了较高水平的抗药性,而其体内ALS敏感性降低可能是抗药性产生的原因之一。