新疆部分地区规模化猪场猪囊等孢球虫的套式PCR检测及感染情况分析

[目的]了解新疆部分地区规模化猪场猪囊等孢球虫的感染情况。[方法]基于猪囊等孢球虫SSU rDNA基因位点设计引物，采用套式PCR法对采集自新疆7个规模化猪场的801份猪新鲜粪便DNA样本进行检测；对不同养殖场、不同年龄段猪的猪囊等孢球虫感染率进行比较分析，对获得的SSU rDNA序列进行比对分析并构建种系发育进化树。[结果]调查猪场中猪囊等孢球虫感染率为5.74%（46/801），以沙雅县养殖场感染率最高，为14.00%（14/100），不同养殖场猪囊等孢球虫感染率统计学差异极显著（χ²=27.081，df=6，P<0.01）。未断奶仔猪、断奶仔猪、育肥猪和母猪的猪囊等孢球虫感染率分别为14.79%（25/169）、5.78%（13/225）、2.31%（4/173）和1.71%（4/234），不同年龄段猪的猪囊等孢球虫感染率统计学差异极显著（χ²=36.366，df=3，P<0.01）。序列比对和种系发育分析显示，获得的46条猪源囊等孢球虫SSU rDNA序列与安徽省凤阳县猪源猪囊等孢球虫分离株（GenBank登录号：KX808495）SSU rDNA序列的同源性均为100%，处于同一个亚群。[结论]新疆部分地区规模化猪场猪囊等孢球虫感染较常见，应加强检测和防治工作。     

金丝桃素对小鼠生长性能、脏器指数及盲肠微生物多样性的影响

[目的] 探讨金丝桃素对小鼠生长性能、脏器指数及盲肠微生物多样性的影响。[方法] 将100只4周龄雌性昆明小鼠随机分为5组,每组20只;金丝桃素通过饮水给予小鼠,添加量分别为0、1、2、4、8 g/L;正饲期28 d,记录小鼠体重和采食情况,计算平均日增重、平均日采食量和料重比;记录死亡小鼠数量,计算死亡率;试验结束时用颈椎脱臼法处死小鼠,采集并称量心脏、肝脏、肾脏和脾脏,称重并计算脏器指数;采集盲肠内容物,利用16S rDNA高通量测序法分析盲肠微生物多样性。[结果] 饮水中添加1、2、4 g/L的金丝桃素可提高平均日增重（P>0.05）,4 g/L组平均日增重最高,比0 g/L组增加21.21%;饮水中添加金丝桃素可提高平均日采食量（P>0.05）,2 g/L组平均日采食量最高,比0 g/L组增加18.30%;4 g/L组的料重比最低（P>0.05）,比0 g/L组降低9.24%。1 g/L组、2 g/L组、4 g/L组、8 g/L组的心脏指数显著（P<0.05）高于0 g/L组,4 g/L组的肾脏指数显著（P<0.05）低于1 g/L组。盲肠菌群在门（Phylum）水平上,以厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度最高,其次为拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形菌门（Proteobacteria）,3个菌门占细菌总数的97.58%。在属（Genus）水平上, 普雷沃菌属（Prevotella）、拟杆菌属（Bacteroides）、考拉杆菌属（Phascolarctobacterium）相对丰度较高;1 g/L组、2 g/L组、4 g/L组的普雷沃菌属（Prevotella）和巨单胞菌属（Megamonas）的相对丰度显著（P<0.05）低于0 g/L组,副瘤胃球菌属（[Ruminococcus]）显著（P<0.05)高于0 g/L组;4 g/L组盲肠副拟杆菌属（Parabacteroides）、瘤胃球菌属（Ruminococcus）、乳杆菌属（Lactobacillus）显著（P<0.05)高于0 g/L组。[结论] 在饮水中添加金丝桃素在一定程度上有助于提高小鼠采食量和增重,显著提高心脏指数,增加盲肠内有益菌的相对丰度,对小鼠健康表现出有益作用。     

重组牛粒细胞集落刺激因子的纯化鉴定及对小鼠的安全性评价

[目的]评价重组牛粒细胞集落刺激因子（recombinant bovine granulocyte colony stimulating factor,rbG-CSF）的安全性,为后期rbG-CSF临床应用价值的研究打下基础。[方法]采用rbG-CSF重组大肠杆菌,经过发酵、纯化后获得rbG-CSF;利用SDS-PAGE法对[目的]蛋白进行鉴定;应用BCA法测定目的蛋白浓度。急性毒性试验使用健康昆明小鼠112只,分为8组,雌雄各半,将8组小鼠分为肌肉注射组和腹腔注射组,肌肉注射组和腹腔注射组分别设有1个对照组和3个剂量组,3个剂量组注射rbG-CSF的剂量分别是150、75、37.5 μg/只,对照组注射生理盐水,给药后每隔3 d进行1次称重,持续观察14 d,给药后14 d对各组小鼠进行剖检,取肝、脾、肾、生殖器官进行脏器系数测定和病理切片观察。慢性毒性试验使用健康昆明小鼠160只,分组与急性毒性试验相同,注射rbG-CSF的剂量分别是15、10、5 μg/只,每周注射1次,每周注射的第6天进行1次称重,持续注射12周,第12周给药后7 d对小鼠进行剖检,处理方法同急性毒性试验。[结果]rbG-CSF纯化成功,经SDS-PAGE法鉴定[目的]蛋白大小为21.5 kDa,与设计大小一致;测得[目的]蛋白浓度为302.19 μg /mL,可满足后期安全性试验所需浓度要求;急性毒性试验和慢性毒性试验中,小鼠的体重和脏器指数经SPSS 20.0单因素方差分析,剂量组与对照组相比均无显著差别;剖检各器官未出现明显病变;HE染色切片观察,各剂量组与对照组不存在显著变化。[结论]该试验建立的纯化鉴定rbG-CSF的方法可行,rbG-CSF在试验浓度下对小鼠并未造成器质性的伤害。     

菌酶协同发酵菜籽粕在动物生产中的应用及存在问题

通过菌酶协同发酵技术提升菜籽粕类饲料质量和营养价值，改善适口性，降低饲料中植酸和硫苷含量，增加菜籽粕类饲料替换常规蛋白原料豆粕的比例，可在一定程度上缓解养殖业中大豆粕等蛋白饲料原料成本不断提高的问题。分析发酵菜籽粕处理常用方法——微生物发酵法和酶解法的优缺点，介绍制备菌酶协同发酵菜籽粕类饲料所需的菌种和酶制剂种类，综述菌酶协同发酵菜籽粕的功效，阐述其在动物生产中的应用现状及存在的问题，以期为菌酶协同发酵菜籽粕在畜禽生产中的科学应用提供参考。     

基于线粒体DNA D-loop区序列分析中国及新西兰奶山羊遗传进化关系

[目的]分析我国地方培育奶山羊品种与国外引进品种的遗传进化关系。[方法]以4个国内奶山羊品种（文登奶山羊、关中奶山羊、崂山奶山羊、雅安奶山羊）和3个新西兰引进奶山羊品种（阿尔卑斯奶山羊、吐根堡奶山羊、萨能奶山羊）为研究对象,采集33只个体的外周血样本,提取血液基因组DNA,利用PCR法扩增线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）D-loop区全长序列,对测序获得的序列进行生物信息学分析,探究不同奶山羊品种的遗传多样性及进化关系。[结果]7个品种奶山羊的mtDNA D-loop区中A、T碱基含量高于G、C碱基含量。共检测到82个多态位点,25个单一多态位点,55个简约信息位点。各品种单倍型多样度（Hd）范围为0.905~1.000,核苷酸多样度（Pi）范围为0.001 51~0.013 32;共存在26种单倍型,文登奶山羊和萨能奶山羊各有5个单倍型,阿尔卑斯奶山羊有4个单倍型,崂山奶山羊、吐根堡奶山羊、关中奶山羊、雅安奶山羊各有3个单倍型;各品种核苷酸平均差异数（K_XY）范围为6.400 00~38.450 00,核苷酸歧异度（D_XY）范围为0.005 79~0.034 76,遗传分化系数（G_ST）范围为0.000 00~0.186 05,遗传分化指数（F_ST）范围为0.231 56~0.971 52。品种间系统发育树表明,文登奶山羊和崂山奶山羊聚为一支;关中奶山羊与3种新西兰奶山羊遗传距离较近,从遗传学角度证实了关中奶山羊由国外奶山羊与地方品种经杂交选育而成;雅安奶山羊与其他品种遗传距离最远。[结论]中国奶山羊存在2个支系起源且未发现群体扩张;中国培育奶山羊品种含有较多的国外奶山羊血统;文登奶山羊与崂山奶山羊亲缘关系较近,雅安奶山羊在遗传进化中可能存在地域隔离。     

新疆尉犁县某养殖场塔里木马鹿体表蜱和游离蜱的种类鉴定及分子遗传特征

[目的] 了解塔里木马鹿体表蜱及其圈舍环境游离蜱种类及分子遗传特征。[方法] 收集新疆尉犁县某规模化养殖场塔里木马鹿体表寄生和圈舍游离蜱共69只,使用体视显微镜对其进行形态学观察和种类初步鉴定;基于蜱线粒体SSU rRNA基因位点和COX I基因位点对其DNA进行PCR扩增,通过序列比对数据鉴定其种类,利用生物信息学方法解析其分子遗传特征。[结果] 经形态学观察,鉴定69只蜱均属璃眼蜱属,雌蜱和雄蜱分别有37只和32只。基于SSU rRNA基因位点,对成功获得的63只蜱序列进行比对,鉴定出18只为残缘璃眼蜱,均为同一序列型,命名为SCtype1（n=18）;45只为亚洲璃眼蜱,具有4种序列型,分别命名为SYtype1（n=3）、SYtype2（n=40）、SYtype3（n=1）和SYtype4（n=1）。基于COX I基因位点,对成功获得的64只蜱序列进行对比,鉴定出24只为残缘璃眼蜱,具有2种序列型,分别命名为CCtype1（n=22）和CCtype2（n=2）;40只为亚洲璃眼蜱,具有5种序列型,分别命名为CYtype1（n=25）、CYtype2（n=7）、CYtype3（n=4）、CYtype4（n=3）和CYtype5（n=1）。种系进化分析显示,在SSU rRNA基因位点,亚洲璃眼蜱序列单独形成一个亚群分支,与其他璃眼蜱属蜱的序列形成一个大的亚群分支;在COX I基因位点,亚洲璃眼蜱序列和残缘璃眼蜱序列单独形成一个亚群分支,与其他属蜱的序列形成不同的亚群分支。[结论] 新疆尉犁县塔里木马鹿体表蜱与游离蜱种类为亚洲璃眼蜱和残缘璃眼蜱。研究结果为鹿科动物寄生蜱的种类分布调查和遗传进化特征分析提供了基础数据。     

1株羊源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定、药敏试验及致病性研究

[目的] 对某养殖场由呼吸道症状引发的山羊死亡病例进行病原学诊断,并对分离到的病原进行药敏试验及致病性分析。[方法] 无菌条件下剖检并采集死亡羊只肺脏及气管组织,接种于TSA固体培养基,37 ℃培养22~24 h;挑取疑似菌落,纯化后进行革兰染色镜检和生化鉴定;对经表型鉴定的分离菌株进行16S rDNA PCR扩增、测序,并进行遗传进化树构建和同源性分析;采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行药敏试验;利用动物攻毒试验确定分离菌株对羔羊的致病性。[结果] 从临床样本中分离到1株细菌,命名为DMQ-Y-Mh。纯化后的分离菌株镜检为革兰阴性短杆菌,经生化鉴定以及16S rDNA PCR扩增、测序、同源性分析,将分离菌株鉴定为溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）。分离菌株对环丙沙星、阿奇霉素、庆大霉素敏感,对左氧氟沙星、土霉素、氟苯尼考中度敏感,对替米考星、恩诺沙星、泰乐菌素耐药。攻毒羔羊于72 h内死亡,剖检眼观气管及肺脏支气管内有黏性分泌物;肺脏组织有深红色病灶,与正常肺脏组织界限明显,可再次从死亡羔羊肺脏及气管组织分离到溶血性曼氏杆菌。[结论] 溶血性曼氏杆菌是造成该养殖场发生羊只死亡的病原菌,药敏试验结果为指导临床用药提供了参考。     

枯草芽孢杆菌不同施用次数对金银花生长和品质的影响

为了探究枯草芽孢杆菌不同施用次数对金银花生长和品质的影响，以4 a生金银花植株为试验材料，在生长季分别施用枯草芽孢杆菌剂0 （不施，CK）、1、2和3次，研究了不同施用次数对生长指标、产量和品质的影响。结果表明：随着枯草芽孢杆菌施用次数的增加，金银花叶片净光合速率、蒸腾速率和叶绿素含量均呈逐渐增加趋势；金银花中绿原酸、木犀草苷和浸出物含量逐渐升高，总灰分含量明显降低。施用枯草芽孢杆菌可显著促进金银花植株生长，明显提高金银花产量和品质。对金银花生长、品质和经济效益进行综合分析，认为枯草芽孢杆菌施用2次较好。     

雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞pik3r3、Akt、mapk3基因mRNA及蛋白表达的影响

[目的]利用雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞进行刺激,检测与分析绵羊输卵管上皮细胞pik3r3、Akt、mapk3基因mRNA及蛋白表达的变化。[方法]以5代内的绵羊输卵管上皮细胞作为研究对象,通过qPCR及Western blot检测添加10-8 mol/L的雌二醇（以等量培养基替代雌二醇作为对照组）作用0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0 h后输卵管上皮细胞pik3r3、Akt、mapk3基因mRNA及蛋白的表达情况。[结果]在绵羊输卵管上皮细胞中添加10-8 mol/L雌二醇后,随着作用时间的延长,pik3r3、Akt、mapk3基因mRNA及蛋白的表达量整体呈先升高、后降低趋势。与作用0 h相比,pik3r3基因的mRNA表达量（P<0.01）及蛋白表达量（P<0.05）在雌二醇作用1.5 h时达到最高峰,Akt、mapk3基因的mRNA表达量（P<0.01）及蛋白表达量（P<0.05）在雌二醇作用2.5 h时达到最高峰。雌二醇作用3.0 h时,pik3r3、Akt、mapk3基因的mRNA表达量相比0 h都显著（P<0.05）提高。[结论]输卵管上皮细胞中pik3r3、Akt、mapk3基因的表达受到雌二醇调控。高浓度雌激素促进pik3r3、Akt、mapk3基因的高表达,这可能与生殖道的天然防御有关,并可能通过该途径提高机体自身免疫应答能力。     

乡村振兴背景下内蒙古草原畜牧业高质量发展问题及策略研究

在乡村振兴战略背景下,内蒙古草原畜牧业的高质量发展是实施乡村振兴战略产业兴旺的重要内容之一,因此,如何增加农牧民收入,促进乡村振兴战略产业兴旺对于内蒙古草原畜牧业高质量发展具有重要意义。以乡村振兴战略为背景,在阐述内蒙古畜牧业发展现状的基础上,针对内蒙古草原畜牧业高质量发展过程中存在的突出问题,提出了推进资源节约、提升畜产品供给保障水平、提高畜产品国际竞争力、加强绿色畜产品品牌建设、健全金融支持体系等对策建议,以期为推动内蒙古草原畜牧业高质量发展提供参考。