对基层重大动物疫病免疫工作中存在问题的一点思考

我国对重大动物疫病防控主要采取强制免疫计划,随着新修订《动物防疫法》的颁布和实施,基层动物防疫投入逐步加大,防疫队伍建设逐步加强,各地也都逐步建立了村级防疫员队伍,基层动物防疫网络进一步健全和完善,为做好重大动物疫病的免疫工作奠定了基础。然而,基层动物防疫工作仍然存在着不少问题,严重制约着重大动物疫病防控水平的进一步提升,为重大动物疫病的防控埋下了巨大隐患。     

印第安纳型水疱性口炎病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

根据印第安纳型水疱性口炎病毒（VSV）L蛋白的序列，设计了一套特异性引物，建立了检测VSV核酸的一步法RT-PCR方法，并用该法检测了不同的组织样品。结果显示，人工感染VSV小鼠组织检测为阳性，而口蹄疫、猪水疱病、猪瘟、猪生殖与呼吸综合征等病料检测均为阴性，表明该方法具有较好的特异性。     

印第安纳型水泡性口炎病毒核衣壳蛋白基因在毕赤酵母表达系统中的表达

将含有IN型VSV核衣壳蛋白基因的重组质粒pET-32a/N用EcoRI和NotI进行双酶切,目的基因克隆到表达载体pPICZαA,构建重组质粒pPICZαA/N。用SacI酶切线性化,并以电转化方法转化受体酵母菌GS115,PCR证实目的基因整合到重组酵母菌染色体中,经鉴定所获得的重组酵母菌株为Muts表型。用甲醇对重组酵母进行诱导表达,经SDS-PAGE和Westernblot鉴定,核衣壳蛋白基因在毕赤酵母中获得表达,目的蛋白分子量大小为约75kDa,表达量约占菌体总量的20%,并能够被VSV阳性血清所识别,可用于VSV的血清学检测。     

用ELISA法检测饲料中莱克多巴胺含量

近年来全社会对“瘦肉精”猪非常关注，政府出台了一系列相关法律法规，加大了对生产、销售以及在猪饲料、饮水中添加“瘦肉精”等违禁药物的打击力度，同时对饲料、尿样、内脏中“瘦肉精”残留量的检测水平和检测频率也有了很大的提高，对不法分子起了较大的震慑作用。但由于利益的驱使，加之对“瘦肉精”替代品的检测仍处于起步阶段，违法活动并没有停止。现有证据表明，莱克多巴胺作为“瘦肉精”替代品已在养猪生产中被使用。本试验用ELISA方法对吴江市区域内生产和销售的中大猪配合饲料进行莱克多巴胺含量检测，以摸索有效、快速的莱克多巴胺检测方法，探明目前吴江地区猪用饲料中使用违禁药物的现状。