猪轮状病毒的细胞培养特性与FQ-PCR检测方法的建立

为了探讨动物轮状病毒的细胞培养特性和分离方法,建立FQ-PCR检测方法,旨在为研发诊断试剂盒和疫苗莫定基础.37℃5%CO2下用细胞培养液C培养ELISA检测的阳性猪粪便样本,观察细胞形态的变化;用RV感染MA-104细胞,分离纯化病毒,测定VP6基因序列并分析其同源性,在普通PCR和实时定量PCR的基础上,建立FQ-PCR检测方法.结果,MA-104细胞培养的最佳条件为37℃5%CO2 ;接毒后18 h出现细胞膜缩融合、细胞层裂开、细胞核固缩及空泡化等明显的细胞病变(CPE),CPE达到90%时可收毒;分离到1株猪轮状病毒(暂命名为GSPRV01株),得到VP6为1 200 bp,与标准株(AV-55)的同源性为88.50%.     

新的小公牛去势法——化学去势

化学去势是向小公牛的睾丸内注射一定量的化学去势液,使失去产生精子、睾丸酮和雄性激素的能力,而达到去势的目的。化学去势液是一种含88％(重量比)乳酸的灭菌溶液制剂。适用于体重70公斤以内的健康小公牛。     

ELISA双抗体夹心法检测幼犬轮状病毒的研究

应用ELISA双抗体夹心法对幼犬轮状病毒感染情况进行调查,结果表明兰州地区幼犬轮状病毒感染阳性率为57.1%,其中2～4月龄的幼犬占阳性病例的75.0%,而2月龄以内及大于4月龄的犬感染轮状病毒的病例较少。     

FRBI降低卵巢癌K-Ras和c-Myc基因及IP3通路的研究

【目的】探讨促卵泡激素受体结合抑制剂(FRBI)对绵羊卵母细胞中K-Ras、c-Myc及FSHR mRNA和蛋白质水平的影响,进一步阐明FRBI是否通过IP3信号通路发挥作用。【方法】将卵母细胞置于10 IU/mL的FSH和不同质量浓度FRBI (0、10、20、30和40μg/mL)的体外成熟培养基中培养24 h。应用ELISA检测IVM培养液中K-Ras、c-Myc、c AMP、FSH和IP3的含量。q RT-PCR和Western-blot检测卵母细胞中FSHR mRNA和蛋白质的水平。【结果】至24 h时,随着FRBI剂量增加,COM-1组至COM-3组c-Myc质量浓度逐渐降低,COM-3显著低于FSH组(P0.05),COM-4组24 h的K-Ras质量浓度显著低于阴性对照组(CG)和FSH组(P0.05);COM组中,FSHR mRNA和蛋白表达水平随着FRBI剂量的增加而下降,高剂量组(COM-4) mRNA与蛋白质表达水平显著低于FSH组(P0.05)。cAMP和IP3含量随FRBI剂量增加而递减,COM-4组IP3显著低于CG组(P0.05)。【结论】在FSH存在下,FRBI可减少K-Ras和c-Myc的产生,抑制卵母细胞的FSHR水平,FRBI可能通过IP3通路发挥作用。     

基于专业认证的动物医学实践教学改革研究

动物医学是一个实践性很强的专业。在“新农科”背景下,动物医学专业认证对本科人才培养提出更高的要求。该文深入分析动物医学实践教学中存在的诸多问题,提出在专业认证背景下,动物医学实践实训教学改革的内容及重要意义。为加快提高动物医学专业人才培养质量,培养应用型卓越农林人才奠定坚实的基础。     

牛的麻醉技术与麻醉护理研究进展

大动物麻醉技术的研究目前取得了较大进步,无论是麻醉技术或麻醉管理,也不论是在吸入麻醉与非吸入麻醉等方面,现综合国内外资料做一论述。     

绵羊卵泡颗粒细胞的体外培养与保存

哺乳动物卵巢内含有数量庞大的腔前卵泡,然而在生理条件下,这些卵泡只有大约1%能发育到成熟的排卵阶段,其余都由于闭锁而退化,这是对雌性繁殖潜力的极大浪费。通过在体外培养复苏这些卵泡的生长,可以为体外受精,克隆和转基因等生物工程技术提供潜在的同种质卵母细胞来源[1]。特别是随着克隆和转基因技术的发展,将来对卵母细胞的需要越来越大,只靠回收窦腔卵泡中的卵子已经不能满足需求,通过体外培养卵巢组织或者卵泡,复苏卵巢中占主导地位的腔前卵泡的生长,可以加强我们对卵泡颗粒细胞生存、发育的生理调节机制的了解,对于提高高遗传和经济价值的家畜以及在科研上具有重要价值的动物的繁殖潜力,珍稀或濒危动物的保护以及人类生育能力的保存和辅助受孕具有重大意义[2]。     

乳房炎乳与正常乳中六种微量元素含量测定与分析

为研究微量元素含量与乳房炎发生的相关性,采集健康荷斯坦牛与乳房炎奶牛的乳汁各15份,用火焰原子吸收光谱法（FAAS）测定了6种矿物元素铁（Fe）、铜（Cu）、锌（Zn）、锰（Mn）、镁（Mg）、钴（Co）含量,并进行了对比分析。结果表明患乳房炎乳汁中Cu、Fe、Co和Zn含量显著低于正常乳汁（P〈0.05或P〈0.01）,而Mn和Mg含量差异不显著（P〉0.05）。乳房炎与微量元素含量具有相关性。     

牛轮状病毒VP7基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立快速特异的定量检测牛轮状病毒(BRV) VP7基因的荧光定量PCR检测方法,本研究设计扩增BRV VP7基因的特异性引物,将扩增的VP7基因片段(342 bp)克隆于pMD 18-T载体中(pMD-VP7),作为重组质粒标准品,建立EvaGreen荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法.经反应条件优化,结果表明该方法的最低检测量为8.03拷贝/μL.该方法对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、猪流行性腹泻病毒及牛结核分枝杆菌的检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性.批内和批间重复变异系数均小于3％.采用该方法对12份ELISA阳性样本检测出10份阳性,符合率83.33％.本研究建立的BVR VP7 qRT-PCR检测方法具有特异、灵敏、快速和对标本的检测能力较强等特点,可以用于临床诊断和流行病学调查.     

兰州地区299例犬腹泻的流行病学分析

对在兰州市相关动物临床上见到的299例表现各种性质和程度的腹泻病犬进行了较全面的流行病学统计分析．得出犬腹泻主要发生在每年春秋季节，以1岁以内的小犬多发，中度腹泻病例为主．平均病死率高达15．05％（8．11％～27．27％），本病的关键在于预防。