利用RNA干扰技术研究长牡蛎TLR2-2基因对MyD88-2基因表达的影响

为研究长牡蛎(Crassostrea gigas)免疫基因TLR2-2对MyD88-2基因表达的调控作用,将体外合成的dsRNA注射进入成体长牡蛎体内,72 h后检测TLR2-2基因和MyD88-2基因的表达量。结果表明,成功地对TLR2-2基因和MyD88-2基因进行了干扰,而在TLR2-2基因被干扰后,MyD88-2基因的表达量显著下降,但在MyD88基因被干扰的长牡蛎中TLR2-2基因表达量没有明显变化。     

宋怀龙提出水生生物“瘟疫”发生流行新机制

近年来，随着水产养殖业迅猛发展，暴发了一场暴发性流行的水生生物“瘟疫”，出现了“养什么就病什么”的局面。这场”瘟疫”囊括了几乎所有的养殖种类，就连从不轻易发生流行病的鲢鳙鲤鲫鱼也不例外。造成了每年高达数百亿元的经济损失！而且至今不但没有缓和的迹象，反而有愈演愈烈的趋势。如1997年山东省仅林孔扇贝死亡造成的直接经济损失就达15亿元，1998年受灾面积和经济损失又有一定幅度的扩大。对虾养殖也因“瘟疫”自1993年开始遭受灾难，连续6－7年的对虾“瘟疫”造成了几百亿元的损失，至1998年我国对虾年产量也仅恢复到灾害前19…     

雨生红球藻规模化培养工艺的构建与应用

针对雨生红球藻规模化培养中的工艺流程、生物污染、温度控制、溶氧解析和pH值稳定等问题,于2003年到2005年,在山东省潍坊地区,开展了雨生红球藻中试规模的论证研究。建立了可用于雨生红球藻规模化生产的3种不同类型的光生物反应器(柱式、管道、生物幕)和人工调节太阳能的温控车间,并构建了一套二步规模化培养工艺流程。结果表明,研究构建的培养模式降低了培养过程中的潜在风险,并大大提高了雨生红球藻虾青素含量。与传统培养方式相比,年培养天数大约提高了3倍。在每个批次培养中,细胞生长培养效率提高了至少1.75倍,虾青素累积培养所需时间缩短了40%,虾青素含量提高了4倍。总体来看,研究构建的新工艺比传统开放模式的生产效率有很大提高,全年共计提高了35倍。     

应用巢式PCR技术对水产饲料及食品转基因成分检测的研究

根据GenBank中登录的转基因大豆完整外源DNA序列设计了几对引物,对转基因大豆和水产饲料以及部分豆制食品进行了巢式PCR检测。结果表明,巢式PCR可以扩增10-10g/μl浓度的DNA溶液,检测灵敏度高达0.01%;该巢式PCR技术具有高度特异性、灵敏度和很好的重复性。用巢式PCR对部分市售的水产饲料和豆制食品进行检测,90.6%的水产饲料和46.5%的食品能检测出外源基因片段,表明转基因大豆广泛存在于水产饲料和我们的日常食品中,为食品安全分析和管理提供了方法和依据。     

A3α-肽聚糖对凡纳滨对虾磷酸酶及细胞内酚氧化酶活性的影响

为考察A3α-肽聚糖(Peptidoglycan,PG)在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的养成期对其免疫酶活性的影响,设立了连续投喂、间隔投喂和浸浴共6个实验组。连续投喂组中PG的添加量分别为0(对照)、0.01%、0.05%和0.1%;间隔投喂组中PG的添加量为0.05%;浸浴组的给予方式为50mg/ml,3h/次/15d。分别在30、60和90d时,测定对虾体内及血浆上清中的酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)活性,另外,在60d和90d时,测定对虾血细胞内酚氧化酶(Phenoloxidase,PO)活性。结果表明,30d时,PG浸浴组、0.05%和0.1%PG添加量组的ACP活性,各PG作用组的AKP活性均较对照组高,且0.1%PG添加量组的ACP活性及0.05%和0.1%PG添加量组的AKP活性较对照组增长显著(P<0.05);60d时,除间隔投喂组外,各组的ACP活性均较对照组高,且0.1%PG添加量组增长显著(P<0.05),而各实验组的AKP活性均较对照组高,且0.05%PG添加量组增长显著(P<0.05),除浸浴组外,各组血细胞内PO活性均有提高;90d时,浸浴组和间隔组的ACP和AKP活性均较对照组高,且间隔投喂组的AKP活性增长显著(P<0.05);间隔投喂组的血细胞内PO活性较对照组有增长。实验证明,PG能激活对虾的免疫力,并可作为免疫增强剂应用于对虾的生产。     

扇贝生物抗病功能基因的克隆表达与应用

随着海洋环境逐渐恶化和养殖的规模化发展,病害问题已经成为目前严重制约贝类养殖业健康发展的主要障碍,世界各海洋大国对此给予了高度重视,围绕养殖环境、病原以及养殖技术等方面开展了大量的研究工作,提出了许多防病治病措施,也取得了一定的成效.但从长远角度考虑,我国扇贝养殖业健康可持续发展的有效途径则是抗病品种或品系的选育以及高效、无毒、广谱新型药物的开发和研制.扇贝中抗病基因的克隆和表达无疑是研究和开发新型天然抗菌物质以取代化学农药和抗菌素的新途径,同时也是研究扇贝免疫防御机制、提高机体抗病力、实现遗传改良,选育抗病品种的基础和关键.本文综述了我们在扇贝生物抗病功能基因的克隆表达与应用方面的研究进展.     

灵山岛浅海岩礁区刺参增殖放流研究

１９９１－１９９２年在灵山岛西侧海区进行了刺参增殖放流试验。结果表明，笼播参苗在自然海区比较安全，参苗存活率为１０％左右。撒播参苗因短期内较骓适应自然海况，易被海流带走等多种因素，参苗存活率甚低。     

用PCR法快速筛选中国对虾含微卫星的重组阳性克隆

运用PCR在中国对虾的小片段基因组文库中快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆。PCR中使用的引物为载体pGEM-3(zf( )上多克隆位点两侧的T7／Sp6启动子引物和根据微卫星核心重复序列设计的STR引物：STR1：5‘-ATATATATATAT－3‘：STR2：5’－TCTCTCTCTCTC－3’，直接使用含有重组克隆的菌液，在PCR反应前增加一段裂解细菌的高温。筛选出来的含有微卫星序列的重组阳性克隆经DNA测序验证。结果证明，采用PCR方法用菌液快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆完全可行，而且具有简便、快速、高效、不涉及同位素操作等优点。     

南黄海鳀产卵场中华哲水蚤的数量分布及其摄食研究

于2001年6月对南黄海鳀产卵场鳀的主要饵料生物--中华哲水蚤的数量分布及摄食进行了研究.调查期间,中华哲水蚤是调查海区浮游动物的绝对优势种,在所有站位上均有分布,平均密度为244 ind·m-3,数量密度最大值高达1555 ind·m-3.中华哲水蚤的肠道色素含量平均为1.19ng·ind-1(0.21～4.14 ng·ind-1),与水体中叶绿素a的最大浓度呈现一定的相关性.中华哲水蚤种群具有一定的昼夜摄食节律,夜间的肠道色素含量明显高于白天.在A和B站中华哲水蚤的个体摄食率分别为76.9 ng·ind-1·d-1和39.6 ng·ind-1·d-1,分别相当于体碳含量的7.5%和3.9%.除了饵料来源和摄食强度等因素之外,捕食压力以及环境温度对中华哲水蚤种群的分布和发展可能具有十分重要的影响.