双歧杆菌在乳制品生产中存在的问题和对策

双歧杆菌对人体健康有着重要的作用,但是在乳制品生产中它的应用却受到了限制。本文就双歧杆菌的厌氧性,低耐酸性,营养要求严格等特点综述了其在乳制品生产中存在的一些问题,并针对各个问题提出相应的解决办法或建议。     

双歧杆菌对脾虚小鼠肠道菌群的影响

使昆明小白鼠致脾虚,用双歧杆菌纯制剂治疗后,检测结肠内容物和粪便的肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量的变化,并结肠进行组织学检查。结果显示：小鼠脾虚后肠杆菌、肠球菌数量明显增多（P＜0.05）,双歧杆菌、乳酸杆菌数量大量减少（P＜0.01）;用双歧杆菌纯制剂治疗6d~12d后,肠杆菌、肠球菌数量减少（P＜0.05）,双歧杆菌、乳酸杆菌大量增多（P＜0.01）;治疗组结肠组织学观察显示,肠壁肌层厚度增加,杯状细胞数量增多,肠黏膜微绒毛排列紊乱显著改善。     

应用融合标签技术提高乳糖酶在毕赤酵母中的分泌表达

双歧杆菌来源的乳糖酶具有催化效率高,安全性好等优点,在乳糖水解和低聚半乳糖生产等领域中应用潜力巨大。以来源于动物双岐杆菌（Bifidobacterium animalis B106）的乳糖酶基因bg42-106m为对象,将4种标签蛋白基因cherry、cbd(cellulose-binding domains)、gst(glutathione S-transferase)、mbp(maltose-binding protein)分别与bg42-106m基因连接,然后以pPIC9为载体构建融合蛋白重组表达载体,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达。结果表明,当融合Cherry标签蛋白基因后,可显著提高bG42-106M在毕赤酵母中的蛋白分泌表达量,培养基中乳糖酶活力可达到7.42 U/mL。与未融合标签的野生型菌株相比,乳糖酶bG42-106M的分泌表达量提高了290%。而其他3种标签蛋白没有提高bG42-106M的分泌表达量。     

Innate immune response of mammary gland induced by intramammary infusion of Bifidobacterium breve in lactating dairy cows

This study aimed to evaluate innate immune responses of mammary glands induced by intramammary infusion of Bifidobacterium breve in dairy cows. Somatic cell counts in quarters of cows showed a marked increase following B. breve infusion on days 1 and 2. Opsonized-stimulated chemiluminescence response in quarter milk was significantly (P<0.05) increased by B. breve infusion on days 1 to 3 compared to that of pre-infusion. Lactoferrin concentrations in B. breve-infused quarter milk increased significantly (P<0.05) on days 2 to 4 and 6 compared to those of pre-infusion. IgG and IgA concentrations in B. breve-infused quarters significantly (P<0.05) increased on days 2 to 4 for IgG and days 3, 4, 6 and 8 for IgA compared to those of pre-infusion. Interleukin (IL)-1β and IL-8 mRNA levels in somatic cells from B. breve-infused quarters were significantly (P<0.05) upregulated on day 1 compared to those on days 0 and 14. Conversely, IL-6 mRNA levels in somatic cells from B. breve-infused quarters on days 0, 1 and 14 and NF-κB mRNA levels on day 0 were significantly (P<0.05) down-regulated compared to those of control. IL-1β, tumor necrosis factor (TNF)-α and IL-6 concentrations increased on days 1, 3 and 7 after B. breve infusion in quarters. Intramammary infusion of B. breve (3 × 10⁹ cfu) induces a massive influx of leukocytes and enhances innate immune response in mammary glands. This event may contribute to the enhancing host defense in the mammary gland.     

双歧杆菌的功能及其开发利用

本介绍了双歧杆菌的特性，功能及其开发利用情况，该菌为百利而无一弊的有益菌，开发利用有巨大的潜力和广阔的市场。     

耐消化道逆环境双歧杆菌优良菌株的筛选

为筛选耐消化道逆环境的优良双歧杆菌菌株，以来源于母乳婴儿粪便、未断奶仔猪粪便、市售双歧杆菌制剂和本实验室保存的双歧杆菌为出发菌株，采用改良MRS液体培养基，模拟人体胃肠道逆环境，对其耐消化道逆环境特性进行了研究。通过耐酸（pH3的PBS）、耐胆汁酸盐（质量浓度1～20mg／mL）试验对初筛得到的14株菌株进行复筛，得6株菌株，它们在pH3条件下作用120min后存活率均〉93％，活菌数均〉100cfu／mL；在含5mg／mL牛胆酸钠的改良MRS液体培养基中作用24h后活菌数仍〉10^6cfu／mL，除J12和B03外，其他4株在含20mg／mL牛胆酸钠的改良MRS液体培养基中作用24h仍有活菌被检出（活菌数〉100cfu／mL）。在此基础上，采用胃蛋白酶和胰蛋白酶模拟胃肠液得3株耐消化道酶菌株A03、A04和L-1，在含5mg／mL胃蛋白酶的PBS培养基（pH3）作用120min后其活菌数均高达约100cfu／mL，而在含10mg／mL胰蛋白酶的改良MRS液体培养基作用24h后，其活菌数均高达约10^9cfu／mL；这2种消化道酶对其几乎没有抑制作用。研究结果表明，双歧杆菌A03、A04和L-1菌株耐受消化道逆环境的能力最好，可用做微生态制剂菌株。     

乳杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌附着固定化猪小肠粘液蛋白的研究

 采用固定化猪小肠粘液蛋白模型,结合细菌同位素标记方法,对来源于猪胃肠道的乳杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌附着活性以及细菌表面凝集素和粘液蛋白的受体的化学组成进行了初步研究。结果表明,乳杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌均可附着于固定在细胞培养板上的猪小肠粘液蛋白上,且乳杆菌和双歧杆菌的相对附着数量比大肠杆菌高。3种菌经高碘酸钠和蛋白水解酶修饰后的附着试验表明,大肠杆菌和乳杆菌在粘液蛋白上的附着数量显著降低(P<0.01),推测细菌表面的凝集素为具糖蛋白性质的物质;而化学和酶修饰对双歧杆菌的附着活性没有明显影响。粘液蛋白经蛋     

双歧杆菌在低聚木糖基质中的增殖和代谢过程

研究了不同聚合度的低聚木糖对青春双歧杆菌的增殖效果,以及青春双歧杆菌利用低聚木糖的规律,并对其代谢产物进行了分析。结果表明,在分别以木二糖和木三糖,木四糖和木五糖,木六糖、木七糖和木八糖3组混合组分为碳源的培养基中,青春双歧杆菌菌体浓度增殖倍数分别为4.0、3.0和2.0。青春双歧杆菌优先利用聚合度较低的低聚木糖,并代谢产生短链脂肪酸,如乳酸、乙酸、丙酸和丁酸,其总酸含量在2.28~5.70g/L。     

培养条件对低聚木糖增殖青春双歧杆菌的影响

以低聚木糖为底物碳源，在严格厌氧培养条件下研究了pH值、还原剂和低聚木糖浓度等因素对该糖增殖青春双歧杆菌的影响。研究表明，在初始pH5.5-8.0的范围内低聚木糖均可增殖青春双歧杆菌，但pH8.0的微碱性培养效果更好。添加L－半胱氨酸和硫代乙醇酸钠还原剂可迅速降低培养液的初始氧化还原电位，有利于双歧杆菌的快速增殖，还原剂的初始浓度以0.5-1.0g/L为宜。人体持续摄入低聚木糖可保证其对双歧杆菌的增殖作用。在2.5-10g/L内，增加低聚木糖的初始浓度可提高双歧杆菌的菌体浓度和增殖速率，当糖浓为5.0g/L时青春双歧杆菌对该糖的利用效果最好。培养至18h，菌体浓度达1.03g/L，糖的转化率达42.2%。     

不同剂量的双歧杆菌对断奶仔猪补体C_3、C_4的影响

在30~75日龄的仔猪日粮中添加不同剂量的双歧杆菌后,整个试验期C3水平监测结果显示,C3水平不断提高,且试验Ⅰ组为579.70 mg/L、Ⅱ组为464.70 mg/L、Ⅲ组为453.97 mg/L分别比对照组提高60.48%、28.64%、25.67%,差异显著(P<0.05),其中以试验Ⅰ组最高。而且添加双歧杆菌后,对C4补体水平的维持有一定的作用,且较高剂量的双歧杆菌(试验Ⅲ组)能更高效的提高C4补体的水平。