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淇河鲫生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达 总被引:1,自引:0,他引:1
从脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增并克隆到淇河鲫(Carassius auratus gibelio var)的生长激素(GH)基因cDNA,其GenBank注册号为DQ350437.分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列,结果显示:克隆到的淇河鲫生长激素基因的开放阅读框(ORF)包括633个核苷酸,编码210个氨基酸,其中,包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽.把GH成熟肽的cDNA克隆入表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N端含6个组氨酸的融合多肽.SDS-PAGE结果表明,0.1 mmol/LIPTG诱导表达的蛋白约为23.5 kD,其表达量超过蛋白总量的50%,主要为不溶性的包涵体.细菌裂解液沉淀溶于8mol/L尿素后,用固定化金属配体亲和层析纯化,获得了分子量约为23.5kD的单一蛋白带. 相似文献
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一种建立大鼠心肌肥厚的简便方法 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]介绍一种简便的建立大鼠心肌肥厚模型的方法。[方法]健康成年SD大鼠20只,试验组(10只)皮下注射异丙肾上腺素(ISO),对照组(10只)皮下注射生理盐水。计算2组大鼠HW/BW、LVW/BW;观察2组大鼠心脏的组织病理变化;检测血清乳酸脱氢酶、总抗氧化能力、碱性磷酸酶的活力及丙二醛的含量。[结果]与对照组相比,试验组大鼠的HW/BW、LVW/BW均明显升高;心肌细胞直径明显变大,细胞间质增多,细胞间距变大;血清中乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的活力及丙二醛的含量明显升高,而血清总抗氧化能力明显降低。[结论]大鼠心肌肥厚模型造模成功,该方法技术简便,容易掌握。 相似文献
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[目的]探讨香水百合染色体的变异程度,为引种驯化和杂交育种提供依据。[方法]用SAS软件统计,并进行巢式方差分析,对香水百合居群问、个体间、同源染色体闻的变异作出定量评估。[结果]在相对长度方面,香水百合12对染色体变异约有88.91%来源于居群内,约有11.09%来源于居群间;在臂比方面,香水百合12对染色体变异约有80.98%来源于居群内,约有19.02%来源于居群间;在染色体长度比、平均臂比、核型不对称系数和染色体组实际长度方面,香水百合染色体变异约有96.36%来源于居群内,约有3.64%来源于居群间。[结论]香水百合染色体变异居群内具明显的多态性,居群间具多型性,且染色体结构变异主要来源于居群内。 相似文献
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黄檗植物产小檗碱的内生真菌的分离鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]探索黄檗植物产小檗碱的内生真菌的分离与鉴定。[方法]从黄檗中分离内生真菌,采用改良的碘化铋钾试剂及薄层层析法对其代谢产物进行分析,对可能产生小檗碱的菌株进行扩大培养,然后对培养后提取物采用KBr涂片法进行红外光谱检测,并以氘代甲醇为溶剂进行核磁共振氢谱检测,最后进行初步形态学分类。[结果]从黄檗中分离得到13株内生真菌,其中菌株BBH6可能产生小檗碱:通过扩大培养以及红外光谱检测和核磁共振氢谱检测,最终确定内生真菌BBH6能够产小檗碱;该菌株菌丝发达,分生孢子暗色,多细胞,由横纵隔膜分成砖格状,依据真菌形态分类法,该菌株应归属于真菌门的交链孢霉属。[结论]该研究为药用植物内生真菌的研究提供了参考依据和借鉴。 相似文献
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试验旨在研究有机磷农药氧化乐果对雄性小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)和精液质量的影响作用。将40只健康昆明雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高3个染毒组和对照组,其中染毒组分别灌胃1.0、2.0、4.0 mg/kg氧化乐果,对照组灌胃生理盐水,采用等容量灌胃法(0.2 mL/10 g体重),连续灌胃14 d。随着氧化乐果染毒剂量的逐渐增加,小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)活力、精子密度、存活率均明显降低,与对照组相比差异显著(P<0.05);小鼠体重、睾丸重、附睾及其脏器系数与对照组相比差异均不显著(P>0.05)。氧化乐果对小鼠精子密度和精子存活率有一定的损伤作用,对睾丸琥珀酸脱氢酶有明显的抑制作用。 相似文献
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以芦荟叶片为试材,采用酶解方法进行原生质体分离,并在此基础上对斑纹芦荟和不夜城芦荟进行原生质体融合。结果表明,以芦荟的叶肉细胞为试材,可成功分离出原生质体,而且活力较高,达90%以上。聚乙二醇(PEG)融合的结果可获得部分融合体。芦荟原生质体的成功分离主要取决于材料的来源、酶液的组成,另外还受酶解液的渗透压、温度和pH值等影响。融合的效率主要受融合剂的浓度、原生质体的生理状态及处理的时间等影响。 相似文献
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[目的]揭示香水百合核型变异式样和变异规律,为引种驯化、杂交育种提供依据,同时,也为探讨物种的分化与适应问题提供条件。[方法]从染色体水平对其核型进行分析。[结果]香水百合无染色体数量变异,但结构变异明显,主要表现为染色体相对长度、臂比、次缢痕数目与分布等方面。[结论]染色体结构变异是其核型的主要特征,也是其进化的主要途径。 相似文献
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[目的]为克隆木聚糖酶基因和构建基因工程菌提供重要的生物信息。[方法]曲霉固态发酵经硫酸铵盐析、疏水层析、凝胶过滤层析和阴离子交换层析等提纯步骤,获取纯的木聚糖酶并对其性质进行研究。[结果]该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为4.5;纯酶在45℃以下较稳定,在pH 5.0~9.0范围内稳定;Ca2+对该酶有促进作用,Mn2+、Pb2+、Sn2+有较强的抑制作用;其分子量为26.8kDa;该酶在波长250和280 nm处分别有最小和最大吸收峰,是典型的蛋白质特征吸收峰,它在200~230 nm范围内有一个很大的吸收峰;该酶的等电点为4.2,为酸性蛋白质;Km为9.2 mg/ml。[结论]该研究为研究木聚糖酶的功能与应用奠定了基础。 相似文献