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51.
用单层分化法研究了 ES细胞从 0~ 316 h(第 14天 )的神经分化过程。无饲养层培养的 ES细胞在无血清的N2 B2 7培养基中开始神经分化。从 72 h开始 ,神经外胚层的特异性转录因子 Sox1表达 ,在克隆的边缘逐渐出现向外迁移的细胞 ,形状呈圆形或椭圆形 ,有 1~ 2个细胞突起。在 191h(第 8天 )之后 ,细胞可迁移至克隆边缘的 2 0 0 μm之外 ,这些有细长突起的细胞表达神经元特异性蛋白 Tau。以后 ,迁移细胞的突起开始交叠成网状。 316 h(第 14天 )时 ,细长的纤维可跨越在不同的克隆之间 ,长达上千微米。此时 ,免疫染色的结果表明 ,在克隆的中央有较多的圆形 Nestin阳性细胞 ,而克隆的边缘有大量的 β- tubulin 阳性细胞 ,它们交织成复杂的网状图像。阶段性表达基因的表达时序研究表明 ,ES细胞的特异性转录因子 Oct4开始减弱时 ,Sox1表达开始 ,此时细胞由全能状态进入早期神经分化状态 ;Tau的表达是 Sox1表达的下游事件。这一时序与胚胎发育中神经发生的时序相符。单层分化法能直观地展示 ES细胞的神经分化过程 ,可作为研究细胞分化、胚胎发育及药物筛选的体外模型 相似文献
52.
To study nuclear transfer in the loach (Paramisgurnus dabryanus Sauvage), blastula and gastrula cells were fused with UV-inactivated oocytes by cell-to-cell electrofusion. To facilitate nuclear transfer, blastula and gastrula cells were cultured or incubated at 4 °C in different solutions. TC-199 medium supplemented with 20% calf serum was the best culture solution, and effectively retained the totipotence of blastula or gastrula cells for up to 10 days. It was found that gastrula cells incubated at 4 °C had the same totipotence as blastula cells. The optimal UV dosage for inactivation of the oocyte chromatin was 180–240 mJ cm−2. Electrofusion was carried out in a cone-shaped fusion chamber, which permitted the recipient oocyte and the donor blastula cell to contact one another. The electrofusion procedure resulted in a 10% success rate of normal-appearing fish. Genetic analysis indicated that the nuclear material originated from the donor cell (blastomere) and the oocyte pronucleus did not take part in development. 相似文献
53.
鸡新城疫病毒F基因和鸡IL—2重组DNA疫苗的构建 总被引:40,自引:0,他引:40
利用已克隆到的新城疫D26株F基因和鸡IL-2基因,经过载体改建,将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上,经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2的重组质粒,为探讨禽类重组基因疫苗的构建及鸡IL-2在基因疫苗中的作用奠定了基础。 相似文献
54.
55.
56.
The yeasts Cryptococcus laurentii,Trichosporon pullulans,Rhodotorula glutinis and Trichosporon sp.were used to investigate their sensitivity to four fungicides and different concentrations of CO2,as well as their antagonistic ability to Penicilliumexpansum and Alternaria alternata in vitro when applied with fungicide.There were significant differences in sensitivity to the fungicides among the different yeasts(P = 0.05).R.glutinis was more sensitive to Deccocil,Iprodione and Stroby as compared to other yeasts.Combination antagonistic yeasts with fungicide could more significantly enhance biocontrol ability of the yeasts against the pathogenic fungi in vitro(P = 0.05).C.laurentii was the most effective antagonist among the four yeasts and could completely control spore germination of P.expansum and A.alternata when combined with Stroby at the concentration of 100 μL L-1.The yeasts,except R.glutinis,could grow well on nutrient yeast dextrose agar (NYDA) after 8 d incubation even at 20% CO2 concentration at 25℃.Particularly Trichosporon sp.showeda better adaptability to low temperature as compared to other antagonists. 相似文献
57.
利用4-二乙氧基膦酰基-2-酮丁酸乙酯与 L-赤式-(+)-1,乙-二苯基-2-氨基乙醇的缩合,将产物还原、氢解及水解得光活性产物,ee 值67%。 相似文献
58.
59.
60.
用提纯的OPPV细胞抗原免疫BALB/c小鼠脾脏与SP2/0小鼠骨髓细胞融合,融合率为70%,以ELISA双抗体夹心法进行检测,阳性率为20%,经过有限稀释法克隆出1A6、2B8、1G3、2G44株分泌抗OPPV抗原的单克隆体杂交瘤细胞株.选择抗体分泌滴度高的1A6细胞进行了较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为96~110条,抗体属性为IgG1,轻链为K链,IFA试验表明产生的McAb对OPPV有特异性,细胞传30代并在液氮中保存半年后复苏仍能稳定地分泌抗OPPV McAb,细胞分泌抗体的ELISA滴度腹水为6.4×104,上清为640,McAb经硫基乙醇还原后在SDS-PAG上呈现2条区带,一条为重链部分,MW50000,另一条为轻链部分,MW为25000. 相似文献