分泌抗春雷霉素单克隆杂交瘤细胞株的建立 及免疫学特性鉴定

【目的】制备高灵敏、高特异性的抗春雷霉素单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。【方法】采用EDC法将KSM分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫原KSM-BSA和包被原KSM-OVA,经SDS-PAGE鉴定后,免疫Balb/c小鼠,免疫间隔4周,4次免疫后,利用间接ELISA和间接竞争ELISA测定其多抗血清效价和敏感性,选出效价高、敏感性好的小鼠进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出分泌高敏感的特异性抗KSM单克隆抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备抗KSM的单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。【结果】SDS-PAGE鉴定结果显示KSM-BSA成功偶联,间接ELISA检测显示免疫的6只小鼠血清效价均达1:104以上,其中3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为73.9ng•mL-1,融合后筛选出两株杂交瘤细胞株1G7和2C8,亚型均为IgG1型,其细胞上清效价分别为1:5.12×103 和1:1.28×103,腹水效价分别为1:5.12×105和1:2.56×105,抗KSM的单克隆抗体对春雷霉素的IC50为8.902ng•mL-1,与其它竞争物的交叉率均小于0.03%。【结论】本试验成功合成了春雷霉素人工抗原,并制备了敏感性高、特异性好的单克隆抗体,为春雷霉素免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。     

几种生物杀虫剂桶混迈丝对苹果绣线菊蚜的田间防治效果

[目的]明确9种生物杀虫剂桶混迈丝对苹果绣线菊蚜的田间防治效果及对苹果树的影响.[方法]采用常规喷雾法进行试验.[结果]10％吡虫啉可湿性粉剂、20％啶虫脒可溶粉剂、1.8％阿维菌素乳油、6％鱼藤精微乳剂桶混迈丝对苹果绣线菊蚜防效高,速效性好,药后1、7 d的防治效果分别达92.02％～96.22％和96.97％～99.61％;0.3％印楝素乳油、0.5％藜芦碱可溶液剂、1.3％苦参碱水剂桶混迈丝防效高,速效性较好,药后1、7 d的防治效果分别为83.05％～87.93％和96.94％ ～99.85％;25％噻虫嗪水分散粒剂桶混迈丝防效较高,速效性较好,药后1、7 d的防治效果均在84％左右;1.5％天然除虫菊素水乳剂桶混迈丝防效差,药后1、7 d的防治效果分别为23.97％和-90.65％.桶混迈丝可显著提高10％吡虫啉可湿性粉剂的速效性,药后1 d防治效果由未桶混迈丝的59.45％提高至94.62％.药后1 d至苹果成熟期,各药剂处理对苹果生长发育均无明显影响.[结论]筛选出的生物杀虫剂在试验剂量下桶混迈丝喷雾对苹果绣线菊蚜防效理想,对苹果安全,可大面积推广.     

桶混添加天达-2116、阿泰灵和迈丝对防治苹果叶部病害药剂的减量效应

在陇东生态条件下，以苹果园主要杀菌剂桶混配方"苯醚甲环唑+代森锰锌"为指示杀菌剂，田间测定桶混添加"天达-2116+迈丝"和"阿泰灵+迈丝"对防治苹果黑星病和苹果斑点落叶病药剂的减量效应。结果表明：在确保对苹果生长发育安全，对2种病害均有理想防治效果的条件下，桶混添加"天达-2116+迈丝"和"阿泰灵+迈丝"均可将参试杀菌剂桶混配方中10%苯醚甲环唑WG 和80%代森锰锌WP的施用量分别降至稀释3 500倍和1 000倍，较常规制剂用量分别减少用药28.57%和40%；第6次药后10 d、30 d和  52 d，对苹果黑星病的防治效果分别达到88%、85%和81%以上，以桶混添加"阿泰灵+迈丝"的较高；对苹果斑点落叶病的防治效果分别达到78%、74%和64%以上，以桶混添加"天达-2116+迈丝"的较高。可见，桶混添加"天达-2116+迈丝"和"阿泰灵+迈丝"可明显减少苹果园杀菌剂的施用量，建议在生产上推广应用。     

喹乙醇单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定

通过质谱法鉴定合成喹乙醇-半琥珀酸酯(OLA-HS),紫外法及凝胶电泳法鉴定全抗原OLA-BSA和OLA-OVA后,使用杂交瘤技术制备喹乙醇单克隆抗体(OLA mAb),对其效价、亲和力、敏感性、特异性及亚型进行鉴定,并通过体内诱生腹水法进行大量制备。试验结果表明,本研究成功制备了OLA-HS,且半抗原与载体蛋白偶联成功;筛选出的5株杂交瘤细胞单抗同种型均为IgG1,细胞培养上清间接ELISA效价在1∶3.0×102～1∶1.28×103之间,用4E12细胞株制作的腹水效价为1∶5.12×105。OLAmAb亲和常数Ka为3.75×1010L/mol,对OLA的IC50为1.51ng/ml,且具有较好的特异性。试验获得了高效价、敏感、特异的OLA mAb,可用于动物性食品中OLA残留检测的免疫学试验。     

抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备与应用

将鸡传染性支气管炎病毒M41 株尿囊液差速离心纯化 ,制备抗原 ;应用杂交瘤技术建立了 3株分泌抗鸡传染性支气管炎病毒的杂交瘤细胞株 ,其免疫球蛋白亚类分别属于IgG1 、IgG2a、IgG2b。 3株单克隆抗体与鸡新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、产蛋下降综合征病毒及禽流感病毒均无交叉反应 ,YNZ - 55和YNZ - 62可识别多数鸡传染性支气管炎标准毒株及地方分离株 ,其腹水ELISA效价达 1 0 - 5,且识别的抗原位点互不重叠 ,为高亲和力的群特异性单克隆抗体 ,是制备鸡传染性支气管炎快速诊断产品的理想试剂     

北方耐寒型彩色树种引种试验

文章以银果胡颓子、银柳、兰云杉和紫叶稠李等树种为例,介绍了扦插繁殖、组织培养快速繁殖和成树嫁接的关键技术,最后对耐寒型彩色树种在我国北方寒冷地区的引种推广应用前景进行了展望。       

平凉市设施蔬菜黄瓜棒孢叶斑病调查

对平凉市设施蔬菜主要分布区黄瓜棒孢叶斑病发生情况进行调查表明,黄瓜棒孢叶斑病现已在全市形成5点2带分布格局。日光温室易发黄瓜棒孢叶斑病,黄瓜受害最重,病棚率、病株率、病情指数分别达到41.5%、33.0%和21.0,塑料大棚和露地栽培仅黄瓜有零星发病。