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101.
102.
利用PCR反应,以特异性引物扩增禽流感病毒去除信号肽的H7亚型HA密码子优化基因,克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-HTB中,转座DH10感受态细胞,通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得阳性克隆,然后提取基因组Bacmid,转染Sf9昆虫细胞,得到含H7亚型流感病毒HA基因的重组杆状病毒opti-H7HA-Bac。重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞,待绝大部分细胞产生细胞病变后收获细胞,细胞裂解产物经血凝试验、SDS-PAGE及Western blot分析证实,密码子优化的H7HA基因在重组杆状病毒opti-H7HA-Bac感染Sf9细胞后获得高效表达,且具有良好的蛋白活性及特异免疫反应原性。 相似文献
103.
奶牛维生素A营养状况的调查研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了解双城地区、安害地区奶牛维生素A的营养状况,采用微量荧光法对饲草、饲料、血清中维生素A、β-胡萝卜素含量进行测定,并探讨了预防维生素A营养不良的方法。结果表明:双城地区、安达地区奶牛维生素A营养不良。 相似文献
104.
为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒。研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击。因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5mL和1.0mL进行免疫;商品鸭、鹅在2周龄均以0.5mL首免,5周龄和4月龄左右时以1mL的剂量肌肉注射方式进行加强免疫。 相似文献
105.
106.
通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别扩增了禽流感病毒A/TurKey/England/N28/73(H5N2)(TEN28/73)的8个基因片段即PA、PB1、BP2、NS、NP、M、HA、NA基因,将其分别克隆到PMD18-T载体后进行序列测定:并将克隆到的8个基因片段与GenBank发表的相应序列进行比较分析,绘制HA和NA基因的进化树.结果表明所克隆到的8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架;HA、NA基因的序列分析表明TEN28/73符合低致病力禽流感病毒的特征:HA进化分析发现TEN28/73与A/Duck/Hongkong/698/79处于不同的分支中,与A/Goose/Guangdong/1/96和A/Goose/Guangdong/3/97亲缘关系较远;NA进化分析表明TEN28/73与A/Duck/Hongkong/86/76亲缘关系较近,但和A/Leningrad/47/57的NA基因却在不同的分支中.TEN28/73全基因序列的测定是首次对H5N2亚型AIV的全基因进行序列测定工作. 相似文献
107.
用2株不同致病力的H5亚型禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6,12,24,48,72 h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene RG3 000实时定量PCR仪对H5亚型AIV的HA基因进行检测,试图建立快速检测H5亚型AIV的real-time RT-PCR方法,并用所建立的方法对来自全国各地的疑似H5亚型AIV的病料和咽喉拭子、泄殖腔拭子346份进行检测。结果表明:农业部动物流感重点开放实验室建立的HA基因的teal-time RT-PCR方法可以检测到细胞培养物中和临床样品中是否含有H5亚型AIV,与常规RT-PCR比较,该方法更加特异、准确、快速。 相似文献
108.
表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果 总被引:12,自引:0,他引:12
【目的】将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。【方法】将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白,随之将pCAGGHA5及pCIHA5分别以100 ?g和10 ?g剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100 LD50的HPAIV GD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。【结果】间接免疫荧光法和Western-blot分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI;免疫SPF鸡后,100?g pCAGGHA5可形成5/5的免疫保护,100?g pCIHA5可形成2/4的免疫保护,10?g pCAGGHA5可形成对免疫鸡5/5的免疫保护,而10?g pCIHA5 则基本不能形成免疫保护,pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。【结论】鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。 相似文献
109.
近些年来,华亭县对猪口蹄疫实施高密度的免疫接种,通过疫苗免疫使猪群得到有效的保护,对控制疫情起了显著作用。自2011年以来,我县对猪口蹄疫采用猪普通口蹄疫疫苗和MYA98苗免疫注射,普通口蹄疫主要用于散养户的免疫注射,MYA98苗主要用于规模化的养猪场。2011年我县共用两种疫苗免疫猪5.0万头;2012年春季我县共用两种疫苗免疫猪5.5万头。为了全面掌握猪普通口蹄疫苗和MYA98苗免疫注射效果,根据上级业务安排,我县在全面调查的基础上,对两种疫苗的免疫抗体水平做了对比试验,现将试验结果报告如下: 相似文献
110.
社会主义文化建设中明确提出,要促进社会主义文化大发展大繁荣,所谓的社会主义文化,就是能够为人民群众喜闻乐见的积极向上的文化作品。中华文化博大精深、源远流长,对于整个中华民族有着深远的影响,在社会主义市场经济大发展的今天,我们也不能忽视对社会主义文化的建设和发展,其中,丰富群众文化生活是发展社会主义文化的一项重要措施。 相似文献