卤虫携带白斑综合征病毒的研究

卤虫是是,蟹苗种培育的关键动物性饵料,查清其能否携带白斑综合征病毒,对培育健康苗种至关重要。2002年7月至10月,自盐田中取野生卤虫,经暂养后选20尾抱卵雌虫,每尾置1个烧杯中,投喂单胞藻,产卵后取出亲体;20d后,每个烧杯中取5尾子一代个体,利用巢式体外DNA扩增技术对亲体和子一代成体进行WSSV病毒检测,检测结果显示：卤虫中可扩增出特异性的,与引物设计吻合的DNA片段;DNA测序分析表明,扩增片段的DNA序列与白斑综合征病毒序列一致;野生卤虫携带白斑综合征病毒的阳性率为58%,实验条件下野生卤虫后代的阳性率为43%,同一家系中,亲代与子代携带病毒的情况不完全一致,不能确实白斑综合征病毒可否通过繁殖,在卤虫世代间进行垂直传播,研究结果表明：卤虫很可能是白斑综合征病毒的携带者,苗种培育和养殖期间投喂卤虫可能造成虾,蟹感染白斑综合征病毒,卤虫检疫是培育健康苗种的关键措施。     

重庆卷丹病毒检测与脱毒方法研究

为建立一种卷丹（Lilium lancifolium Thunb.）的脱毒快繁技术。以重庆南川种植的卷丹为材料,通过RT-PCR检测表明,其主要含百合斑驳病毒（Lily mottle virus, LMoV）和百合无症病毒（Lily symptomless virus, LSV）。采用38 ℃和4 ℃高低温交替处理卷丹珠芽,通过连续2次直剥1.0~1.5 mm的茎尖接种到10 mg/L病毒唑培养基中培养,检测脱毒效果。结果表明,该方法能有效脱除LMoV和LSV病毒,脱毒率分别为86%和88%,茎尖成苗率均为90%。利用无毒幼苗外层鳞片在培养基（MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖）中进行组培效果最佳,芽诱导系数达6.35;不定芽在培养基（MS +2.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+30 g/L蔗糖）中增值最显著,增殖系数为3.39;鳞片在添加50 g/L蔗糖的继代培养基中生根效果最优,生根率为98.72%。可获取大量脱毒幼苗,方法简便,可操作性强,为重庆卷丹产业发展提供技术支持。     

邻菲萝啉比色法检测羟自由基的研究

Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自由基可氧化邻菲萝啉Ｆｅ２＋变为邻菲萝啉Ｆｅ３＋,前者最大吸收峰为５１６ｎｍ,后者５１６ｎｍ处的吸收峰消失。ΔＡ５１６与邻菲萝啉、Ｆｅ２＋及Ｈ２Ｏ２呈量效关系,３７℃保温６０ｍｉｎΔＡ５１６趋于稳定。     

鸡毒霉形体感染的PCR检测方法的建立及应用

用多聚酶链反应检测了鸡毒霉形体种内菌株的特异性ＤＮＡ片段,并用该法对人工感染鸡及野外野群进行了ＭＧ感染的分子流行病学调查。结果表明,通过基因扩增及电泳,仅ＭＧ出现特生扩增条带,最低能检出１８ｐｇＭＧＤＮＡ,说明该方法具有很高的特异性和敏感性。人工感染６０只鸡,３ｄ后即可用ＰＣＲ查出ＭＧ阳性,６ｄ后１００％为阳性,对照鸡全部为阴性。与分离培养的结果完全一致。ＰＣＲ对野外鸡群的ＭＧ检出率为１０．５－３     

盐分胁迫下树木生理特性初探

通过盆栽试验,结果表明,在ＮａＣｌ胁迫下,群众杨,绒毛白蜡的生长受抑制。随着Ｎａ＾＋含量的啬,光合速度和叶绿素含量在减少,而脯氨酸,丙二醛累积在增加;绒毛白蜡比群众杨抗逆性强,从而为筛选抗盐碱树种提供科学依据。     

应用PCR-RFLP分析鉴定鸡毒支原体

本试验合成１对引物,对鸡毒支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ,ＭＧ）、滑液支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｓｙｎｏｖｉａｅ,ＭＳ）１６ＳｒＲＮＡ和２３ＳｒＲＮＡ基因的间隔区序列进行ＰＣＲ扩增,然后分别用ＲｓａⅠ、ＤｒａⅠ对上述扩增产物限制性酶,所获得的片段进行琼脂糖凝胶电泳。     

PCR方法检测奶牛粪便中鼠隐孢子虫

从含有鼠隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中,直接提取 Ｄ Ｎ Ａ 用作 Ｐ Ｃ Ｒ 模板,用 １ 对人工合成的寡核苷酸作为 Ｐ Ｃ Ｒ 引物,扩增大小为 ５４０ ｂｐ 的特异片段。 Ｐ Ｃ Ｒ 产物经电泳鉴定,表明可从含隐孢子卵囊的奶牛粪便标本 Ｄ Ｎ Ａ 抽提物中扩增出目的片段,而其他几种寄生虫及阴性对照均不能扩增出特异片段。本方法的敏感性最低可检测到含卵囊 ４００ 个／ｍ Ｌ 的样本,具有敏感性高、特异性强的特点。     

水稻IR26悬浮细胞与白叶枯病菌互作的过敏反应现象

 当水稻IR26悬浮细胞与白叶枯病菌的不亲和小种(JXOV)互作时,在数小时内,悬浮细胞死亡率可达60%、膜透性增加40%、呼吸升高一倍多,而水稻IR26悬浮细胞与白叶枯病菌的亲和小种(JXOⅢ)互作时,在数小时内,悬浮细胞死亡率只有20%、膜透性只增加20%、呼吸升高不足40%,这些数据表明在水稻悬浮细胞与白叶枯病菌互作系统中可能存在着和水稻植株与白叶枯病菌互作系统中相似的互作机制。     

Authentication of flying-fish-meal content of processed food using PCR-RFLP

Nucleotide sequence and polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of the 3′-portion of the mitochondrial 16S RNA gene (rDNA) coding sequence were used to differentiate between flying fishes and other fishes that are frequently used in ago-noyaki production. In this study, we successfully distinguished between flying fishes and the other fishes by combining amplified DNA fragments with universally designed primers and digesting the PCR products with AfaI and MfeI restriction endonucleases. PCR-RFLP of 15 ago-noyaki, 2 noyaki, and 8 other processed flying-fish products were analyzed to authenticate flying-fish content among processed seafood products. After digestion of the PCR products with both enzymes, we found that all ago-noyaki and processed flying fish products contained either two or three DNA fragments of ~200, 300, and 530 bp, and noyaki samples (which do not contain flying fish) contained only one fragment of ~530 bp. Here, we present a new procedure to confirm the content of flying-fish meal in ago-noyaki.