蓖麻肌动蛋白基因的克隆、抗体制备和表达分析

为探讨蓖麻肌动蛋白(Actin)基因(RcActin)是否可作为蓖麻基因表达研究中的内参基因。以蓖麻生长根为试验材料,根据GenBank中公布的RcActin全长cDNA序列(登录号:XM_002522148.3)设计合成特异性引物,经PCR扩增获得RcActin的编码序列(CDS),并将其插入原核表达载体pET32a(+)中。重组表达载体pET32a(+)-RcActin转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合6个组氨酸标签的目的蛋白,表达蛋白经钴离子螯合磁珠纯化后,采用Western Blot验证,结果表明,pET32a(+)-RcActin可诱导表达分子量约为61.46 ku的融合蛋白His-RcActin。用纯化的His-RcActin免疫BALB/c小鼠,经细胞融合及筛选获得9株能分泌抗蓖麻RcActin蛋白质单克隆抗体(Monoclonal antibody, McAb)的杂交瘤细胞株。利用阳性杂交瘤细胞株刺激小鼠,取腹水,采用间接ELISA方法测定,结果表明,5株阳性单克隆细胞株腹水效价达到1∶1 000 000及以上。用蛋白A/G亲和层析法纯化His-RcActin McAb;采用间接ELISA方法对纯化McAb的特异性进行测定,3株阳性细胞株能分泌针对RcActin的特异性McAb;通过抗体亚类鉴定试剂盒鉴定纯化McAb的亚型,结果表明,3株阳性细胞株分泌的McAb亚类均为IgG1。采用间接ELISA方法对3株阳性细胞株分泌McAb的稳定性进行鉴定,获得1株在体外传19代或液氮冻存4个月后、能稳定分泌McAb的阳性细胞株。采用Western Blot和间接ELISA方法对从该细胞株中纯化的McAb的特异性、效价进行验证,结果表明,获得的McAb具有针对RcActin的特异性且效价为1∶512 000。以制备的McAb为一抗,利用Western Blot方法分析RcActin在正常水肥管理且时空一致条件下的蓖麻8个组织中的表达量,结果表明,蓖麻不同组织中RcActin的含量存在显著性差异(P0.05)。RT-qPCR分析结果表明,蓖麻不同组织中RcActin mRNA也存在显著性差异(P0.05)。通过Western Blot方法分析RcActin在不同浓度NaCl胁迫下盆栽蓖麻根系中的表达量;通过RT-qPCR对不同组织中RcActin mRNA表达量进行分析,结果表明,蓖麻不同组织中RcActin蛋白质和RcActin mRNA的表达量均存在显著性差异(P0.05)。RcActin表达研究为蓖麻功能基因表达分析中内参基因的筛选提供了一定的理论依据。     

改性沸石对铜吸附性能的研究

通过硝酸铵改性天然斜发沸石,探讨沸石投加量、温度、时间对铜的吸附效果、吸附特性及作用机理.结果表明:沸石改性后对铜的吸附效率显著提高,用量为100g/L时效益最好,最大吸附量为4 170.9mg/kg;Lang-muir和Freundlich都能较好地描述改性沸石对Cu2+的等温吸附过程,改性沸石对Cu2+的吸附反应是自发的化学吸附过程,吸附行为符合准二级动力学模型;Elovich方程模型拟合结果表明改性沸石对Cu2+的吸附过程近似非均相扩散过程;颗粒内扩散模型拟合结果表明颗粒内扩散在吸附过程中不是唯一的控速阶段.     

临洮县日光温室蔬菜种植及产业发展的经济效益分析——来自潘家庄村的调查

日光温室是一种适用反季节作物生产的现代农业设施,广泛运用于蔬菜种植领域,增产增收效益显著。本文以临洮县潘家庄村日光温室蔬菜产业为调查对象,对其成本收益进行分析,指出日光温室在发展过程中存在种植成本较高、产品附加值低、发展速度缓慢等问题,并据此提出相应的对策建议。     

某县城区饮用水水源地环境风险评估及对策研究

阐述了某县城区饮用水水源地调查现状及问题,对水源地进行了风险源识别、分析,采用评分值叠加定性评估方法,通过源项分析并根据风险源所在保护区内的影响程度和影响范围,对风险源进行了赋值、计算和评估。风险评估结果表明:水源地最大风险源为流动风险源,其次为农业面源,风险值很高,从风险防控角度来讲不可接受,当地政府应尽快启动水源地的重新选址工作,彻底消除水源地的环境安全隐患。鉴于水源地目前依然承担着供水功能,相应提出了环境风险管理措施和环境应急工程措施,为有关部门提供技术支撑和决策参考。     

秸秆醋液对辣椒生长影响

研究了喷施不同浓度的秸秆醋液对辣椒生长的影响。结果表明：施用秸秆醋液后,对辣椒叶绿素含量、果肉厚度、维生素C含量以及辣椒产量有明显的促进作用,其中以稀释400倍处理最好。与对照相比,叶片叶绿素含量增加51.93%,辣椒果肉厚度增加22.16%,维生素C含量增加46.89%,产量增加9.9%。因此,适宜浓度的秸秆醋液能促...     

高校平面设计专业教学改革探讨

现在信息社会对于学生的全面素质的要求迫使作为培养社会栋梁之才的高校做出相应的反响。文章就高校平面设计专业毕业生就业时出现的问题提出一些在教学模式、教学方法上的改进。     

不良生活方式可能引发耳聋

近年来，突发性耳聋患者有年轻化趋势。医生提醒，煲电话粥、K歌、通宵打麻将等流行生活方式都有可能致聋、据有关部门调查，突发性耳聋者有年轻化趋势，其患病直接原因与职业特点和不良行为习惯有关。     

棉花营养钵育苗死苗原因与防治对策

近几年菏泽棉区营养钵育苗出现了大量死苗现象,轻者占20%,重者达80%左右,给广大棉农造成了严重的经济损失.现就死苗原因及防治对策简要总结如下.     

高校平面设计专业教学改革探讨

现在信息社会对于学生的全面素质的要求迫使作为培养社会栋梁之才的高校做出相应的反响。文章就高校平面设计专业毕业生就业时出现的问题提出一些在教学模式、教学方法上的改进。