抑制消减杂交法分离与鉴定灵芝G蛋白β亚基基因

灵芝细胞在液体静置和振荡培养方式下,抗癌物质灵芝酸的产量有显著的差别。采用抑制消减杂交法分离了灵芝细胞在两种不同培养方式下差异表达的基因,对构建的差减文库进行筛选后获得了一个灵芝的EST序列。根据这个EST序列,采用RACE-PCR的方法成功克隆到了灵芝G蛋白β亚基（Gb）基因（GenBank登录号GQ293361）。序列分析显示这个基因cDNA全长1217bp,编码了313个氨基酸。同源性分析表明其编码的氨基酸与其他蘑菇类真菌Gβ的氨基酸序列同源性较高,与Coprinopsis cinerea（XP₀01830441.1）、Lentinula edodes（AAP13580.2）和Schizophyllum commune（XP₀03029882.1）的一致性分别达到91%、91%和90%。实时荧光定量PCR结果表明这个基因在液体静置培养方式下的表达量显著高于振荡培养。     

马氏珠母贝蛋白的分离及分子量分布研究

试验结果表明,马氏珠母贝全脏器各分离蛋白组分占总蛋白含量分别为:非蛋白氮1.48%,肌浆蛋白33.20%,肌原纤维蛋白13.14%,碱溶性蛋白21.54%,基质蛋白30.65%;贝肌肉各分离蛋白组分占总蛋白含量分别为:非蛋白氮0.83%,肌浆蛋白26.56%,肌原纤维蛋白18.48%,碱溶性蛋白30.34%,基质蛋白23.79%;马氏珠母贝蛋白氨基酸组成均衡,呈味氨基酸及支链氨基酸含量高,但在各蛋白组分中的含量存在一定差异性.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定的分子量分布结果显示,2种原料蛋白的肌浆蛋白分子量分布范围较宽,集中在200～19 kDa,肌原纤维蛋白分子量分布集中在200～45 kDa,碱溶性蛋白集中分布在41～3 kDa.     

前列腺素的作用机理及其应用

前列腺素(prostaglandins,PGs)是前列烷酸(prostanoic acid)的衍生物,分子的基本结构为含一个环戊烷及两个脂肪酸侧链的二十碳脂肪酸,分子量为300～400.目前已知的天然前列腺素,根据环外双键的数目分为PG1,PG2,PG3等三类,又根据环上取代基和双键位置的不同而分为A、B、C、D、E、F、G、H、I等9型,其中在C-9有酮基,在C-11有羟基的称为PGE,在这两处都有羟基的为PGF.     

我国五大湖日本沼虾线粒体COI基因部分片段序列比较

对我国五大湖日本沼虾100个野生个体的线粒体细胞色素氧化酶亚基I（COI）部分序列进行了测定和分析，经比对获得578bp核苷酸片段，发现49个变异位点，得到35个单倍型，包括7个共享单倍型，各群体都具有较好的单倍型多态性和核苷酸多态性，其中鄱阳湖群体遗传多样性相对最高。AMOVA分析表明，五群体间总遗传分化系数F_st＝0.31873 （P<0.05）， 群体间具有较高的遗传分化。MEGA3.1软件计算五群体的Kimura 2-paramter遗传距离，洞庭湖群体和巢湖群体之间的遗传距离最远为0.0191，巢湖群体和洪泽湖群体之间的遗传距离最近为0.0051。以同属胖掌沼虾（Macrobrachium inflatum）为外群分别构建了NJ和UPGMA系统树，结果显示洞庭湖和鄱阳湖为一族群，太湖、巢湖和洪泽湖为一族群。     

超高分子量耐温抗盐聚丙烯酰胺

在三次采油技术中，聚合物驱油是较为成熟的技术。经试验证明，它具有高效、投入产出比高、稳产、对环境污染小等优点。目前使用的是部分水解聚丙烯酰胺，分子量大多在1800万左右，由于这类聚丙烯酰胺不具备耐温抗盐的性能，仅适合于地层温度低，矿化度较低的矿区。然而我国的大部分油藏都是高地温，高矿化度地层，地层的温度多在70℃以上，矿化度也多在4000ppm以上，因此开发耐温抗盐的驱油聚合物，     

应用飞行时间质谱仪测定双峰驼诱导排卵因子（纯品）的分子量

应用基体辅助激光解析／电离飞行时间质谱仪快速，准确地测定了公驼精清内诱导排卵因子全序列的分子量为８２５１．５１道尔顿；它向固定位序的分子量为６３６０．３６道尔顿。上述数据为确定该因子的一级结果提供了精确的依据。     

为害小麦新害虫——显脉污灯蛾Spilarctia bisecta Leech (Lepidoptera: Arctiidae)

小麦是我国三大粮食作物之一, 其在生产过程中受到多种害虫为害;在调查重庆市潼南区小麦病虫害过程中新发现一种鳞翅目害虫为害小麦, 对其进行形态学及细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(cytochrome oxidase Ⅰ, COⅠ)基因序列鉴定, 确定其为显脉污灯蛾Spilarctia bisecta Leech。污灯蛾属中有多种为害农作物的害虫, 但显脉污灯蛾在中国还未有为害小麦的确切报道, 这一发现提醒我们应当注意小麦和其他禾本科作物上的潜在害虫。     

中国大鲵脑cDNA文库构建及促甲状腺激素β亚基基因cDNA的克隆和序列分析

以大鲵脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建技术构建了cDNA文库.经检测,文库初始滴度为5.0×105 cfu·mL-1,重组率为91.70%,插入片断大小在0.35～3.9 kb,平均插入片段大小为0.791 kb,文库扩增后滴度为4.0×109 cfu·mL-1.随机挑选200个阳性克隆测序,经生物信息学分析,发现20个片段与已报道的基因有较高同源性,包括促甲状腺激素基因、生长激素基因及催乳素基因等,其中三个克隆为促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因.序列分析表明,TSHβ cDNA全长序列为705 bp,包含417 bp开放读码框,编码138个氨基酸序列,其中前19个氨基酸为大鲵TSHβ亚基信号肽部分,后接119个氨基酸组成的TSHβ亚基成熟肽.同源性分析显示,大鲵TSHβ亚基与两栖类牛蛙、蟾蜍及爪蟾同一蛋白的同源性分别为53.6%、52.2%和60.3%.采用邻接法和最大简约法对部分脊椎动物TSHβ氨基酸序列构建分子系统树,结果显示有尾目大鲵为两栖动物中较早分化的一支,表明其进化地位较原始.RT-PCR组织分布分析发现,TSHβ基因除垂体有表达外,性腺也有少量表达.     

黑麦和小麦高Mr亚基的比较研究：I.两类亚基的分离,生化特性鉴定及其…

对小麦高Ｍｒ谷蛋白亚基与自黑麦的类似蛋白质的结构特性进行了比较研究，用２个黑麦品种（Ｄａｎｋｏ和Ｈａｌｏ）和１个小麦品种（Ｒｅｋｔｏｒ）的脱脂面粉分离高Ｍｒ的亚基，分离方法是，先在６０℃还原条件下用５０％（ｖ／ｖ）的丙醇溶液提取，然后用６０％（ｖ／ｖ）的丙醇溶液使之沉淀，层析出来并冻干的亚基的含量Ｄａｎｋｏ，Ｈａｌｏ和Ｒｅｋｔｅｒ分别为０．３３％，０．３２％和０．９１％（占脱脂面粉的重量百分数），     

酶法提取椰子蛋白质及其对亚基的影响

研究酶制剂的种类、用量、提取温度、pH、料液比等因素对椰子蛋白质提取率的影响,通过正交试验研究最佳的提取条件。得到的椰子蛋白质进行SDS-PAGE分析,研究酶法提取对椰子蛋白质亚基组成的影响。结果表明,添加质量分数0.3%的风味蛋白酶的提取效果最好,各因素对提取率影响的次序为:料液比>pH>温度>提取时间,其中,料液比和pH对提取率的影响达到了显著水平;最佳工艺参数为:酶质量分数0.3%、50℃、pH8.5、料液比1∶15和时间2h,在此条件下,椰子蛋白质的提取率为78.28%。SDS-PAGE分析表明,风味蛋白酶对椰子蛋白的酶解作用十分显著,与缓冲溶液提取的椰子蛋白质相比,酶法提取的椰子蛋白质中小分子质量亚基含量很高。