猪病毒性腹泻病金标银染可视化芯片技术实验条件优化研究及应用

基因芯片标准化是其特异灵敏检测病原的基本保障,本研究针对金标银染可视化基因芯片制备中点样缓冲液的使用、点样次数、杂交温度、杂交时间、胶体金浓度以及银染时间分别进行优化实验,分析其对金标银染可视化共检基因芯片杂交信号的影响.分别选取猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的S和M基因,猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis of swine virus,TGEV)的N和S基因,A型猪轮状病毒(Group A porcine rotavirus,GAR)的VP7和NSP4基因设计引物.根据目的基因片段设计5’端修饰有15个T碱基的60-mer寡核苷酸探针,分别以1∶1混合点样缓冲液和直接进行喷样两种方式,利用芯片点样仪喷样分别喷样1次、2次、3次于醛基玻片上制成基因芯片.应用不对称PCR对实验室构建保存的三种腹泻病毒的阳性质粒进行生物素掺入标记,分别在40、45、50和55℃与基因芯片杂交30、60、90和120 min.利用生物素-链霉亲和素的特异性链接,分别将稀释10、20、30、40、50及60倍的链霉亲和素修饰的纳米金颗粒引入反应体系,通过不同银离子染色时间后后,直接眼观实验结果.应用优化后的标准化可视化芯片和RT-PCR同时对173份临床送检病料进行检测,以评价芯片临床应用.结果表明,应用探针和点样缓冲液1∶1混合的方法进行1次喷样制作的基因芯片,在50℃环境中杂交90 min后,与4μg/mL链霉亲和素修饰的纳米金颗粒结合,再进行12～14 min银染,经过10次重复性实验,可确定为金标银染可视化基因芯片的最佳优化条件.临床病料可视化芯片检测结果与RT-PCR检测结果一致.本研究确定了病毒性腹泻可视化共检芯片的最佳反应条件,为该技术的临床应用标准化研究奠定了基础.     

我国棉花品种区域试验重复次数和试点数量的设计

农作物区域试验重复次数和试点数量设置直接影响试验的遗传力和品种选择效率。本研究以2000-2014年期间长江流域、黄河流域和西北内陆棉区国家棉花区试数据为资料,依据各棉区的试验发展现状和试验遗传力随着试点数量的变化,分析重复次数和试点数量设置的合理性,提出各棉区试点数量的设置方案。结果表明: (1)我国棉花品种区域试验采用3次重复是保证试验效率的充分条件;(2)长江流域和黄河流域国家棉花区试现行的试点数量设置已经可以充分满足试验的遗传力要求,西北内陆棉区的试点数也符合遗传力达到0.75的基本要求;(3)由于棉花区域试验对品种的推荐审定和应用十分重要,试验过程中也可能会因田间管理、自然灾害或其他异常情况导致试验报废,为充分保证试验的可靠性,长江流域棉区可保持当前20个左右的试点数量,遗传力即可达到0.90的水平;黄河流域和西北内陆棉区可以分别将试点数量增加到27个和19个左右,遗传力达到0.90和0.85的水平。该结果为国家棉花区域试验的优化配置提供理论依据,也为其他作物区域试验布局提供参考。     

大孔吸附树脂法纯化红皮云杉多酚工艺研究

[目的]获得大孔吸附树脂法纯化红皮云杉多酚的最佳工艺条件。[方法]通过静态试验筛选大孔吸附树脂,然后再进行动态试验,通过单因素和正交试验,得到纯化红皮云杉多酚的最佳工艺条件。[结果]以D-101为固定相介质,红皮云杉多酚的最佳纯化工艺条件为上样浓度1.5 mg/m L、上样量25 m L、径长比1∶25、洗脱剂浓度70%、洗脱流速2.0 m L/min,多酚得率为56.88%。[结论]该研究为红皮云杉的开发利用提供了理论依据。     

黄淮海地区Hargreaves公式主要参数的空间化处理

为了提高Hargreaves公式在不同地区的适用性和准确性,提高区域作物需水量的估算精度和罐区灌溉管理水平,该文基于黄淮海地区54个气象站1961-2012年的逐日气象资料,以最高温度、最低温度、大气顶太阳辐射为自变量,以Penman-Monteith公式计算的参考作物蒸发蒸腾量为因变量,对Hargreaves公式主要参数进行拟合,并采用普通克里格方法进行空间化处理。结果表明:黄淮海地区全年和夏季转换系数K变化趋势相同,均从西北向东南逐渐增大,春、秋、冬季变化趋势则相反;全年和夏季指数系数n变化趋势相同,均从黄淮海的东南向西北逐渐增加,春、秋、冬季则从东北向西南逐渐增加;温度偏移量Toff总体表现为从西南向东北逐渐增加。率定后的Hargreaves公式与P-M公式的相关指数,全年最大,为0.79,春秋次之,分别为0.70和0.71,冬季最小,为0.46,拟合后相应参数的标准误表明拟合值全年最准确,冬季最差。     

中华红叶杨幼林施肥试验

在成都市新都区灰色潮土上采用完全设计和正交设计方法,进行中华红叶杨幼林施肥试验.结果表明:单一养分元素肥料施用效果K＞N＞P,肥料配合施用效果N+P+K＞N+K＞N+P、P+K,适宜的施肥配方为尿素150g/株+过磷酸钙220g/株+硫酸钾75g/株.     

斜纹夜蛾半人工饲料的改进

【目的】改进斜纹夜蛾半人工饲料配方,为斜纹夜蛾室内批量饲养奠定基础。【方法】设计4种半人工饲料配方,于温度(27±0.5)℃、相对湿度(70±5)%、光周期L∶D=16h∶8h、光照强度8 250lx的人工气候箱中进行群体饲养,观察不同饲料配方对斜纹夜蛾生长发育的影响。【结果】供试4种饲料配方中,配方4(玉米粉200g,大豆粉100g,酵母粉12g,琼脂15g,抗坏血酸6g,山梨酸2g,对羟基苯甲酸甲酯2g,复配维生素液15mL,蔗糖50g,蒸馏水1 000mL)的饲养效果最好。用配方4饲养斜纹夜蛾幼虫,其幼虫到成虫发育历期最短,仅26.77d,幼虫存活率高达97%,蛹质量0.3g,雌雄性比达到0.91∶1,单雌产卵量为774粒。【结论】供试4种配方中以配方4的饲养效果最好,可以作为斜纹夜蛾室内饲养的半人工饲料。     

柑橘皮膳食纤维在曲奇饼干中的应用研究

以汉中当地宫川柑橘为试材,从柑橘皮中提取水不溶性膳食纤维,用于曲奇饼干的制作。通过单因素试验和正交试验,对曲奇饼干的原料配方参数进行筛选。结果表明,柑橘皮膳食纤维曲奇饼干的最佳配方为:以低筋面粉质量100%计,牛奶添加量10%,蛋液添加量20%,黄油添加量40%,细砂糖添加量25%,膳食纤维添加量6%,所制得的柑橘皮膳食纤维曲奇饼干外观完整,表面呈棕黄色,口感酥脆、细腻,有奶香味,无杂质。     

矮生沿阶草栽培基质配方筛选试验

为加速矮生沿阶草繁殖和推广,通过5个不同的基质配方,研究了不同基质配方施用对矮生沿阶草生长的影响。综合叶片生长速率、出叶速率、分蘖数、叶绿素含量、单位时间内新根鲜质量、根系活力等测定结果认为,基质配方按泥炭∶砻糠∶黄土为2∶2∶1的比例进行配制最有利于矮生沿阶草的生长。     

高寒牧区育肥牛饲料配方筛选试验及效益分析

[目的]高寒牧区肉牛育肥对饲料的要求与其他地区存在着明显的差异,环境因素、气候条件、饲草料现状都是制约肉牛育肥产业发展的瓶颈。因此选择适宜的饲料配方对高寒牧区肉牛育肥产业的发展显得极为重要。[方法]本饲料配方筛选试验通过组间对比选择,筛选出适宜高寒牧区肉牛育肥的试验配方。在实际应用中取得了较好的效果。[结果]表明:筛选出适合本地育肥牛的1号料和3号料,饲喂1号料的A组比饲喂2号料的B组和4号料的D组,头均日增重高84g和142g(P0.01)差异极显著,头均多获利81.80元和147.18元;饲喂3号饲料的C组比饲喂2号料的B组和4号料的D组,头均日增重高64g和122g(P0.01)差异极显著。[结论]头均多获69元和133.84元。     

华盖木扦插育苗技术

介绍珍稀濒危物种华盖木的生态学与生物学特性,阐述华盖木扦插育苗过程中的插穗培植、采集、浆根等技术,扦插生根剂、插床基质、营养袋基质、苗木施肥配方的配制方法以及容器苗培育和苗期的管护等技术措施.