异齿裂腹鱼PYY基因的克隆、组织分布及其调节摄食功能研究

【目的】克隆异齿裂腹鱼肽YY基因(PYY)的编码区(CDS)全长序列,对其生物信息学进行分析,并研究PYY基因在异齿裂腹鱼组织中的分布情况,以及餐前餐后和禁食复喂对PYY基因表达量的影响,为异齿裂腹鱼摄食调控机制研究提供依据。【方法】以采集于西藏雅鲁藏布江的7～12龄,体质量为(1.22±0.20) kg/尾的异齿裂腹鱼为对象,采用RT-PCR和Race-PCR技术克隆异齿裂腹鱼PYY基因的CDS全长序列,分析其编码蛋白质的氨基酸序列和蛋白结构;采用实时荧光定量PCR,分析PYY基因在异齿裂腹鱼组织中的分布情况,以及餐前餐后和禁食复喂对PYY基因在异齿裂腹鱼脑组织中表达量的影响。【结果】异齿裂腹鱼PYY基因CDS序列长度为735 bp,其中开放阅读框(ORF)为294 bp,编码98个氨基酸。系统进化分析表明,异齿裂腹鱼PYY基因与同属裂腹鱼属的鱼类亲缘关系最近;氨基酸序列分析表明,PYY蛋白质包括典型的特征序列和信号肽,其蛋白结构中具有亲水性结构和跨膜结构。PYY基因在异齿裂腹鱼脑组织中高度表达,在其他组织中微弱表达;餐前异齿裂腹鱼PYY基因的表达量无显著性差异,但餐后PYY基因的表达量显著升高,且随着餐后时间的逐渐延长,其表达量继续升高;禁食使异齿裂腹鱼脑组织中的PYY基因表达量下降,复喂后PYY基因的表达量极显著升高。【结论】成功克隆了异齿裂腹鱼PYY基因的CDS全长序列,PYY基因在异齿裂腹鱼脑组织中高度表达,但在肠道中微量表达,异齿裂腹鱼PYY基因是餐后饱感信号因子,具有调节动物摄食的功能。     

西藏不同类型菜籽饼营养成分的测定及脱毒效果研究

本文对西藏菜籽饼采用传统的水蒸法、水浸法、焙炒法和坑埋法等4种脱毒方法处理，测定其不同类型中营养物质（干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和无氮浸出物）和有毒物质异硫氰酸盐（ITC）、恶唑烷硫酮（OZT）、硫代葡萄糖甙的含量，比较脱毒前后营养成分和ITC、OZT的含量变化。结果表明：西藏菜籽饼与内地其它省份的比较，营养成分相差不大，但含毒量较低；4种方法均有一定的脱毒效果，且营养物质损失较少，但综合处理工艺、加工成本和脱毒效果看，以水蒸法明显优于其它各组方法，效果最好，可保证西藏菜籽饼饲用的安全性．适于在西藏畜牧业生产中推广使用。     

西藏地区荞麦与玉米混合青贮对发酵品质和微生物多样性的影响

为探究西藏林芝市全株荞麦与全株玉米混合青贮对青贮饲料发酵品质和微生物多样性的影响,分别设定全株荞麦单独青贮组(A)、全株荞麦∶全株玉米=4∶1混合青贮组(B)、全株荞麦∶全株玉米=3∶2混合青贮组(C)、全株荞麦∶全株玉米=2∶3混合青贮组(D)和全株荞麦∶全株玉米=1∶4混合青贮组(E)共5个处理组。分别在青贮第7、14、30和60天时,开窖取样,测定青贮饲料的发酵品质和微生物菌群结构。结果表明,与全株荞麦单独青贮组相比,全株荞麦与全株玉米混合青贮组在一定程度上改变了青贮的发酵品质,混合青贮组降低了青贮饲料的pH值,提高了乳酸含量,且氨态氮/总氮的值和丁酸含量均符合优质青贮饲料的要求量。从微生物菌群结构来看,混合青贮改变了青贮饲料的菌群结构,相比与全株荞麦单独青贮组,混合青贮组提高了厚壁菌门和LAB菌种的丰度,有效地抑制了腐败菌的生长,且这种效果随着全株玉米混合比例越高而越显著。综合考虑全株荞麦利用最大化和发酵品质,建议将全株荞麦和全株玉米以2∶3混合青贮较为适宜。     

藏猪源高产纤维素酶菌株的筛选及鉴定

【目的】从西藏藏猪粪便中分离可高效降解纤维素的菌株,并对其进行分类和鉴定。【方法】用羧甲基纤维素(CMC)水解圈法对藏猪粪便中的产纤维素酶菌株进行初筛,再用滤纸降解试验、秸秆纤维降解试验和胞外酶活力测定等进行复筛,筛选可高效降解纤维素的细菌。通过观测所获菌株的菌落形态和生理生化特征以及16S rRNA基因序列分析,对菌株进行分类鉴定。【结果】筛选到1株具有较强纤维素降解能力的菌株,经鉴定其是解淀粉芽孢杆菌的一个亚种或变种,将其命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)TL106。该菌株的内切葡聚糖酶和β-葡聚糖苷酶活力分别高达86.34和65.54U/mL。【结论】获得了可高效降解纤维素的菌株TL106,具有较好的应用前景。     

不同饲养方式下藏猪盲肠与结肠细菌群落的差异分析

为了探讨不同饲喂方式与不同肠段间藏猪细菌群落组成的差异性,部分阐明藏猪肠道微生物的特异性。选用两年龄的放牧与舍饲藏猪各3头,分别采集盲肠与结肠食糜样品,测定细菌16S rRNA基因的V3-V4区域,分析细菌群落的组成,探讨盲肠与结肠细菌群落的空间差异格局;采用Person相关性分析探索盲肠与结肠细菌群落的相关性。结果表明,不同饲养方式下,在门水平细菌群落分别有4个差异分类单元,在属水平盲肠中有19个差异分类单元、结肠中有9个差异分类单元。不同饲养方式下,藏猪细菌群落的Beta多样性表现出明显的差异性。在放牧养殖条件下,藏猪的盲肠食糜中拟杆菌门、变形菌门和TM7的相对丰度显著高于结肠（P<0.05）,厚壁菌门、螺旋体门、放线菌门、软壁菌门与疣微菌门相对丰度两个肠段间无显著差异（P>0.05）。放牧藏猪盲肠中Unclassified＿Ruminococcaceae（厚壁菌门、瘤胃球菌科）、Unclassified＿Clostridiales（厚壁菌门、梭菌目）、Unclassified＿Bacteroidales（拟杆菌门、拟杆菌目）、Turicibacter（厚壁菌门、苏黎世...     

青贮油菜在生长期藏猪饲粮中的应用研究

为研究青贮油菜在生长期藏猪饲粮中的应用效果,试验选择40头平均体重在(7.45±0.78)kg的健康状况良好的生长期藏猪,随机分成5个处理,每个处理4个重复,每个重复2头猪,分别饲喂不同添加比例(0、10%、20%、30%与40%)的青贮油菜饲粮。预饲期7 d,试验期28 d,自由采食与饮水。结果表明:随着饲粮中青贮油菜比例的升高,藏猪平均末重、全期增重、平均日增重不断降低,而饲喂基础平均日采食量、干物质基础平均日采食量、料肉比不断增加。与对照组(处理1)相比,添加10%与20%青贮油菜组藏猪的平均末重、全期增重、干物质料肉比、粗灰分表观消化率差异不显著(P0.05),而干物质、粗蛋白质与粗脂肪表观消化率显著低于对照组(P0.05),添加30%与40%青贮油菜,全期增重、平均日增重、料肉比、干物质、粗蛋白质与粗脂肪表观消化率均显著降低(P0.05)。结果说明,青贮油菜可用于生长期藏猪饲粮配制,添加10%~20%时可保障生产性能,并提高经济效益。     

缺氧条件下引入家兔血量的实验研究

在海拔3000m的西藏高原林芝，用间接测定法（T1824）对引入高原的加尼福尼亚兔、中国白兔和青紫兰兔的红细胞压积、血浆容积、红细胞容积、血液总量分别测定。结果表明，红细胞压积、血浆容积、血液总量在兔品种、兔性别之间具有引入时间先后和性别的差异性，而红细胞压积差异不明显，与低海拔家兔相比都有不同程度的增加，这对引入家兔适应高海拔、低氧分压的特定生态环境具有重要意义。