瓯江干流丽水段渔业资源现状评估与修复研究

为了科学有效地保护瓯江渔业资源及其生态环境, 2009年6月至2010年3月逐月按照《内陆水域渔业自然资源调查方法》,采用实地调查、走访了解等多种手段对瓯江干流丽水段的渔业资源现状进行了调查研究,同时运用数学统计法和多样性指数法将本次调查结果与1972年瓯江水系渔业资源调查结果进行了对比分析,并探讨了瓯江干流丽水段渔业资源的致危原因。结果表明, 瓯江干流丽水段流域浮游植物的种类、细胞密度和生物量相对于1972年分别增加42.3%、30.23%和17.6%,优势种由硅藻变成硅藻和绿藻,优势度增加6.07%;浮游动物的种类和细胞密度也均有增加,且原生动物所占比例大大增加,由45.24%增加为67.44%;底栖动物种类、密度和生物量均有减少,水丝蚓所占比例增加;鱼类的种类、数量和可捕量大大降低,珍稀鱼类种类减少甚至濒临灭绝,许多鱼类出现低龄化和小型化问题。水工建筑的大量建造、工农业污水的大量排放和过度捕捞是造成上述变化的主要原因。     

锯缘青蟹凝集素的提取及单克隆抗体制备

凝集素是无脊椎动物非特异性免疫系统的重要组成成份,可凝集外来病原菌、进行非己识别、调理和介导血细胞吞噬。开展了锯缘青蟹血清凝集素的提取、单克隆抗体制备及凝集素定位研究,以N-乙酰基葡萄糖胺（N-Acetyl-D-glucosamine,GlcNac）为配基制备了Sepharose 4B亲和层析柱,可选择性结合青蟹血清凝集素;青蟹血清通过亲和层析柱后,以0.45 mol/L NaCl洗脱,得到有较高凝集活性的单一洗脱峰,该洗脱峰凝集素比活为血清凝集活性的32.6倍,SDSPAGE显示存在87 ku和79 ku主要蛋白成分;以纯化青蟹凝集素免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、单抗筛选获得BF82等7株可稳定分泌抗凝集素单抗的小鼠杂交瘤细胞株,单抗腹水的ELISA效价为1∶10⁴～1∶10⁵;单抗可特异性抑制青蟹凝集素的血凝,血凝抑制效价为1∶32～1∶64,亚型鉴定表明7株单抗均为IgG1型,免疫印迹表明单抗可特异性结合87 ku、79 ku蛋白;采用凝集素单抗间接免疫荧光法进行了青蟹血淋巴细胞染色,结果显示凝集素主要分布于颗粒细胞的细胞质颗粒和透明细胞的细胞膜上。     

水产常用抗菌药物对锯缘青蟹酚氧化酶的影响

研究了喹诺酮类等17种常见抗菌药物对青蟹酚氧化酶的影响。试验结果表明,药物质量浓度为500μg/ml时,所有抗菌药物对青蟹酚氧化酶(PO)均有明显抑制作用;药物质量浓度为5~10μg/ml时(常规使用剂量),庆大霉素、卡那霉素和丁胺卡那霉素等5种药物的PO抑制率为10%~25%;诺氟沙星、环丙沙星和氧氟沙星等6种药物的PO抑制率为5%~10%,抑制作用较弱;恩诺沙星和红霉素等4种药物的PO抑制率均小于5%,对青蟹PO无明显影响;低剂量阿维菌素和氟苯尼考对青蟹有免疫促进作用。     

Effect of dietary fish oil replacement by rapeseed oil on the growth,fatty acid composition and serum non‐specific immunity response of fingerling black carp,Mylopharyngodon piceus

An 8‐week experiment on fingerling black carp Mylopharyngodon piceus was conducted to evaluate the effects of dietary fish oil (FO) supplement on growth, fatty acid composition and non‐specific immunity responses. Five triplicate fingerling groups (initial weight = 2.72 ± 0.35 g) were fed isoenergetic and isonitrogenous diets in which the dietary FO was replaced with rapeseed oil (RO) in graded increments of 25% (0–100%). No significant effects were observed on specific growth rates, survival rates and feed conversion ratios, but there were significant differences in whole body moisture and liver lipid contents (P < 0.05), and the 100% RO replacement diet significantly enhanced hepatosomatic indexes compared to control group (P < 0.05). Other approximate whole body constituents, viscerasomatic ratios and condition factors were not influenced by dietary oil treatments. Fatty acid composition of muscle and liver was influenced by dietary fatty acid input, α‐linoleic acid and γ‐linolenic acid were significantly increased with increasing RO, but eicosapentaenoic acid, docosahexaenoic acid and the n‐3/n‐6 ratio were significantly reduced (P < 0.05). Alternative complement pathway, lysozyme and superoxide dismutase activities were not significantly influenced. These results indicate that black carp fed diets with FO supplement had similar growth and non‐specific immunity to the fish fed diet with RO.     

Cloning of the <Emphasis Type="Italic">ANT</Emphasis> gene and its expression profiles at different developmental stages and post-molting times in the ridgetail white prawn <Emphasis Type="Italic">Exopalaemon carinicauda</Emphasis>

To investigate the roles of the ANT gene, which codes for adenine nucleotide translocase (ANT) during crustacean development, a full-length cDNA sequence of EcANT in the ridgetail white prawn Exopalaemon carinicauda, was cloned, and its expression profile was analyzed at different developmental stages and post-molting times. The EcANT gene (GenBank accession number: KP892663) contained an open reading frame of 924 bp encoding a 307 amino acid protein with a theoretical size of about 33.42 kDa and a predicted isoelectric point of 9.77. Tissue expression analysis revealed that EcANT was mainly expressed in muscle and its expression level tended to increase with the developmental stages. In addition, the expression level of EcANT after molting increased following the lengthening of post-molting time. Our results suggest that EcANT is an important gene related to the growth and development of E. carinicauda.     

草鱼呼肠孤病毒HZ08株抗体IPMA检测方法的建立及应用

为建立一种检测草鱼呼肠孤病毒HZ08株(HZ08)抗体的免疫学方法,本实验以接种HZ08病毒的细胞培养板为抗原板,以免疫弱毒疫苗的草鱼血清为抗体,通过反应条件优化,建立了检测GCRV HZ08血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞实验(IPMA)方法,并对该方法特异性、敏感性、重复性、与ELISA检测结果的符合率及对临床血清样品的检测效果等进行了验证。结果显示,HZ08株种毒按照1×103拷贝/μL浓度接种后72h固定,HRP-Ig G二抗1∶1000稀释,待检血清1∶100稀释时效果最佳;该IPMA方法与草鱼阴性血清、免疫细菌三联疫苗的草鱼血清、感染GCRV JX0901(GCRVⅠ型)的草鱼血清无交叉反应;GCRV HZ08株阳性血清稀释至1∶800时仍能检出;批内和批间重复性实验显示,该方法具有良好的重复性;符合性实验结果显示,该IPMA方法与ELSIA方法的阳性和阴性符合率分别为95.7%和87.5%;用建立的IPMA方法检测草鱼出血病弱毒疫苗免疫草鱼,免疫2周后抗体水平达到峰值;对现地送检的126份草鱼血清样本进行检测,平均检出阳性率为72.2%。研究表明,建立的HZ08株IPMA方法特异性强、重复性好、敏感性高,为GCRVⅡ型的流行病学调查、疫苗免疫效果评价及抗原抗体检测提供了一种有效的检测手段。     

翘嘴红鲌幼鱼对蛋白质的需要量

用酪蛋白和白鱼粉为蛋白源配制7种蛋白含量为32.07%～45.64%的半精制试验饲料,喂养7组3个重复的翘嘴红幼鱼8周。饲养试验在室内玻璃钢水箱中进行,试验鱼每尾平均初始体重2.88±0.22g,水温为25～29℃。结果显示:蛋白质水平为41.05%的试验组的鱼体增重、特定生长率、饲料效率和蛋白质效率等指标均显著高于其它试验组(P<0.05);对特定生长率(Y)和饲料效率(F)二项指标的二次曲线回归分析求得翘嘴红幼鱼饲料蛋白最适值分别为40.94%和41.35%;饲料蛋白水平对鱼体(全鱼)的水分、粗蛋白和粗灰分的含量无显著影响(P>0.05),而较高水平饲料蛋白会使鱼体脂肪含量明显降低(P<0.05)。     

池塘混养和专养条件下罗氏沼虾营养品质 比较研究

目的以罗氏沼虾为研究对象,比较分析河蟹-罗氏沼虾混养模式与传统罗氏沼虾专养模式产出的罗氏沼虾营养价值和品质变化。方法通过测定体重、体长、出肉率比较两种养殖模式下虾体形态特差异;通过测定水分、蛋白质、灰分、脂肪、矿物质、脂肪酸和氨基酸,比较虾肉营养价值变化;通过测定质构特性和呈味核苷酸比较虾肉品质变化。结果与专养的罗氏沼虾相比,混养模式下罗氏沼虾规格显著提高,但出肉率有所下降。混养的虾肉脂肪含量从(0.91±0.07) %下降为(0.59±0.05)%,差异显著(P <0.05);虾肉的钙、镁、磷、铜含量上升;脂肪酸中EPA含量从(15.59±0.66) %下降至(13.64±0.71) %;氨基酸EAAI评分略有提高,罗氏沼虾虾肉营养价值变化较小。混养的虾肉硬度显著提高;呈味核苷酸AMP和IMP含量从(78.15±1.23) g/100g和(162.90±2.67) g/100g提高至(86.96±1.87) g/100g和(175.12±3.01) g/100g,混养的虾肉品质显著提高。结论河蟹-罗氏沼虾混养池塘内产出的罗氏沼虾规格显著增加,营养成分变化不大,虾肉品质显著提高,符合消费者品味,具有优秀的市场前景。     

水生动物的弧菌病及其致病机理

概述了国内外发现的主要致病弧菌及其致病机理。从黏附作用、脂多糖、溶血素、外膜蛋白和胞外蛋白酶等方面阐述了弧菌的致病机理及其研究现状,并展望了今后的研究方向。     

罗氏沼虾转录组密码子使用偏好性分析

以罗氏沼虾转录组数据为数据来源,通过研究罗氏沼虾转录组的密码子使用参数(如有效密码子的数量和相关密码子碱基的具体组成信息等),并且采用Codon W 1.4.4深入开展了统计和计算。研究结果显示,同义密码子第三位核苷酸和表达基因密码子GC含量均值分别为0.40和0.45。从整体上看,ENC的平均值等于52.72,其中绝大部分的ENC值小于35。采用高频密码子的研究方法获得GAU、GAA、UUU、AAU、CCA等5个高频密码子。通过最优码子分析法确定16个最优密码子,编码10个氨基酸,最优密码子除UUG外均以A/T结尾。而且把它和大肠杆菌、酵母、果蝇以及人类等6种生物的密码子使用频率开展比较,结果表明,与大肠杆菌和果蝇存在较大差异,而与酵母最为接近。研究结果可为罗氏沼虾功能基因和分子育种等提供理论基础。