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为构建犬细小病毒VP2基因分泌性表达细胞系,通过酶切将人CD5信号肽序列从质粒中切出,将其连接到真核表达载体pcDNA3.1A的多克隆位点上,构建成pcDNA3.1-CD5sp质粒。然后再通过PCR方法扩增犬细小病毒VP2基因,并将其插入到pcDNA3.1-CD5sp载体中CD5信号肽的下游,使其与CD5信号肽序列融合,构建成VP2基因的真核分泌型表达载体pcDNA-CD5sp-VP2。经脂质体介导转染细胞,后通过G418筛选,建立出稳定表达VP2蛋白的CHO-K1细胞系。测序结果表明,构建的犬细小病毒VP2基因的分泌型表达载体结构正确,表达载体经脂质体介导转染CHO-K1细胞,通过G418加压,筛选出稳定转染VP2基因的细胞株,经PCR检测证明VP2基因已经整合到细胞的染色体中;经RT-PCR、Westernblot分别检测VP2基因表达的mRNA和VP2蛋白,证明犬细小病毒VP2基因能够在CHO-K1细胞进行稳定性表达。这为下一步研究犬细小病毒VP2蛋白与宿主细胞的相互作用及VP2DNA疫苗奠定了基础。 相似文献
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文章从农村居民可支配收入增长变化特点和组成结构入手,分析了宁夏近10年来农村居民可支配收入增长变化趋势,提出引导农民转变生产经营方式、加强培训考核、政策支持和促进农村一二三产业融合发展等方式提高小农户生产性收入、经营性收入和财产性收入。 相似文献
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目前,高职院校作为我国高等教育密不可分的部分,为适应社会发展需要,旨在培养技术应用型人才。而青年教师,作为高职教育发展中的重要力量,其个人成长与发展至关重要。以长江职业学院为例,通过对该校231名青年教师进企业顶岗锻炼的调查研究,探讨我国高职院校青年教师进企业顶岗实践的现状及存在的问题。采用了文献法、问卷调查法和访谈法,从政府的支持力度不够、高职院校缺乏合理的规划和教师个人对于企业实践认知不足这三个层面分析了青年教师在顶岗实践方面存在的问题及原因,为高职院校的企业顶岗实践的制度研究提供理论基础和实际应用价值。 相似文献
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新形势下建设和稳定民办高校师资队伍的对策 总被引:2,自引:0,他引:2
王微 《山东省农业管理干部学院学报》2008,23(5):193-194
师资队伍在民办高校发展中有着极其重要的作用,直接影响到民办高校的办学质量和发展前景。受人事制度、管理方式、社会认同等方面的限制,民办高校师资队伍存在结构不合理、缺乏认同感等问题。新形势下要想建立一支高素质的教师队伍,需要政府、教育行政部门、民校自身和民校教师共同努力。 相似文献
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导致农民创业特征形成的依据需要从他们所根植的社会经济结构、所建筑的家庭经济基础,以及所能获得的创业机会中去寻找。通过分析,农民创业的特征主要为:创业心理较为脆弱、创业行为受到牵制、创业视界相对局限。应对这些特征的实现途径可围绕着:培育农村产业集群化发展模式、设计互助式小额资金拆借机制、助力创业项目拓宽商业化渠道、两级联动下开展创业培训工作等四个方面构建。 相似文献
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1.驾驶操作基本长识
1.1出车前的检查和准备
①检查水箱是否有足够的水,不足时应添加。②检查发动机油底壳的润滑油油面高度是否在正常高度范围内,不足时适当添加。③查看挡位,挡位应在空挡位置。④检查油箱的燃油和液压油箱的液压油是否足够,检查变速箱等处的润滑油是否足够。⑤查看各管路系统是否有漏油、漏水现象。⑥检查各重要连接部件的螺栓等紧固件的紧固情况。⑦查看轮胎气压是否足够或履带的张紧度情况。 相似文献
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