利用染色体和同工酶技术鉴定寡鬃实蝇幼虫

利用染色体组型分析和酯酶同工酶电泳等技术，对桔小寡鬃实蝇Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａｄｏｒｓａｌｉｓ（Ｈｅｎｄｅｌ）、芒果寡鬃实蝇Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａｏｃｃｉｐｉｔａｌｉｓ（Ｂｅｚｚｉ）、番石榴寡鬃实蝇Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａｃｏｒｒｅｃｔａ（Ｂｅｚｚｉ）、南亚寡鬃实蝇，Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ（Ｚｅｕｇｏｄａｃｕｓ）ｔａｕ（Ｗａｌｋｅｄ）以及瓜寡鬃实蝇Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ（Ｚｅｕｇｏｄａｃｕｓ）ｃｕｃｕｒｂｉｌａｅ（Ｃｏｑ．）５种寡鬃实蝇幼虫，可成功地加以鉴定和鉴别。     

蝽象危害柚果的症状及防治技术

近年来,由于柚园用药面积和次数减少、管理省力化技术落实不当、柚园及其周边生态环境的多样性增强和天敌种群上升缓慢,蝽象的危害程度逐年加重.据调查,蝽象危害柚果株率为5.11%,高的达30%,危害柚果率为4.18%,高的达70%,严重影响柚果外观及内质,造成落果和贮藏期腐烂.蝽象危害柚果的报道极为鲜见,相当多柚农不知蝽象危害柚果症状如何,有的甚至当作柚黑斑病进行防治,因此笔者自2000年以来进行了饲养观察和田间调查,并提出以下防治技术措施:     

生长抑素基因疫苗质粒pEGS/2SS的构建及表达

将pcS／2SS中的乙肝表面抗原（HBsAg）S基因及插入S基因中的生长抑素（somatostatin，ss）基因亚克隆到pUC19中，构建成pUSS／S质粒；PCR扩增pcS／SS中SS基因，调整阅读框，融合到pUSS／S质柱S基因后，构建成pUS／2SSG质粒；最后将S／2SSG融合基因克隆到pEGFPN1中EGFP基因的5’端，构建S／2SS-EGFP融合表达质粒pEGS／2SS。酶切、测序鉴定后脂质体包裹法将pEGS／2SS转染HeLa细胞，荧光显微镜下检测荧光，ELISA检测表达产物的SS免疫反应原性。酶切和测序鉴定表明，重组质粒pEGS／2SS构建成功。pEGS／2SS转染24h后的HeLa细胞检测到绿色荧光，72h检测到强烈荧光，表明融合基因在HeLa细胞获得高表达；ELISA证实融合蛋白具有SS的抗原抗体反应原性。质粒pEGS／2SS的成功构建及表达为生长抑素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。     

中国禽(番鸭)呼肠孤病毒分离株S1基因全序列分析

采用RT-PCR技术,分别以DRV-YH、DRV-YJL两株中国禽(番鸭)呼肠孤病毒RNA为模板,扩增了S1全基因的cDNA片段.将S1 cDNA克隆到T载体后进行序列测定,测序结果表明所扩增的cDNA片段长1643个核苷酸,包含了完整的S1基因的三个开放阅读框架(ORF1,ORF2和ORF3)和基因两端的非编码区.核苷酸序列比较分析结果表明:DRV-YH与ARV-S1133,176分别有6个,10个核苷酸的差异,DRV-YJL与ARV-S1133,176分别有8个,12个核苷酸的差异,DRV-YH与DRV-YJL有4个核苷酸的差异.     

一株禽流感病毒全基因的序列分析

通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对禽流感病毒A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)的8个基因片段即PA、PB1、PB2、NS、NP、M、HA、NA分别进行扩增,然后将其克隆到PMD18-T载体后进行序列测定和拼接;并将克隆到的8个基因片段与以下毒株各个基因的相应序列进行比较分析:Duck/HongKong/Y280/97(DHKY280/97)、Duck/HongKong/YT439/97(DHKY439/97)、Quail/HongKong/G1/97(QHKG1/97)、A/Chicken/Beijing/1/94(CBJ1/94)、Chicken/HongKong/G9/97(CHKG9/97)、A/Turkey/California1/66(TC/1/66).结果表明:我们克隆到的TW1/66株的8个基因片段均含有相应病毒基因的完整开放阅读框架:TW1/66的各基因与TC/1/66株相应各基因同源性最高(NS基因除外,同源性只有(67.4%).与其它各毒株各基因同源性均较低,但与DHKY439/97各基因同源性高于与DHKY280/97、QHKG1/97、CBJ1/94、CHKG9/97各基因同源性.     

中国禽(番鸭)呼肠孤病毒YB株S4基因序列分析

应用非免疫番鸭胚增殖中国禽(番鸭)呼肠孤病毒YB分离株,用LSTRIAZOL提取病毒RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增中国禽(番鸭)呼肠孤病毒YB分离株S4基因节段cDNA.将S4cDNA克隆到PMDl8-T载体上,并进行了鉴定和核苷酸序列测定.序列分析结果,克隆的S4cDNA共1 124bp,包括非编码区和完整的阅读框架.分子进化系统分析表明该毒株与禽呼肠孤病毒(鸡呼肠孤病毒)的亲缘关系较远,DRV-YB与DRV-89330同缘率为93.3%.     

杆状病毒表达SARS冠状病毒纤突蛋白及其抗原性分析

本研究构建了SARS冠状病毒纤突蛋白(S)重组杆状病毒(rBac-SS).SDS-PAGE及Western-Blot分析表明约190Ku左右的重组SARS纤突蛋白(rSS)在rBac-SS感染圆昆虫细胞获得表达,并具有特异免疫反应原性.以rBac-SS感染的昆虫细胞裂解物稀释后直接包被ELISA板,与Vero细胞培养的全病毒裂解物比较,检测SARS-CoV康复病人血清特异抗体,表现出同样的敏感性和特异性;rBac-SS感染的昆虫细胞用于间接免疫荧光,快速检测血清特异抗体反应,具有良好的敏感性和特异性.结果显示,杆状病毒表达的rSS有望替代SARS-CoV全病毒,作为安全、敏感和特异的重组诊断抗原,并为探索重组亚单位疫苗的可行性奠定基础.     

猪钩端螺旋体病的治疗

病例介绍 宁安市某村村民关某2003年6月11日购人16头杜长大三元杂交商品育肥猪。于9月6日发病1头，次日清晨死亡。9月9日开始，又有4头猪发病，畜主遂前来就诊。     

蛋鸡免疫失败原因及对策

即疫苗是不合格的产品，效价不高，不能恰当的刺激机体免疫系统，达不到预期免疫效果。如病毒或细菌等抗原成分含量不足。密封或冻干达不到要求．油乳剂疫苗分层；死苗灭活不全。留有残毒。     

猪结肠小袋虫病的诊断和控制

猪结肠小袋虫病是由结肠小袋虫寄生于猪的大肠内所引起的肠道原虫病，主要危害40～80日龄的仔猪，病猪出现下痢、衰弱、消瘦，并因脱水而导致死亡。2004年4月，笔者在洛阳地区3个小型养猪场发现临床病例，经用药控制，得以恢复。