鸡传染性支气管炎实验室诊断方法研究进展

传染性支气管炎是鸡的一种重大传染病,临床上无典型的病变特征,诊断较为困难。现有的实验室检测方法有血清学、病原学和分子生物学方法,但该病病原变异复杂,血清型众多,交叉免疫性低,临床上又多采用活毒进行免疫,以至实验室无法对疫苗毒和野毒进行准确区分。为了更好地控制本病,有必要根据临床特点对目前各种检测鸡传染性支气管炎的方法及其优缺点进行分析,为临床寻找一种适合的快速准确的诊断方法、制定合理的免疫程序和发展新型的诊断方法提供参考。     

牛传染性鼻气管炎病毒套式PCR检测方法的建立

利用套式PCR技术建立一种快速检测牛传染病鼻气管炎病毒(bovine infectious rhinotracheitis virus,IBRV)并能区分野毒株和gB基因缺失疫苗的方法。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒的gB和gE基因序列,应用pri mer5.0软件设计了gB/BN和gE/EN的2套套式PCR引物,分别对IBRV标准株进行PCR扩增,结果表明,这2套引物均能扩增出与设计目的片段大小一致的特异性条带;用此引物对同属的伪狂犬病毒、马立克氏病毒、鸭瘟病毒进行扩增,具有良好的特异性。引物gB/BN和gE/EN的检测灵敏度分别为0.01TCID50和0.1TCID50。     

美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光RT-PCR检测方法的建立

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟（HCV）、猪伪狂犬（PRV）等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。     

丹顶鹤空肠弯曲菌感染情况调查

对江苏省盐城国家级珍禽自然保护区丹顶鹤中空肠弯曲菌带菌情况进行监测,共采集泄殖腔标本80份,采用国标法,并用API Campy System进行了生化与分类鉴定,结合弯曲菌多重PCR检测方法,共检出弯曲菌17株,阳性率为21.67%,其中空肠弯曲菌10株。结果表明,丹顶鹤弯曲菌的感染与年龄有关,未成年丹顶鹤弯曲菌阳性率极显著地高于成年丹顶鹤;同时对部分菌株用琼脂扩散法进行药敏试验。     

盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹体中的衰减研究

采用超高效液相色谱-质谱串联法,研究了不同养殖条件下盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹体内的残留消除规律.结果表明,盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹体内衰减消除较慢,休药35d后各组实验蟹体内的盐酸环丙沙星残留均远高于仪器检测限;各组实验蟹体内盐酸环丙沙星残留衰减消除速率总体表现为,28℃条件下的衰减消除速率快于22℃;五期幼蟹的衰减消除速率快于扣蟹;室外开放水域中的消除速率快于室内条件.     

井岗霉素在水稻叶片中的残留分析

建立了井岗霉素高效液相色谱分析法:紫外检测器UV,检测波长210nm,以甲醇与Na2HPO4缓冲液(pH=7,体积比为2∶98)为流动相,流速1.2mL·min-1,以甲醇/水(体积比为9∶1)为提取溶剂,以C18固相萃取柱净化。并研究了井岗霉素在水稻叶片上的残留行为。结果表明:建立的方法平均回收率为84.25%～102.25%,变异系数(CV)为1.64%～2.98%,最低检出限为0.92mg·kg-1,方法符合残留分析的要求。消解动态试验结果表明:添加或不添加表面活性剂9708的井岗霉素在稻叶中的半衰期(T1/2)分别为2.4和3.0d,最终残留量未检出。     

视黄醇对试验性乳腺炎大鼠氧化应激的调节机制

60只清洁级SD大鼠自怀孕10 d起,每天灌胃8 000 IU/(kg·d)视黄醇(溶解于大豆油),对照组灌胃等体积大豆油直至分娩。于产后72 h经乳头管灌注2×10~(12)CFU/mL大肠杆菌悬液每侧100μL到第4对乳腺(两侧)内,分别于灌注前(定义为0 h)及灌注后12、24、48、72 h(n=6)颈静脉放血处死动物,采集样品。结果显示,试验性乳腺炎引起细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达显著升高,从而促进中性粒细胞(PMN)迁徙及活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的释放。与对照组相比,试验组ICAM-1相对表达峰值前提,乳腺组织中MPO活性降低。结果表明,PMN是宿主抵御乳腺感染的主要效应细胞,视黄醇能促进PMN迅速向乳腺组织迁徙,释放ROS消灭病原菌,发挥吞噬作用后迅速从乳腺腺泡清除减轻PMN持续浸润造成的组织损伤。     

我国进境粮食检验检疫监管风险与应对

近年来,我国进口粮食数量不断增长,给我国的生态环境、安全卫生等方面带来了严重的风险隐患,如何进一步加强进境粮食检验检疫监督管理是当前的一项重大课题。本文对我国现阶段进境粮食检验检疫监管中存在的风险进行了深入分析,并在监管制度、国际合作、工作体系、技术性措施等方面提出了相关的对策和建议,有助于提高进境粮食检验检疫工作质量。     

植物检疫实验室生物安全概况及思考

本文阐述了生物安全的概念、植物检疫生物安全的起源及经典案例。列出了生物安全相关的法律法规和标准规范。从人员、建筑设计及设施设备、样品及有害生物、检测流程等方面提出了植物检疫实验室生物安全的关键控制点,同时也提出了建立植物检疫实验室生物安全的分级标准、制定相关管理规定或认可规范的建议。     

2003-2013年全国进境水果截获疫情分析

对2003-2013年全国口岸进境水果截获的各类疫情进行统计分析.全国进境水果中截获有害生物总计2043种388831种次,检疫性有害生物130种25450种次;从130多个国家及地区进境水果中截获检疫性有害生物,其中截获数量最多的国家是泰国;截获最多的检疫性有害生物为杧果果核象甲(Sternochetus mangiferae).针对疫情截获情况,提出在水果检疫查验过程中应关注的工作重点,为更好地开展水果检疫监管提供参考.