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51.
52.
家畜卵母细胞冷冻保存研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来,国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前,已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功,并得到了后代。在国内,山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展,卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视,这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。 相似文献
53.
猪卵巢卵母细胞的体外成熟和体外受精 总被引:8,自引:0,他引:8
将从屠宰母猪卵巢采得的卵母细胞-卵丘细胞复合体(Oocyte-cumulus Cell Complex.OCC)在含PMSG的M199培养40~44小时,卵丘细胞大部分扩散(86.4%)。48.1%(142/295)的卵母细胞排出第一极体(PBI)。将体外成熟的卵母细胞与体外获能精子授精后30~70小时,80.5%(103/128)的卵母细胞受精并可在体外发育到2~8细胞甚至桑椹胚。本文还对裸卵母细胞的体外成熟和体外受精进行了研究,对体外受精卵的早期发育作了观察。实验结果表明:PMSG对诱导卵丘细胞扩散及卵母细胞的全面成熟有重要作用,在OCC中的卵母细胞成熟率高于裸卵母细胞体外授精后8~10小时将受精卵放入改良KRB液培养可使卵裂比例明显提高。 相似文献
54.
牛体外受精胚胎衍生干细胞能力影响因素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以牛卵巢卵母细胞体外受精获取囊胚期胚胎,比较体外受精牛胚胎不同获取内细胞团的方法和不同培养液对体外培养胚胎干细胞能力的影响。结果表明,囊胚期胚胎不除去透明带而直接培养产生胚胎干细胞,初次克隆率为55%;胰酶法去透明带分离的内细胞团(ICM)培养产生胚胎干细胞,初次克隆率为90%。免疫外科法去透明带分离的ICM在4种不同的培养液中,初次克隆率分别为16.4%、11.5%、21.8%、18.2%,但是其分离的ICM经传代后形成的衍生细胞不易发生分化,经过4~6代的传代,仍然保持其完整的形态,说明免疫外科法是一种理想的牛ICM分离法,培养液为D20+LIF(40ng/mL)可用于牛胚胎干细胞培养。 相似文献
55.
白牦牛卵母细胞的采集方法及卵巢贮存条件对其体外成熟的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
探讨了白牦牛卵母细胞的采集方法以及卵巢保存温度和时间对其体外成熟的影响。结果表明:先抽吸卵泡,每卵巢平均可获可用卵母细胞4.7枚,再切割卵巢,可显著提高可用卵母细胞数9.8枚/卵巢。将屠宰白牦牛卵巢分别置于20~29℃和30~38℃的生理盐水中,6 h内收集卵母细胞,其成熟率、卵裂率分别为65.7%、41.3%和73.3%、45.7%,两者之间的差异均不显著,但均与<20℃组(16.0%、0)差异显著。在30~38℃下,白牦牛卵巢保存时间超过6 h,卵母细胞的成熟率和卵裂率显著下降,卵巢保存时间在2 h以内最好,最晚不超过6 h。 相似文献
56.
57.
卵母细胞冷冻保存具有广泛而潜在的应用价值.试验主要分析了不同冷冻及解冻方法对绵羊GV期和MII卵母细胞发育效果的影响.GV期卵母细胞程序化冷冻解冻后形态正常率(54.8%)以及体外培养成熟率(14.7%)均显著低于细管玻璃化(71.8%,29.5%;P<0.05)和OPS玻璃化(78.3%、35.4%;P<0.05),卵裂率OPS玻璃化高于细管玻璃化,但差异不显著(26.1%,16.7%;P>0.05);MII期卵母细胞形态正常率程序化冷冻显著低于细管玻璃化和OPS玻璃化冷冻(67.2%,77.6%,84.8%;P<0.05),卵裂率OPS玻璃化显著高于程序化冷冻法(31.3%,10.3%;P<0.05);3种不同方法冷冻不同发育时期卵母细胞成熟率和卵裂率与对照组相比较均差异极显著(P<0.01).解冻后卵母细胞形态正常率三步与五步解冻法极显著高于一步解冻法(85.9%,82.7%,63.1%; P<0.01);成熟率为三步法和五步法显著高于一步法(10.8%,26.9%,25.3%;P<0.05);卵裂率三步法和五步法高于一步法,但没有差异显著性(14.3%,23.9%,21.1%; P>0.05). 相似文献
58.
文章就卵母细胞体外成熟的影响因素做了简要的论述。主要介绍了卵母细胞来源、培养系统、激素和生长因子等因素对卵母细胞体外成熟的影响。 相似文献
59.
本试验主要比较了离子霉素、电脉冲两种方法激活牛、羊体外成熟卵母细胞的效率。两种激活方法中。牛胚胎卵裂率无显著差异(90.61%对94.40%,P〉0.05),而离子霉素激活胚胎的囊胚发育率极显著高于电激活方法(12.3%对2.4%,P〈0.01)。两种方法对羊胚胎的研究中,羊胚胎卵裂率无显著差异(72.4%对77.4%,P〉0.05)。但是离子霉素激活胚胎的囊胚发育率显著高于电激活方法(3.67%对10.40%,P〈0.05)。本试验中还比较了用化学激活法(离子霉素)激活牛体外成熟卵母细胞后,用SOFaa体系培养,换液与不换液对孤雌激活胚胎体外发育的影响。结果表明:在第4天不换液的胚胎卵裂率和囊胚率极显著高于换液的胚胎(11.64%对3.49%。P〈0.01)。 相似文献
60.
卵母细胞去核及卵丘细胞移核方法对猪体细胞核移植的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以猪体外成熟卵母细胞周围分离得到的卵丘细胞作为猪体细胞核移植的供核细胞,研究了卵母细胞不同去核方法(盲吸法、活性荧光染色去核法、盲吸法和活性荧光染色法联合去核法)的去核率差异,并比较了卵丘细胞透明带下注核和胞质内注核两种重建胚构建方法的胚胎裂解率、4 8细胞发育率和桑椹胚率的差异。结果表明:(1)以荧光染料染色法的去核率(87.18%)最高,与其他试验组相比差异显著(P<0.05);盲吸法去核所用时间最少(1.2 min/个),与其他试验组相比差异显著(P<0.05)。(2)透明带下注核比卵母细胞质内直接注核的卵裂率(40.11%/29.75%)和4 8细胞率(11.86%/6.81%)高,差异显著(P<0.05);桑椹胚率(1.75%/1.79%)无明显差异(P>0.05)。 相似文献