芥菜型油菜TT1基因的克隆和SNP分析

拟南芥的TT1基因(编码含有WIP结构域的锌指蛋白)对种皮的发育和颜色的形成具有重要的调控作用。本研究利用同源克隆和RACE技术分离了芥菜型油菜TT1基因,在芥菜型油菜黄黑籽材料的种皮中进行转录水平的分析,比较了黑籽油菜与黄籽油菜基因序列的差异,并采用等位基因特异(allele-specific)PCR技术对可能存在的单核苷酸多态位点进行验证。结果表明,芥菜型油菜TT1基因的DNA序列全长为2197bp,包含1个内含子,与甘蓝型油菜TT1-1基因的DNA序列的相似性为99%,与拟南芥的TT1基因DNA序列的相似性为85%;推导的TT1蛋白序列为300氨基酸残基,理论分子量为33.97kD,等电点为6.99;TT1在所有材料的种皮中均检测到表达;比较紫叶芥、四川黄籽、NILA和NILB的TT1基因序列,共发现8个核苷酸变异位点,均在基因的外显子区域,其中紫叶芥和NILA的序列相同,四川黄籽和黒籽近等基因系NILB的序列相同。与紫叶芥相比,黒籽近等基因系NILB有8个核苷酸差异,但种皮颜色与紫叶芥一样,均为黑色,TT1基因这些位点的突变并不影响芥菜型油菜种皮的颜色。通过等位特异PCR可以区分来自四川黄籽与紫叶芥的TT1基因。     

HPLC法测定5种果汁中抗坏血酸的含量

[目的]采用高效液相色谱法（HPLC）对5种水果中抗坏血酸含量进行测定和分析,进一步优化色谱条件。[方法]以脐橙（广西）、番茄（湖南）、沙田柚（广西）、苹果（河北）和猕猴桃（湖南）为试材,榨汁和离心后采用HPLC法测定了5种水果中抗坏血酸含量。色谱条件为ODS—C18色谱柱,磷酸钾溶液（pH值为6．0）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为260nm,柱温为8℃。[结果]各水果果汁中抗坏血酸含量大小分别为：脐橙〉猕猴桃〉沙田柚〉番茄〉苹果。抗坏血酸在浓度0．005～0．750g／L内有良好的线性关系,线性回归方程为Y=158558．187＋18923522．816x（r=0．9996）,线性范围为0．05～7．50峭,标准偏差（s）为3906．931,相对标准偏差（RSD）为0．04096％。[结论]用所建立的HPLC法测定的结果准确度高、重现性好,适用于新鲜的果类等食品中抗坏血酸的快速定量分析。     

RP-HPLC对柚皮中黄酮类化合物的分离和测定

采用反相液相色谱法（RP-HPLC）定量分析了柚子外、内皮中芦丁的含量,优化了柚皮中黄酮类化合物的提取工艺。色谱条件：ODS-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.4%磷酸（体积比50︰50）,检测波长为380 nm,流速为0.6 ml/min,柱温25℃。结果表明,芦丁在0.005～0.25 g/L范围内线性关系良好,回归方程为Y=20 137 004.099 7X＋850.781 4,r=0.999 9;柚外皮中芦丁的平均加样回收率为99.5%,RSD为1.156%;柚内皮回收率为98.2%,RSD为0.497%;测得柚外、内皮粉末中芦丁含量分别为1.69、0.54 mg/g。该方法具有样品处理简单、精密度高、分离度好等优点,能准确检测柚皮中黄酮类化合物的含量。     

用于PCR分析的芥菜型油菜总DNA的快速提取

通过对所提DNA质量、效率和PCR检测,建立和优化了可用于PCR分析的芥菜型油菜总DNA的提取方法,这一方法快速,所提的DNA质量好,可在芥菜型油菜生长发育早期进行。     

陕西省种源香椿天然类型叶的结构与抗逆性研究

采用比较解剖的研究方法对同一生境条件下栽培的陕西省种源血椿、粉椿和绿椿类型叶片结构及抗逆性进行了研究.结果表明,血椿、粉椿和绿椿类型在解剖结构上有显著差异,血椿类型结晶细胞较多,对碱性土壤适应性强;栅栏组织/叶肉比值大,比粉椿和绿椿的抗旱能力强.     

黑芥和埃塞俄比亚芥PAP2基因克隆及B基因组PAP2功能验证

PAP2(Production of anthocyanin pigment 2)编码MYB转录因子,与bHLH、WD40形成MYB-bHLH-WD40复合体来调控花青素合成。本研究从埃塞俄比亚芥和黑芥中分别克隆出2个和1个PAP2基因拷贝,分别命名为BcaB.PAP2、BcaC.PAP2、BniB.PAP2,这三个基因均由3个外显子和2个内含子组成,均编码247个氨基酸。基于本研究克隆的PAP2基因序列和已报道的其他芸薹属PAP2基因序列,设计了3对能分别检测A、B、C基因组PAP2基因的引物,通过等位特异PCR可以区分芸薹属禹氏三角中的6个物种PAP2的基因组来源。选取芥菜型油菜B基因组的BjuB.PAP2基因构建过表达载体,转化拟南芥,其叶片变紫,表明PAP2基因正调控花青素合成。遮光处理10天后紫叶埃塞俄比亚芥的叶片紫色变淡,花青素含量下降了41.22%。荧光定量PCR和转录组研究表明,遮光处理植株叶片中BcaB.PAP2和BcaC.PAP2表达量均下降,花青素合成的结构基因查尔酮合成酶基因（CHS）、查尔酮异构酶基因（CHI）、黄烷酮3-羟化酶基因（F3H）、二氢黄酮醇还原酶...     

常温贮藏期间鸡蛋清流变特性和蛋白质成分的变化

以鸡蛋清为原料,探究在25 ℃贮藏期间蛋清中主要蛋白质含量和流变特性等指标的变化。结果表明:随着贮藏时间延长,卵黏蛋白含量显著(P<0.05)降低;S-卵白蛋白含量显著(P<0.05)增加,至28 d时含量达到(92.99±0.81)%;溶菌酶含量呈现显著(P<0.05)的先升高后降低的趋势,但其活力趋于下降。随着蛋白质含量的变化,蛋清的起泡性和乳化性呈现显著(P<0.05)的先增高后降低的变化,而泡沫稳定性和乳化稳定性则显著(P<0.05)降低。贮藏过程中蛋清的热变性温度与热焓值逐渐增高。在贮藏前期,蛋清的表观黏度增加,贮能模量(G')>耗能模量(G″),表现为流体的弹性性质;在贮藏后期,蛋清的表观黏度减小,G'相似文献   

食糜样本中11种生物胺同步检测方法的建立

旨在建立一种利用液质联用（liquid chromatography mass spectrometry,LC-MS）技术实现对猪肠道食糜中多种生物胺进行同步检测的方法。试验首先优化了丹磺酰氯（dansyl chloride,DNS）对生物胺的衍生条件,并进一步确定了肠道食糜样品中生物胺的最佳净化方法。结果显示,衍生条件在衍生剂浓度为8 mg·mL^-1,衍生温度为40℃的条件下,衍生90 min为最佳。生物胺净化方法确定为先用乙酸乙酯进行提取,衍生结束后再用乙酸乙酯进行萃取的组合方式提取生物胺的效果最好;11种生物胺在5～1 000 μg·L^-1的质量浓度范围内定量结果呈良好的线性关系（R²>0.99）,检出限和定量限分别为0.01～0.23 μg·L^-1和0.03～0.76 μg·L^-1;各生物胺的日内相对标准偏差在0.73%～ 7.92%,日间相对标准偏差在0.07%～8.67%。最后采用本方法对仔猪回肠、盲肠、结肠和直肠食糜样品中的生物胺进行检测,初步确定了11种生物胺在不同肠段食糜中的含量分布。通过对仔猪回肠、盲肠、结肠和直肠中的食糜样品进行检测,发现食糜中的生物胺主要为亚精胺、腐胺、尸胺、精胺和组胺,而酪胺、1,7-二氨基庚烷、5-羟色胺和胍基丁胺4种生物胺含量较少,色胺和苯乙胺未检出。综上所述,本试验建立的方法具有结果准确、灵敏度高、重现性好等优点,可用于仔猪不同肠道段食糜中多种生物胺的同步检测。     

树说北京“十五”绿染京都大地

2005年是“十五”的最后一年,首都绿化传来喜讯:“十五”期间,全市累计造林197万亩,是“九五”的2倍,封山育林184．9万亩,飞播造林59．3万亩,全市林地总面积达到了1580万亩。北京1．64万平方公里的国土,已经一半以上被绿色所覆盖。前些年,曾经听到有人埋怨“年年栽树不见树”。不知不觉间,这句话已经从耳边消失了。怨言没了的另一面是树真的多了。“十五”期间,北京绿化造林步伐加快,森林资源总量迅速增长,绿化大工程带动大发展、大变化,绿化精品工程纷呈,机制和体制创新、实现了林业跨越式发展。说“树”还得用“数”来说。与“九五”末相比,林木绿化率由41．9％提高到50．5％,森林覆盖率由30．65％提高到35．47％; 活立木蓄积量由1428万立方米增加到1521．3万立方米;城市绿化覆盖率由36％提高到42％,城市人均绿地由35平方米提高到46平方米。据测算,全市森林资源的生态服务价值达3107亿元。     

HACCP在火腿肠生产中的应用

为保证火腿肠产品质量,探讨了火腿肠生产过程中各个环节可能造成的潜在危害分析(HACCP)应用。包括物理性、生物性、化学性危害分析,确定关键控制点及临界值,并制定相关的预防措施,建立监测方法,将生产过程中危害因素降低到最低。