Penidiella sp.HEY-1β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质

通过Penidiella sp.HEY-1发酵豆渣可制备产胞外β-葡萄糖苷酶(BGL).粗酶液经过乙醇沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析等步骤后获得了凝胶电泳均一的BGL.通过SDS-PAGE测得其分子质量为65.5 ku.该酶反应的最适温度为6...     

有机婴幼儿果蔬泥护色工艺的研究

有机婴幼儿果蔬泥是以有机果蔬为原料,经一系列加工工艺制得可在常温下保存且适于6月龄以上婴幼儿的辅助食品。比较了单独采用护色剂浸泡护色、单独热处理、浸泡护色与热处理相结合的方式对苹果和梨的果泥护色效果。结果表明:苹果和梨分别用1.5%食盐浸泡10、5 min后用蒸汽处理8 min的护色效果最佳。     

12个物种miR-302基因簇的生物信息学分析

很多microRNA（miRNA）基因在基因组上聚集排列形成miRNA基因簇。miRNA基因簇在进化上较为保守,有其特殊的生物学意义。miR-302基因簇在胚胎干细胞中特异表达,对胚胎干细胞的自我更新和多潜能维持有重要的作用。本文采用miRBase数据库查询和BLAST同源搜索方法共搜寻并分析了12个物种的miR-302基因簇。生物信息学分析表明,这些物种miR-302基因簇均位于LARP7蛋白基因的内含子区,但转录方向与LARP7基因转录方向相反。序列相似性分析显示,同一物种miR-302簇成员间以及不同物种相应miR-302簇成员间相似性均较高。进化分析表明,基因复制可能是miR-302基因簇进化的主要驱动力。     

Trizol法提取普通小球藻总基因组DNA

Trizol法主要应用于动植物RNA提取,由于其在提取RNA的过程中将DNA有效分离到有机相中,并且在有机相中DNA未被降解,因此本研究采用Trizol法提取具有细胞壁的普通小球藻的基因组DNA,发现提取得到的DNA纯度和产率高,且DNA完整性好。经检测:D260 nm/D280 nm=1.86,平均得率为977μg/g鲜质量;琼脂糖电泳检测其条带清晰,未发生降解。该方法具有简单快速获得高纯度和高产率的小球藻基因组DNA的优点。     

金黄色葡萄球菌CP5偶联鞭毛蛋白疫苗对小鼠乳腺炎模型的保护作用

以鞭毛蛋白(flagellin)作为载体蛋白,通过化学偶联至金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖(CP5),并在小鼠模型上检验多糖疫苗对小鼠存活及其乳腺的保护作用.将小鼠分为4组:生理盐水组、CP5单独免疫组、牛血清白蛋白(BSA)-CP5偶联组和flagellinCP5偶联组,每组10只,分别进行皮下免疫,均含CP5 10 μg;共免疫两次,两次免疫间隔3周.第2次免疫两周后,用金黄色葡萄球菌分别对小鼠腹腔、乳腺进行攻毒,并通过实时定量PCR对乳腺组织细胞因子IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-12的表达进行检测.结果表明,CP5偶联鞭毛蛋白疫苗对小鼠乳腺具有显著的保护效果,并在乳腺组织部位诱导了Th1型细胞因子表达,说明鞭毛蛋白是CP5的理想载体蛋白.     

嗜热自养甲烷杆菌DX01抗胁迫蛋白质的分离纯化与鉴定

从中国广东温泉分离得到一株嗜热自养甲烷杆菌DX01(Methanothermobacter marburgensis DX01).分析嗜热自养甲烷杆菌DX01在不同生长温度的细胞全蛋白质图谱,分离得到一个抗胁迫相关蛋白质--甲基辅酶M还原酶I,它在70 ℃时上调表达,以此帮助宿主抵抗高温引发的胁迫影响.PCR克隆了甲基辅酶M还原酶I的基因全序列,系统发育分析表明甲基辅酶M还原酶I在不同的产甲烷菌株中保守性很高,M. marburgensis DX01与M. thermoautotrophicus和M. marburgensis Marburg的序列相似度分别是97.6%和99.2%.实时定量PCR分析表明甲基辅酶M还原酶I在不同培养温度下的MCR I mRNA表达量有显著的差异,MCR I mRNA表达量随着温度增加而增加.嗜热自养甲烷杆菌DX01菌株的抗胁迫相关蛋白质(甲基辅酶M还原酶I)的分离为研究极端古菌适应极端环境提供了新线索.     

一种简便大豆原位转基因方法研究

以萌发大豆幼苗顶芽为外植体,经纵切及农杆菌侵染后种植到大田中,转化植株用除草剂进行表型鉴定,存活植株进行PCR验证,并分析目的基因EPSPS在T2代转基因植株中的遗传情况;总计获得草铵膦涂抹表型鉴定阳性T0植株75株,草甘膦喷雾鉴定阳性T1植株65个,PCR测序阳性T1植株6个,PCR测序检测转化效率为0.14%;获得T2代PCR阳性植株52个,初步证明目的基因EPSPS能在子代中遗传;该方法能有效解决基因型依赖及再生植株困难等问题,缩短转化周期,为根癌农杆菌阶段的大豆遗传转化体系的优化与改良提供了参考。     

中国大豆育成品种10个重要家族的遗传相似性和特异性

以我国10个大豆育成品种重要家族的179个品种为材料,选用161个均匀分布于大豆基因组的SSR分子标记,采用PowerMarker Ver. 3.25软件分析参试材料的遗传多样性、相似性与特异性。结果表明,161个位点上共检测到1697个等位变异,单位点变幅为5~24个,平均10.5个;多态信息含量在0.549~0.947间,平均0.832;群体具有丰富的遗传变异。聚类分析表明,179个品种可归为6大类11小类,同一家族的品种有聚为一类的趋势。品种间亲本系数和遗传相似系数显著相关(r = 0.67);山东寿张县无名地方品种(A295)、即墨油豆(A133)、滑县大绿豆(A122)和铜山天鹅蛋(A231) 4个家族亲本系数和相似系数均较小,遗传基础较宽广;矮脚早(A291)、上海六月白(A201)、奉贤穗稻黄(A084)和51-83 (A002) 4个家族亲本系数和相似系数较大,遗传基础较狭窄,这与选择育种品种较多有关;东北白眉(A019)家族与其他家族间的亲本系数和遗传相似系数均最小。家族间特异性分析表明,东北白眉(A019)家族和其他9个家族地理距离较远,存在较多互补、特有、特缺等位变异;而III区和II区地理位置较近,种质交流较多,两区家族间特有、特缺等位点数较少,其中A002、A231和A122三个家族无特有等位变异,A084、A201、A034和A231四个家族无特缺等位变异。本研究结果对拓宽大豆育成品种遗传基础具有指导意义。     

油菜花粉谷蛋白酶解物的制备

以陈放1年的油菜蜂花粉为原料,对破壁脱脂后的花粉中各组分蛋白含量进行了研究,其中谷蛋白的含量约占总蛋白含量的55.7%,清蛋白为39.O%,球蛋白和醇蛋白只有3.2%和2.1%.以谷蛋白为原料,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对油菜花粉谷蛋白最佳酶解条件进行了研究.结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解油菜花粉谷蛋白的最佳水解条件为底物浓度6%,pH值9.0,水解温度60℃,酶底比1460U/g,水解时间2h,谷蛋白酶法改性后抗羟基自由基的活性能达到70.0%.     

4种食用菌提取物对2种植物病原真菌的抑制作用

[目的]探讨4种食用菌提取物对西瓜炭疽（Colletotrichum orbiculare Arx）和辣椒疫霉（Phytophthora capsici）生长的影响。[方法]金针菇（Flammulina uelutipe）、平菇（Pleurotus streatus）、香菇（Lentinus edodes SingShiitake）和木耳（Auricularia auriculawood Ear）分别与蒸馏水混合后破碎,过滤,离心得到提取物,以西瓜炭疽、辣椒疫霉2种植物病原菌为供试菌,对提取物的抑菌活性进行了测试。[结果]金针菇、平菇和木耳提取物对这2种菌株的菌丝生长有一定的抑制活性,其抑制率与提取物浓度呈正相关,其中木耳提取物对2种菌株抑制率最高,达到100％;而香菇提取物对西瓜炭疽菌抑制率较低,对辣椒疫霉甚至有促进菌丝生长作用;金针菇、木耳提取物经高温处理（120℃）后,2种食用菌对西瓜炭疽菌的抑制率均降低,对辣椒疫霉的抑制率则出现不同的结果,处理后的金针菇提取物对辣椒疫霉具有促进作用。而木耳提取物对其抑制率依然达100％,对西瓜炭疽的活性有所降低,仅为53．6％。[结论]4种供试食用菌中确实存在抗植物病源真菌物质,这些物质对温度具有一定的敏感性,为生物抑制剂的开发奠定了基础。