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为了根据猪弓形虫感染血清差异表达多肽,建立一种新的质谱检测方法,采集江苏泰州地区部分养殖场育肥猪血清,利用间接血凝法(IHA)分析弓形虫感染状况,将IHA阳性与阴性血清分别归为感染组和对照组,采用磁珠纯化试剂盒富集血清多肽,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF Mass Spectrometry)检测,并结合flexAnalysis 2.0与Clin Pro Tools软件分析检测图谱并建立检测模型。对海陵、高港、姜堰部分猪场的IHA检测显示,猪弓形虫感染率分别为16%(8/50)、16%(8/50)、18%(9/50)。质谱检测m/z 800~12 000区段发现,弓形虫IHA阳性与阴性相比较,在育肥猪血清中共有9个多肽峰表达有显著性差异,其中m/z 1 608.59、1 971.84、5 004.01、4 617.49、7 808.23的5个多肽峰的表达显著上调,而m/z 1 233.01、8 007.66、2 356.37、3 735.65的4个峰呈显著下调,应用ClinProTools建模方程建立弓形虫感染猪的检测模型。可见MALDI-TOF质谱结合ClinProTools分析可建立猪弓形虫感染检测新方法,为弓形虫的诊断提供了一种新思路。 相似文献
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为研究氧化苦参碱-黄芪多糖中药复方在鸡生产中的应用效果,测定了不同剂量氧化苦参碱-黄芪多糖中药复方(OAP)对雏鸡血清抗氧化性能的影响。选择120羽14日龄非免疫健康罗曼公雏鸡,随机均分为4组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别口服低剂量(1 mg/mL)、中剂量(2 mg/mL)和高剂量(4 mg/mL)的氧化苦参碱-黄芪多糖中药复方,每羽1 mL,Ⅳ组为口服等量生理盐水的空白对照组,分别于试验开始后的第7、14、21和28天时采血,测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)和丙二醛(MDA)活性。结果:雏鸡血清SOD含量在第28天时Ⅰ组与Ⅳ组差异极显著(P0.01),提高17.81%,Ⅱ组在试验第7、14、21和28天与Ⅳ组雏鸡血清SOD含量均出现差异极显著(P0.01),分别提高16.23%、35.96%、25.08%和30.53%;Ⅱ组在试验全期与Ⅳ组雏鸡血清GSH-Px含量差异极显著(P0.01),分别提高25.08%、19.48%、25.50%和15.91%;雏鸡血清GR在第14天时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与对照组差异显著(P0.01),分别提高了30.09%、54.03%、30.02%,第21天时雏鸡血清GR差异显著(P0.01),分别提高了18.78%、39.28%和18.96%,第28天时雏鸡血清GR差异显著(P0.01),分别提高了26.41%、48.24%和25.25%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在整个试验期间雏鸡血清中MDA含量都有不同程度降低,Ⅰ、Ⅲ组在试验全期与Ⅳ组雏鸡血清中MDA含量出现显著差异(P0.05),Ⅱ组在试验全期与对照组雏鸡血清中MDA含量出现极显著差异(P0.01)。综上,3种不同剂量氧化苦参碱-黄芪多糖中药复方均对机体抗氧化能力能显著改善,以Ⅱ组中剂量(2 mg/mL)最为适宜。 相似文献
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本研究旨在观察青蒿琥酯对庆大霉素诱导犬急性肾损伤的抗氧化调节作用及其机制。将20只犬随机等分成4组:对照组(Control)、庆大霉素模型组(GM)、青蒿琥酯治疗组(GM+ART)、青蒿琥酯+ML385干预组(GM+ART+ML385)。除对照组,其他组犬采用注射GM建立AKI模型。成功造模后,GM+ART组给与青蒿琥酯,ART+ML385组给与ART和ML385,对照组和GM组给予生理盐水,试验期12 d。用不同浓度GM与MDCK细胞共培养,确定最佳浓度为4.0 mmol·L-1,用相同方法确定ART最佳浓度为50.0 μmol·L-1。将体外培养MDCK细胞、过表达Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的MDCK细胞(M-K)和敲减核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的MDCK细胞(M-SiNrf2)分别分成3组:健康对照组、GM对照组和GM+ART干预组,共培养24 h后用于检测。结果显示:1)在动物试验中,GM+ART组肌酐(Cr)、尿素氮(UN)及肾损伤因子1(KIM-1)水平显著低于GM组,GM+ART+ML385组Cr、UN及KIM-1水平显著高于GM+ART组。2)在动物试验中,与GM组比较,GM+ART组Nrf2和谷胱甘肽半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)蛋白表达上调,Keap1蛋白表达下调,肾组织匀浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平升高,丙二醛(MDA)水平降低。与GM+ART组比较,给与ML385后Nrf2和GCLC蛋白表达下调,T-SOD和GSH水平降低。3)在细胞试验中,与4.0 mmol·L-1 GM共培养的MDCK细胞比较,加入50.0 μmol·L-1ART能显著提高细胞增殖率,降低ROS水平,下调Keap1表达,上调Nrf2、血红素氧合酶1(HO1)及GCLC表达。4)在细胞试验中,与MDCK细胞比较,在GM+ART相同处理下,M-K细胞和M-SiNrf2细胞Keap1蛋白表达上调,Nrf2、HO1及GCLC蛋白表达下调,细胞增殖率降低,ROS含量升高(P<0.05或P<0.01)。综上所述,青蒿琥酯对庆大霉素诱导犬急性肾损伤具有保护作用,其作用机制与青蒿琥酯通过Keap1/Nrf2信号通路抑制氧化应激反应有关。 相似文献
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