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黄病毒RNA复制子在病毒致病机制、新型疫苗和药物研发上应用广泛,而坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)是我国新发现的以引起水禽产蛋量下降为主要特征的黄病毒属成员。为构建TMUV RNA复制子,本研究以TMUV JXSP株感染性克隆为基础,利用Overlap PCR分别对病毒基因组进行CPrME、CPrM、PrME和PrM等4种方式结构蛋白基因的缺失,并在缺失部位插入绿色荧光蛋白报告基因,报告基因下游连接口蹄疫病毒2A蛋白基因序列,获得的基因组全长PCR融合产物纯化后,体外转录成mRNA,并转染至BHK-21细胞,采用荧光显微镜观察不同时间点绿色荧光蛋白的表达;利用构建的TMUV RNA复制子,将绿色荧光蛋白基因替换为H9亚型禽流感病毒HA基因,mRNA转染细胞72 h后Western blotting检测蛋白表达。结果显示,4种TMUV RNA复制子转染细胞的胞浆和胞核内均能观察到明显的绿色荧光信号;Western blotting能检测到HA蛋白的表达。结果表明,本研究成功构建了ΔCPrME、ΔCPrM、ΔPrME和ΔPrM等4种能有效表达外源基因的TMUV RNA复... 相似文献
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研究了碱润涨预处理和微波强化碱润涨预处理对豆渣膳食纤维化学结构,物理特性以及对豆渣纤维素酯化反应的影响。结果表明,与碱润涨预处理相比,微波强化碱润涨预处理对豆渣膳食纤维的活化效果更好,二者均没有改变豆渣纤维素的化学组分。在相同的反应条件下,没有经过预处理、碱预处理和微波强化碱润涨预处理豆渣纤维素酯的取代度分别为0.0445、0.0558和0.0681,即经过预处理后豆渣纤维素的反应可及度增大,酯化效率由57.57%提高到了88.10%,且随微波辐照时间的延长,豆渣纤维素酯的取代度增加。经过酯化改性后,豆渣纤维素酯具有较强的油污去除力,且随着酯化取代度的增加,去污力呈增加的趋势,可以应用在洗涤用品中。 相似文献
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[目的]筛选出传统水提法提取当归多糖的最佳工艺及Savag’s法去蛋白时最佳操作次数。[方法]运用正交设计法设计提取工艺;采用Savag’s法去蛋白,并比较不同次数对多糖含量的影响。总糖含量测定采用改良苯酚-硫酸法;蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝法;糖醛酸含量测定采用硫酸-咔唑法。[结果]提取的最佳工艺为:料水比1:20、提取时间30min、提取温度100℃;最佳去蛋白条件为:氯仿-正丁醇(5:1),操作3次。[结论]该方法简便、易操作,适用于水溶性粗多糖的提取和检测。 相似文献
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[目的]本文旨在探究镉(Cd2+)对豌豆根边缘细胞(RBC)和早期幼根的伤害。[方法]以豌豆为材料,采用根悬空培养的方法,研究了0、1、2、5μmol·L-1 Cd2+对豌豆根边缘细胞和早期幼根生长的影响。[结果]镉对豌豆根边缘细胞和幼根产生胁迫伤害,且存在剂量效应。较高浓度的镉胁迫显著降低豌豆RBC的数量、诱导RBC凋亡。1、2、5μmol·L-1 Cd2+胁迫,RBC数量分别比对照减少7.42%、15.42%和32.17%。RBC凋亡率分别比对照上升40.53%、160.61%和306.60%。镉胁迫诱导RBC黏胶层增厚,与对照比增加了55.40%、148.74%和248.21%;镉诱导豌豆幼根抗氧化酶POD、SOD、CAT活性升高,活性氧含量增加。1、2、5μmol·L-1 Cd2+胁迫,幼根SOD活性分别比对照升高了39.71%、46.51%和53.91%,活性氧荧光强度分别比对照增加了12.66%、16.18%和44.37%... 相似文献
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通过评价H9N2亚型禽流感病毒(AIVs)感染对于鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗免疫效力的影响,研究了H9N2 AIVs的免疫抑制机理。结果显示,H9N2 AIVs感染可降低鸡对鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗的抗体应答,但与对照组相比差异并不显著;而流式分析结果显示,与对照组相比H9N2 AIVs感染可显著降低鸡外周血中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的比率(P0.05);抗原特异性的T淋巴细胞增殖试验结果显示,与对照组相比H9N2 AIVs感染鸡的外周血T淋巴细胞增殖活性显著下降(P0.05);另外,H9N2 AIV感染还导致鸡血清中细胞因子IFN-γ和IL-4应答水平的下降,其中IFN-γ的应答水平与对照组相比差异显著(P0.05)。说明H9N2 AIVs感染可抑制鸡的免疫应答,其中对细胞免疫应答的抑制更为明显。 相似文献
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从我国进入深度老龄化社会之后,老年人的各种社会问题日益突出,尤其是老年人的照护需求成为了重大的民生问题。受到社会经济条件的限制,除现有城乡基本医疗保险以及养老保险制度外,目前还没有与老年人护理相关的保障机制。为了应对人口老龄化、促进社会经济发展、实现共享发展改革成果、健全我国社会保障体系,人力资源社会保障部办公厅发布了《关于开展长期护理保险制度试点的指导意见》,宣布了我国包括东中西部地区15个试点城市首先开启对长期护理保险制度的试点探索。相较于东部地区与中部地区,西部地区失能老年人人口比重大,但发展较落后、护理机构等基础设施建设不够、老年人贫困严重等问题,使得西部地区长期护理保险的发展存在不小的障碍。结合西部地区老年人的特点,提出了西部地区失能老年人长期护理保险制度的构想,希望能给西部地区此项制度的建设提供借鉴。 相似文献
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为了解2017年江苏省禽流感的流行变异情况,共采集鸡、鸭、鹅拭子2760份,均过滤接种SPF鸡胚用以分离病毒。另选取4株宿主来源和分离地点不同的H9N2阳性样品,对其HA和PB_2基因进行测序,以分析H9N2的变异情况。结果表明:禽流感病毒的分离有两个高峰期,即4~6月、9~11月;H5、H7亚型禽流感病毒的感染率较低。4株H9N2禽流感病毒呈现出典型的人流感受体结合特性,但尚未具有突破种间屏障感染哺乳动物的能力。 相似文献