大口黑鲈GHRH基因启动子区域序列分析及其活性检测

生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)是下丘脑弓状核合成和分泌的小分子多肽,其主要功能是调节垂体细胞合成和释放生长激素。为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)GHRH基因5’侧翼启动子区域的活性和该区域中潜在的转录因子对GHRH基因表达的调控作用,对该基因5’端启动子区域约1400 bp长度的片段进行序列分析,预测顺式作用元件,获得了Oct-1、SP1、NF-1、C/EBPalp和C/EBP等多个潜在的调控GHRH基因表达的调节因子结合位点序列。在包括外显子1和内含子1的GHRH基因5’侧翼区两侧加入两个限制性酶切位点Xho I和Bam H I,对其进行改造,并将该片段插入红色荧光蛋白报告基因载体p DsRed2-1,构建了重组表达质粒pGHRH1-RFP。同时,用不含有外显子1和内含子1的GHRH基因5’侧翼区构建重组表达质粒p GHRH-RFP。将质粒pGHRH1-RFP和p GHRH-RFP转染鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epithelioma papillosum cyprinid,EPC)。经过48 h的培养,在pGHRH1-RFP转染的部分细胞中检测到红色荧光蛋白表达。又将pGHRH1-RFP或p GHRH-RFP质粒注射到斑马鱼(Danio rerio)一细胞或二细胞期的胚胎中,注射了pGHRH1-RFP的胚胎在受精后48 h约有22.5%能检测到有红色荧光蛋白表达,受精后72 h约有29%的仔鱼检测到红色荧光蛋白表达。实验结果表明,目前分离到的GHRH基因5’侧翼序列具有启动基因表达的活性,且该基因的内含子1和外显子1是启动子的活性所必需的。另外,pGHRH1-RFP质粒注射的斑马鱼胚胎只能在胚胎和仔鱼的脊椎和肌肉中检测到RFP的表达,而在脑中没有检测到表达。推测扩增到的大口黑鲈GHRH启动子序列1407 bp(-1043 bp~362 bp)只是起到了驱动RFP脊椎和骨骼肌表达的作用,而不包括驱动在脑组织中特异性表达的启动子,本研究为GHRH基因功能的深入分析奠定了基础。     

来自海南等地的17个Bt分离株质粒多样性分析

本研究采用琼脂糖凝胶电泳对分离白海南岛的12个反菌株与分离自广西、黑龙江的5株＆菌株及2株胁模式菌株进行质粒数量、大小等特征分析。19个供试菌株可区分为16种独特的质粒电泳图谱,充分显示出不同来源肪菌株的质粒多样性。进一步选择了其中的10个菌株,利用包埋法制备琼脂块进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）,结果表明苏云金芽孢杆菌大质粒组成特征也具有丰富多样性。但是供试菌株的质粒电泳图谱并未体现与地理和生态特征相关联的特征差异。研究结果初步证实海南分离株S3078—1是一株无内生质粒的助菌株,而S3031-1和S3073—1两个分离株仅有一个大质粒存在,这三个分离株将为进一步研究质粒功能提供初始菌株。本研究进一步暗示将琼脂糖凝胶电泳和脉冲场凝胶电泳结合起来研究质粒特征提高了结果的可靠性。     

苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白VIP3研究进展

营养期杀虫蛋白（vegetative insectcidal protein,VIP）是由苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）在营养生长指数中期至稳定期期间分泌产生的一类新型杀虫因子,分为VIP1、VIP2和VIP3三种,以VIP3的研究最为深入。VIP3A对鳞翅目害虫具广谱杀虫活性,可作用于敏感昆虫中肠上皮细胞刷状缘膜囊致离子通道的形成,杀虫活性达纳克级水平。利用Bt ICPs不同启动子与vip3基因重组可提高VIP3蛋白的表达量和稳定性。转vip3基因植物也已有构建成功的报道。本文从VIP3的类型和杀虫活性、作用机理、vip3基因的定位和分离、vip3基因重组和转vip3基因植物等方面详细介绍了VIP3近十年来的研究进展。     

悬浮液体肥在滴灌施肥中对香蕉生长·水肥利用的影响

[目的]为了研究田间悬浮液体肥(SLF)对香蕉生长及水肥利用的影响。[方法]以单质化学肥料为对照,研究农季高液体悬浮肥对香蕉生长及产量的影响。[结果]SLF处理肥料成本比对照降低24.7%,香蕉单株产量19.40 kg/株,折合产量41.3×103kg/hm2,比对照增产2.5%,增收5 889元/hm2,经济效益显著提高。[结论]悬浮液体肥在滴灌施肥中具有广阔的应用前景。     

PCR和IFA测定猪圆环病毒2型半数细胞培养感染量的比较

采用聚合酶链式反应（PCR）和间接免疫荧光法（IFA）测定PCV2 SN07-1 2株的半数细胞培养感染量(TCID₅₀),初步比较两种方法测定病毒滴度的差异。参照Reed-Muench法计算TCID₅₀,并采用荧光定量PCR（Real-time PCR）法对试验结果进行验证。对于同一病毒样品,IFA法测出的TCID₅₀为10^6.5/mL,PCR法测出的TCID₅₀为10^5.0/mL,结果表明:IFA法比PCR法更敏感,更适宜用于测定PCV2的效价。     

谈基层农机推广

随着国家"十二五"发展规划的实施,中国农机化的发展也在发生着日新月异的变化,农机化工作已从原有的单一的粮食生产全过程农机化向多产业的全程机械化发展,并且向农业生产的产后延伸。农业机械的现代化程度也在不断地提高,过去的以粮食为主的农机推广工作已不能满     

拖拉机的使用与保养

拖拉机在使用过程中,零件或配合件由于松动、磨损、变形、疲劳、腐蚀等因素作用,工作能力会逐渐降低或丧失,使整机的技术状态失常。为了使拖拉机经常处于完好技术状态和延长使用寿命,必须对拖拉机进行正确操作、维护与调整。一、拖拉机的操作与使用1.发动机的启动（1）启动前的准备工作检查发动机油底壳的油面位置;检查变速箱、后桥的油面位置;检查转向油箱的油面位置;松动熄火拉线锁紧装置,使熄火拉线松回,喷油泵处于供油位置;     

巴彦淖尔市临河区农企合作整建制推进配方肥的做法与体会

巴彦淖尔市临河区是内蒙古首批实施测土配方施肥项目的试点县（区）之一,2012年又被农业部确定为农企合作整建制推广配方肥示范县。整建制推广配方肥项目实施以来,临河区认真组织、狠抓落实,积极开展配方肥研发,农企合作,产需对接,创新模式,整区推进,大力推广配方肥的应用,真正做到配方到厂,技术到户,配方肥下地,解决了测土配方施肥“最后一公里”难题,取得了比较成功的经验。     

不同培养基配方对杏鲍菇1号产量及生物转化率影响试验分析

结合本地实际,选用杏鲍菇1号作为材料,通过不同培养基配方试验,得出不同配方培养基栽培的杏鲍菇出菇个数、子实体等形态各不相同。使用玉米芯或玉米秸秆,与棉籽壳作为混合培养基栽培杏鲍菇时,合理的配方培养基其产量、生物转化率比单独使用玉米芯或玉米秸秆栽培杏鲍菇时有明显提高。玉米芯和棉籽壳混合料某些配方甚至要高于单纯使用棉籽壳培养料。因此,在伊犁河谷建议使用配方4培养基或配方5培养基栽培杏鲍菇,与对照相比可使其生物学效率提高到90%以上,产量较高,具有较好的推广价值。     

丰县茶薪菇高产栽培技术

介绍了丰县茶薪菇高产栽培技术,主要包括栽培环境条件、栽前准备、菌袋制作、发菌管理、催蕾管理、出菇管理、采收及保鲜等内容,以期指导菇农在茶薪菇栽培中解决污染率高、产量低、品质差等问题。