中间球海胆卵膜与受精膜去除方法及染色体核型分析

去除卵膜及受精膜是成功制备棘皮动物染色体的关键步骤。为找到高效去除海胆卵膜与受精膜的方法,使用三氮唑（2 g/L）、盐酸海水溶液（pH 4.75）、二硫苏糖醇（3×10^-3 mol/L）和对氨基苯甲酸（3×10^-3 mol/L）等4种化学试剂分别对中间球海胆（）卵子及各时期胚胎进行处理,比较了不同试剂、处理时间或处理时期的去膜率、去膜后受精率和胚胎畸形率等指标的差异;利用常规空气干燥法对经去膜处理的囊胚期胚胎制备染色体,并进行核型分析。结果表明,三氮唑、盐酸海水溶液、二硫苏糖醇和对氨基苯甲酸等4种试剂对中间球海胆的卵膜和受精膜均有去除效果,其中2 g/L三氮唑处理未受精卵30 min的去膜率为85.50%,去膜后受精率为97.25%,畸形率为1.75%,去膜效果优于其余处理组。利用经该方法去膜后的早期囊胚进行染色体制备效果较好,获得了61个分散良好、形态完整的染色体中期分裂相。核型分析表明,中间球海胆的二倍体染色体数为2n=42,核型公式为：2n=20m+20sm+2st,NF=84,即有10对中部着丝粒染色体,10对亚中部着丝粒染色体,1对亚端部着丝粒染色体,染色体臂数为NF=84。本研究可为海胆染色体制备及染色体操作育种提供技术参考。     

赤霉素在三色堇扦插繁殖上的应用

三色堇是一种优良的观赏草花,但其种子的价格相对比较昂贵,利用赤霉素促进茎的伸长生长的原理,采不同品种的三色堇植株插穗,通过使用不同浓度的赤霉素处理,对三色堇的扦插繁殖技术进行了研究。结果表明,使用27×10-6浓度的赤霉素能明显促进三色堇芽的生长。     

坛紫菜响应高光胁迫的分子机制

坛紫菜（Neoporphyra haitanensis）生活于中高潮区，退潮后会遭受到周期性的强光胁迫，但高潮复水后坛紫菜叶状体可以快速恢复正常生长，表明坛紫菜具有极强的耐高光能力。然而，其耐高光机制尚不明确。为此，本研究挑选了两个耐高光能力具有显著差异的坛紫菜新品系作为研究对象（绿色品系：9-IV；桔色品系：WO141-3），测定了高光胁迫下两个品系藻体的光合速率、抗氧化酶活性等生理指标，构建了两个品系的差异转录表达谱，并结合荧光定量分析技术获得了调控坛紫菜耐高光的关键通路和基因。具体结果如下：在高光胁迫下，两种坛紫菜品系叶状体的丙二醛含量均显著上升，光系统部分基因表达量显著降低，藻体光合能力显著下降。进一步分析发现，WO141-3品系在高光处理1 h具有更强的高光抗性，而9-IV品系在处理4 h后具有更强的高光抗性，造成这种差异的主要原因是：高光胁迫处理1 h时，WO141-3品系具有更高的活性氧清除能力、更强的非光化学淬灭能力以及更低的色素含量和捕光蛋白基因表达量；而在高光胁迫处理4 h时，9-IV品系的活性氧清除能力和非光化学淬灭能力更强，色素含量和捕光蛋白基因表达量都更低。以上结果说明，坛紫菜藻体可以通过激活非光化学淬灭机制和抗氧化系统，以及降低色素含量和捕光蛋白基因表达应对高光胁迫，避免遭受过度光损伤和氧化损伤。本研究结果为阐明紫菜的耐高光机理奠定了理论基础。     

不同脱毒处理怀地黄对干旱胁迫的响应特性

以怀地黄的病毒苗、茎尖脱毒苗、“电”疗法脱毒苗为试材，采用不同浓度PEG 6000(0%、5%、10%、15%)模拟干旱胁迫的方法，研究了干旱胁迫对3种材料形态特征、叶绿素、叶片相对含水量、渗透调节物质及抗氧化酶活性的影响，以期为脱毒地黄在大田栽培上的应用推广提供参考依据。结果表明：PEG 6000胁迫下，3种材料生长明显受到抑制，生根天数延长，株高、生根数、根长、鲜质量均降低，但以“电”疗法获取的脱毒苗生长情况最好；随干旱胁迫程度增加，“电”疗法获取的脱毒苗叶绿素含量先下降后上升，茎尖培养的脱毒苗略微下降，而病毒苗则表现为下降、上升再下降的趋势；叶片相对含水量逐渐降低；而可溶性糖、可溶性蛋白质含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性随胁迫程度加深则呈现出持续上升的趋势，以“电”疗法脱毒苗含量最高。综上可知，“电”疗法脱毒苗抗旱能力较强，可为地黄抗旱机制的研究及田间栽培提供示范参考作用。     

不同种质怀地黄生育期根际土壤挥发性有机物变化分析

【目的】分析不同种质怀地黄生育期根际土壤挥发性有机物（VOCs）的变化特征，为探讨地黄连作障碍及其与根际土壤中化学成分变化的关系提供理论依据。【方法】以金九、北京1号、白选3个种质地黄为研究对象，于07-28（地上部位快速生长期）、08-24（地下块根膨大初期）和10-18（成熟期）采集根际土壤样品，分别编号为J-7、J-8、J-10，B-7、B-8、B-10和X-7、X-8、X-10，利用气相-质谱联用（GC-MS）技术检测其乙酸乙酯和二氯甲烷提取物的VOCs，通过面积归一化法对各成分的相对含量进行计算，并应用统计学方法对不同种质地黄各生育期根际土壤VOCs进行主成分分析（PCA）及聚类分析（HCA），利用正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）结合t检验筛选各生育期差异的VOCs。【结果】从3个种质地黄不同生育期根际土壤乙酸乙酯提取物中共得到56个共有色谱峰，从二氯甲烷提取物中共得到50个共有峰。不同时期地黄根际土壤VOCs差异较为明显，其中8月根际土壤VOCs与7月、10月差异更为明显，3个生育期地黄根际土壤乙酸乙酯提取物与二氯甲烷提取物共有差异VOCs分属于酮类、醇类、酚类。【结论】不同种质地黄同一时期根际土壤VOCs表现基本一致，但同一种质地黄根际土壤VOCs在不同生育期存在差异。     

小麦TaHKT家族基因的生物信息学分析

高亲和性钾离子转运蛋白（high-affinity K⁺ transporter，HKT）是植物体内一种非常重要的离子转运蛋白，具有运输Na⁺/K⁺的能力，在植物响应盐胁迫过程中发挥重要作用。为系统了解小麦TaHKT家族基因，挖掘有效的小麦耐盐基因，本研究采用生物信息学的方法，对小麦TaHKT家族基因进行了全基因组分析，鉴定了家族成员，构建了系统进化树,并对其跨膜结构域、染色体定位、基因结构、Motif、上游顺式作用元件、共线性以及表达谱等进行了分析。结果鉴定出23个TaHKT基因，其编码蛋白质长度为443~590 aa，等电点范围8.2~10.4，跨膜结构域为6~8个。23个基因分布于小麦的2、4、6、7号染色体上，根据亲缘关系可将其分为3个亚族，同一亚族的成员具有较为相似的Motif组成和基因结构。23个基因中，发现了4对串联重复基因，10对大片段复制基因，具有良好的共线性。顺式作用元件分析发现，大部分TaHKT成员含有盐胁迫响应元件MYB、G-box、ABRE和DRE。表达谱分析发现，TaHKT基因在小麦的16种组织中均有表达，在根、茎中的表达量较高，其中TraesCS4D02G361300（ID,下同）在根中的表达量最高。在盐胁迫处理后，不同成员对盐胁迫响应程度不同，TraesCS7B02G318400在盐胁迫处理后表达量逐渐降低；TraesCS2B02G451400和TraesCS2D02G428200在盐胁迫处理后的表达量也明显降低；TraesCS2B02G451800在根部几乎不表达，但在受到盐胁迫处理后表达量逐渐提高，推测它们在小麦抵御盐胁迫过程中发挥不同作用。