番茄LeNCED1基因5''-侧翼序列克隆及LeNCED1p:GUS融合基因构建

从番茄基因组中克隆LeNCED1基因5'-侧翼1456 bp调控序列,经生物信息学分析表明,LeNCED1基因上游调控序列中存在响应昼夜节律的顺式作用元件Circadian、光响应元件BoxⅠ、逆境胁迫响应元件(TC-rich repeats)、ABA响应元件ABRE等,构建了LeNCED1基因上游调控序列与报告基因GUS融合的植物双元表达载体pLeNCED1p:GUS.     

马铃薯StTOM1和StTOM3双干扰植物双元表达载体的构建及转化验证

病毒病是制约马铃薯生产的重要因素之一。在拟南芥等植物的研究中发现,抑制寄主因子可以显著降低细胞中病毒的累积量,从而缓解病害症状。本研究在获得与拟南芥寄主因子AtTOM1和AtTOM3具有同源性的马铃薯基因StTOM1和StTOM3的基础上,尝试用RNAi方法同时沉默StTOM1和StTOM3。以pUCCRNAi为中间载体,构建同时含StTOM1和StTOM3双基因干扰片段StT1-StT3的质粒pUCStT1-StT3-dRi（±）,再将双基因干扰片段StT1-StT3切下并连接到双元载体pBI121上。用农杆菌介导方法,将StT1-StT3片段导入马铃薯中,获得转基因马铃薯小苗,阳性率达到83.6%。RT-PCR检测表明,转StT1-StT3马铃薯中StTOM1基因mRNA的表达水平下调了78%,StTOM3基因下调了81%。StTOM1和StTOM3沉默转基因马铃薯的获得,为将来验证和评价StTOM1和StTOM3是否为马铃薯病毒的寄主因子及在创建抗病毒马铃薯新种质的潜力,奠定了基础。     

政府补贴、双元创新与企业全要素生产率关系的实证研究

加快建设现代化经济体系，着力提高全要素生产率是我国迈向高质量发展快车道的迫切要求。基于2016—2021年沪深A股非金融类上市公司数据，实证研究政府补贴与企业全要素生产率之间的关系。结果表明：相较于探索式创新，政府补贴更有利于提高企业利用式创新绩效；政府补贴直接提升了企业全要素生产率，也能够通过双元创新绩效的中介效应作用于企业全要素生产率；管理者能力能够正向调节政府补贴的效果。     

七例癌症患者治疗后吐出肿块状物

1993-1994年我们在用双元三面疗法治疗的过程中,有七例癌症患者从口中吐出了包块状物,实现了生长在管腔粘膜区的肿块自体内脱落的目的,报道如下。1 典型病例湖北钟祥某单位职工郑某某经荆门市一医院确诊为鼻咽癌,其喉头的癌包已发展到了呼吸必须输氧的程度,生命危在旦夕。经治疗后,他吐出了一个外红里白,质硬如骨的比大拇指头大得多的肿物,从此一切正常了。团林槐桥村李某某,经荆门市一医院诊断为食道下段癌,在“贲门近区有6 cm鼠尾状的光缺损,管壁僵硬,粘膜破坏,多次吞咽药剂不可通过”。患者已9天不能吞食进水,棺材寿衣已准备好,但在我院…     

Anti—SAD基因植物表达载体的构建

硬脂酰－ACP脱饱和酶（SAD；EC1．14．99．）是植物中广泛存在的酶系，在脂肪酸合成途径中脱饱和的起始阶段中起催化作用，在脂肪酸饱和度调控中起着关键作用。本研究通过对已克隆的硬脂酰－ACP脱饱和酶基因分析，合成了SAD基因保守区域基因片段，并将该片段插入载体pIG121的Sac I位点，构建了Anti-SAD植物表达双元载体，为进一步开展植物脂肪酸成份基因工程调控研究提供了基础。     

对职业教育中双元互动校企双赢教学模式的探讨

"双元制"是企业和相应的职业技术学校共同完成的职业教育,目前世界上比较成功的职教办学模式之一,有较强的实用性和针对性,各国广泛地引入,国职业教育的成功,将对中国的职业教育具有重要的借鉴意义.     

番茄花药特异表达启动子LAT52的克隆与表达载体构建

采用半巢式PCR方法,从番茄基因组中扩增出了花药特异表达启动子LAT52。该序列与GenBank公布的同源序列相似度达98%,并鉴别到一个TAAAAAA简单重复序列。将LAT52启动子与GUS基因拼接,构建成了双元表达载体。     

链格孢ATMT转化体系的构建及弱毒突变株验证

本文利用来自质粒pUCATPH的构巢曲霉色氨酸合成基因trpC的启动子(PtrpC)、终止子(TtrpC)和潮霉素磷酸转移酶抗性基因(hph)以及植物表达载体pROKⅡ成功构建了适用于丝状真菌的根癌农杆菌介导转化的双元载体pROKIIHPH,并转化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404,建立了根癌农杆菌LBA4404介导的链格孢Alternaria alternata分生孢子转化体系;再从乙酰丁香酮(AS)浓度、不同的共培养时间、受体菌分生孢子浓度和农杆菌菌液浓度对A. alternata转化效率的影响对体系进行优化。结果确定了根癌农杆菌菌液体积为200mL(OD600=0.15),A. alternata分生孢子浓度为106个/mL,在A. tumefaciens的预培养时期以及与A. alternata共培养时期分别加入200μmo1/LAS,共培养时间48h,转化率达120～200个/105分生孢子。在所筛选的约800个转化子中获得了1株毒性明显低于野生菌sd1的弱毒突变株t108,通过PCR验证推测其毒力降低可能由于T-DNA插入阻断了基因的表达。该实验结果为与突变相关基因的研究以及弱毒株t108的进一步研究和利用提供了实验材料,也为深入研究链格孢sd1菌株的基因功能奠定了基础。     

论西方职教对我国职教的启示

通过研究德国的双元制教育模式及日本的企业教育模式,总结其中可借鉴之科学经验。结合我国中职教育发展实际,择其善者而从之,其不善者而改之。     

我国职业教育现状及未来发展模式探析

职业教育对于当前经济发展的起着重大作用,对其现状的研究显得格外必要,目前我国职业教育的发展出现了一系列问题,探索科学合理的教学发展道路,必须改变办学理念,走"双元制"办学模式,培养复合型人才;以示范型带动整体发展,走规模化、集团化发展道路;坚持"以人为本"、以学生为核心的教学方式。