三种融合标签对大熊猫轮状病毒结构蛋白VP6-VP7可溶性表达的影响

大熊猫轮状病毒(giant panda rotavirus,GPRV)是引起幼龄大熊猫腹泻的主要病原,对圈养大熊猫产生了较大的危害。轮状病毒结构蛋白VP6是一种载体蛋白,可介导黏膜免疫反应。VP7是轮状病毒结构蛋白中主要的中和抗原。因此,VP6-VP7的融合表达作为候选抗原对该病的防治具有重要的意义。传统大肠埃希菌原核表达存在表达量低、可溶性差以及纯度低等弊端。本研究使用醛缩酶(EDA)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、麦芽糖结合蛋白(MBP)3种融合标签,以实现获得表达量高和纯度高的GPRV-VP6-VP7重组表达蛋白。将扩增的VP6、VP7基因片段利用同源重组酶构建到含3种融合标签的表达载体pET21b上,将重组质粒转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞中进行低温诱导表达。用Ni-柱亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Image J分析蛋白表达量和可溶性,Western blot分析得到表达的重组表达蛋白正确且具有蛋白活性。实验结果证明,EDA标签能显著促进VP6-VP7蛋白的原核可溶性表达,提高VP6-VP7蛋白表达量。     

四川部分地区犬布鲁氏菌病血清学调查以及典型病例的诊断

为了解四川地区犬是否存在布鲁氏菌病,采用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)及外膜蛋白BCSP3基因的PCR(BCSP31-PCR)对110只门诊以及流浪犬进行了布鲁菌病的血清学及分子学调查。结果表明:110只犬中12只RBPT检测为阳性,表示疑似布鲁菌感染,而进一步采用SAT以及BCSP31-PCR诊断只有1只为阳性,其余11只犬均为阴性。说明四川地区犬布病感染不严重,临床中RBPT存在假阳性,诊断时应结合临床症状、分子生物学技术等进行鉴别诊断。     

斯氏艾美耳球虫3-磷酸甘油醛脱氢酶重组蛋白对兔的免疫保护效果评价

旨在评价斯氏艾美耳球虫重组蛋白Es-GAPDH对兔的免疫保护效果，为兔斯氏艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研制奠定基础。利用相对荧光定量PCR分析Es-GAPDH在斯氏艾美耳球虫不同发育时期的转录水平，并对Es-GAPDH进行原核表达与蛋白纯化；然后将42只45日龄无球虫幼兔随机分为5组(空白对照组、不免疫攻虫组、Trx-His-S tag攻虫对照组、Quil-A saponin攻虫对照组和rEs-GAPDH免疫组),分别经颈部皮下注射1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL PBS含100μg pET-32a空载蛋白含1 mg Quil-A、1 mL PBS含1 mg Quil-A、1 mL 100μg rEs-GAPDH含1 mg Quil-A,首免14 d后同等剂量加强免疫。二免14 d后除空白对照组外，其余各组实验兔经口感染1×10⁴个斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊，攻虫后观察各组临床表现，每周定时采血、称重，感染21 d后剖检观察肝组织病理变化，并测定和统计每组的相对增重、料肉比、肝指数、卵囊排出量、生化指标、特异性IgG抗体以及细胞因子等。结果发现，Es-GA...     

西青果等11种藏药对趾间毛癣菌的体外抗菌活性研究

考察西青果等11种藏药的体外抗真菌活性,制备藏药水提液,通过牛津杯法初步筛选具有抑菌效果的藏药,再用多量液基稀释法测定具有抗菌作用的8种藏药的最低抑菌浓度(MIC),选取抑菌效果较好的4种藏药,两两联合,测定其联合抑菌效果。结果显示,藏木香、水母雪莲花、獐牙菜、藏茵陈、垂头菊、铁棒锤、藏紫草和西青果具有较明显抑菌效果,其MIC值分别为62.50、500、250、125、500、250、62.50、1.95 mg/mL。在抑菌效果较好的藏木香、藏紫草、藏茵陈、西青果两两联合抑菌试验中,"藏茵陈+西青果"组联合抑菌指数(FICI)≤0.5,"藏紫草+西青果"组FICI≤1,其余各组FICI均≧2。表明西青果、藏木香、藏紫草、藏茵陈有较好的抗真菌活性,"藏茵陈+西青果"和"藏紫草+西青果"药对分别具有协同和相加联合抑菌效果。     

肉牛源细极链格孢菌的分离鉴定

为鉴定肉牛皮肤病病原及其致病性并筛选其敏感药物,本研究取患皮肤病肉牛病变部位皮屑、毛发和痂皮进行病原菌的分离,并对分离菌株进行了形态学鉴定、ITS序列分析、小鼠致病性试验和药敏试验。结果显示分离到1株形态特征与细极链格孢菌极其相似的菌株(PY2-1-2);经PCR扩增、测序和BLAST序列比对,结果显示分离株(PY2-1-2)的ITS基因序列与细极链格孢菌(MG975630.1)的ITS基因序列的相似性为99%,分离株PY2-1-2的ITS基因序列长度为543 bp,该片段包括ITS1、5.8S rDNA和ITS2的全部基因序列以及18S rDNA和28S rDNA的部分基因序列,提交GenBank(MH656780.1)。根据形态学结合ITS基因序列分析结果确定该分离株为细极链格孢菌。小鼠致病性试验结果显示该菌对小鼠有致病性。药敏试验结果显示:该菌对灰黄霉素、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑的最小抑菌浓度(MIC)值分别为0.5μg/mL、4μg/mL、1μg/mL、1μg/mL。本研究为今后进一步探究细极链格孢菌引起的皮肤病诊治提供科学有效的参考。     

鸭肿头败血症的研究进展

鸭肿头败血症是一种以发病急、传播快、死亡率高为特点的新型、烈性鸭病毒性传染病。从这一新型病毒性传染病的病原学、流行病学、临床特征、病理学特征、诊断方法和预防等方面进行了综述,为进一步了解和深入研究该病提供参考。     

林下放养固始鸡和草蛋鸡产蛋期生产性能和养殖效益对比试验

为了考察林下放养模式下固始鸡和草蛋鸡两种肉蛋兼用地方鸡产蛋性能和养殖效益情况,本试验选取125日龄开产的两个鸡种分为两个处理组,一个圈舍一个处理组,试验期125日龄-300日龄25周,饲粮分为预产期和产蛋高峰期两个养殖阶段配制玉米-豆粕型粉料。产蛋试验期记录日采食量、死亡数、产蛋率,试验结束计算平均采食量、平均成活率、平均产蛋率。根据饲料耗用量、死淘鸡折价、蛋鸡销售价、试验鸡销售价,概算养殖效益。试验结果表明,产蛋试验期(125-300日龄)平均产蛋率,固始鸡达到41.35%,高于草蛋鸡6.92个百分点;试验期校正的平均日采食量,固始鸡为92.65g/只,低于草蛋鸡9.05g/只。本试验产蛋期25周的平均周产蛋率20个周固始鸡高于草蛋鸡,其中产蛋期17-22周连续6周固始鸡平均周产蛋率高于草蛋鸡17-30个百分点范围。概算的产蛋期养殖效益(鸡蛋售价+卖鸡收入-概算养殖成本-死淘鸡折价)则以固始鸡最好,固始鸡收益为78.91元/只,而草蛋鸡为68.02元/只,高于草蛋鸡10.9元/只。试验结果表明,在林下放养模式下,本试验产蛋期固始鸡产蛋性能和养殖效益都优于草蛋鸡。     

中药消精散对鸡促生长的应用效果观察

研究女贞子、甘草、白胡椒,丹参,葛根等中药组成的中药复方"消精散"作为饲料添加剂对肉鸡生产性能及免疫功能的影响。选取4周龄雄性肉鸡72只,随机分为3个组,每组3个重复,每个重复8只。空白对照组予以基础日粮,中药组在基础日粮中添加1%的"消精散"中药复方,药物对照组在基础日粮中添加乙烯雌酚。于试验第1、7、14、21、28天测量各组鸡的体重和消耗饲料量;试验第1、14、28天采集血清,测定新城疫抗体水平及屠宰后的免疫器官指数。结果表明,饲料中添加1%中药复方可提高肉鸡的平均体重、平均日增重,降低肉鸡的料肉比,提高肉鸡新城疫抗体水平,并可提高免疫器官指数。     

新型广谱杀虫药沙罗拉纳在国外伴侣动物体外寄生虫防治中的应用

沙罗拉纳(sarolaner)属异恶唑啉类化合物,是一种新型广谱杀虫药。沙罗拉纳已被证实通过特异性阻断昆虫γ-氨基丁酸受体和谷氨酸门控氯离子通道而显示出抗寄生虫活性。本文综述了近年来沙罗拉纳在国外伴侣动物体外寄生虫防治中的开发及临床应用情况,旨在为该药的深入研究和国内开发应用提供参考。近年来,该药主要用于犬猫等伴侣动物体外寄生虫的临床预防和治疗,对蜱类、蚤类、螨类等体外寄生虫有高效的杀灭作用。与其他杀虫药相比,该药在分子结构、作用位点和选择性等方面有显著差异,具有杀虫活性强、治疗剂量低、安全性高等优点。此外,该药通过与多种药物联合应用,可提高治疗效果,扩大治疗范围。就国外研究来看,沙罗拉纳是一种安全广谱的高效杀虫剂,拥有广阔的应用前景。