猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究

用DNA重组技术，将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置，获得重组质粒pBVpIL-6，转化大肠杆菌DH5α后，42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达，表达量约占总蛋白的20％。表达的蛋白以包涵体形式存在，包涵体经过变性溶解和复性后用酶联免疫吸附试验（ELISA）做定性定量检测。ELISA结果证实了所表达的蛋白为猪IL-6，复性后具有一定活性．并测出了复性后活性蛋白的浓度。     

贵州省天然林保护工程区人工商品林采伐试点成效及问题探讨

人工商品林的合理采伐是实现森林的社会、经济、生态三大效益,缓解木材供需矛盾的有效手段,也是合理经营森林的重要途径。本文阐述了贵州省2003—2004年天保工程区人工商品林采伐试点的必要性和实施情况,总结了采伐试点取得的成效,对采伐实施中存在的问题进行了分析探讨并提出了建议。     

经济开放度与地区经济发展的相关分析

选取代表经济开放因素的贸易开放度、资本开放度和生产开放度这三个指标加权合成经济开放度 ,用以反映一个地区经济的开放程度 ,通过计算看出我国各地区间的经济开放度存在显著的差异。作各地区的经济开放度与GDP的回归分析 ,结果表明经济开放度与地区经济发展水平具有很强的正相关性 ,经济开放是影响经济发展的很重要的原因之一。因此要加快中西部地区的经济发展必须提高其经济开放水平。     

春季繁殖鮸鱼亲鱼血清中雌二醇、孕酮和睾酮水平变化分析

模拟鮸鱼自然繁殖生境,采用调控水温、光照,并结合注射生物激素,促使鮸鱼在春季达到性成熟,以春季繁殖鮸鱼亲鱼为材料,检测了其血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)和睾酮(T)变化情况。结果表明:1~3月,E2、P和T含量很低;从4月份开始E2、P和T含量逐渐上升;5月份E2、P和T的含量急剧上升,最大值分别到达416.8±254.6 pg/ml、1.75±0.41 ng/ml和0.39±0.18 ng/ml;6月份E2、P和T维持较高的含量;多次催产后到7月份,E2、P和T明显下降,均处于较低水平。说明E2、P和T的检测较准确地反映了人工控制条件下春季繁殖鮸鱼亲鱼的生殖生理活动。     

用套式PCR方法对几种猪用冻干疫苗的PCV2检测

参照Genbank已发表的猪圆环病毒2型的基因序列,取其比较保守的基因片段ORF2,利用引物设计软件Oli-go5.0设计两对PCV2型特异的引物,其中第一对引物扩增跨度为ORF2全基因片段,长度为702 bp,第二对引物扩增ORF2中间的一个小片段,跨度大小为494 bp.首先用第一对引物扩增阳性DNA,阳性DNA的浓度从10-1稀释到10-11,然后以第一次PCR产物为模板,用第二对引物进行PCR,发现这种套式PCR的方法比用普通PCR灵敏度提高102倍.同这种套式PCR方法对广东省市场上出售的几种猪用弱毒疫苗进行猪圆环病毒2型检测,结果发现这几种疫苗全部为阴性,本实验说明目前广东市场上出售的弱毒疫苗在制作过程中没有受到PCV2的污染,解除了广大猪场主的顾虑.     

Effects of M. vaccae on eosinophil apoptosis and Bcl-2 protein expression in lung tissues of asthmatic guinea pigs

AIM: To study the effects of M. vaccae on eosinophil apoptosis and Bcl-2 protein expression in lung tissues of asthmatic guinea pigs. METHODS: 30 guinea pigs were divided into normal saline (NS) group, asthma group and M. vaccae treatment group at random, every group included 10 guinea pigs. Guinea pigs in M. vaccae treatment group were injected intramuscularly with 22.5 μg M. vaccae 10 days before OVA immunization. TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) technique was used to investigate the apoptosis of eosinophils and immunohistochemistry method was used to study the expression of Bcl-2 protein in lung tissues. RESULTS: The apoptosis index (AI) of eosinophils in lung tissues in M. vaccae treatment group was significant higher than that in asthma group ［(23.78±5.42)% vs (4.56±0.68)%, P<0.01］. The mean optical density value of Bcl-2 protein in lung tissues of M. vaccae treatment group was significant lower than that of asthma group ［(1 556.3±492.4) vs (2 321.9±751.2), P<0.05］. CONCLUSION: The apoptosis of eosinophils induced by M. vaccae in lung tissues of asthmatic guinea pigs may be due to the inhibition of Bcl-2 protein expression.     

不同刈割方式对苇状羊茅混播草地生产性能的影响

采用不同刈割高度和不同留茬高度处理对优良混播组合“苇状羊茅 +多年生黑麦草 +扁穗雀麦+白三叶”人工草地进行了刈割利用试验 ,结果表明 :该混播组合人工草地刈割利用时以草层高度40cm、留茬高度 5cm效果最好 ,可最大限度地发挥该草的生产性能和延长利用期     

利用BrdU在CEF(TK~ )细胞中筛选TK~-重组鸡痘病毒

将新城疫病毒 (NDV)四平株 HN基因 ,插入不含报告基因、以 TK为侧翼的鸡痘病毒表达载体 p UTA- 2中的复合启动子下游 ,获得重组表达质粒 p UTA- 2 HN。将重组表达质粒转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,培养、收获病毒后 ,用含 40 m g/ L 5 -溴 - 2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U )的培养液 ,在 CEF(TK )细胞中筛选培养 2代 ,然后用不含 Brd U的培养液进行病毒蚀斑纯化 ,成功筛选出表达 NDV HN蛋白的 TK-重组鸡痘病毒     

猪带绦虫不同发育阶段的cDNA合成及含量测定

本文以猪带绦虫成熟虫卵、孵化激活的六钩蚴以及人工感染的囊尾蚴为原始材料，采用Promega试剂盒法分别分离提取总RNA和mRNA，反转录合成cDNA，并用a-^32P CTP掺入法放射测定其含量。实验表明：合成的猪带绦虫虫卵、六钩蚴和囊尾蚴的cDNA含量高，均可达2500ng，片段大小在300bp以上，可满足构建不同发育阶段cDNA基因文库的需要。     

哺乳类精原干细胞体外培养影响因素

精原干细胞为体内天然干细胞，如能体外培养建系或建立其长期培养系统，将会极大地促进精原干细胞移植，转基因等技术的实际应用，也会给体外研究细胞的发育分化提供很好的材料，影响精原干细胞外存活，增殖的因素很多，该文主要综述了基本培养基的选择、血清和添加剂，激素和维生素的应用及SCF、LIF、bFGF等生长因子的作用等，以期促进精原干细胞的研究。