《茶叶科学》2002至2009年载文分析

运用文献计量学的方法,选用2002~2009年《茶叶科学》中刊载论文共458篇,重点从载文内容、载文量的时间分布、作者群的地域和所属单位分布、核心作者群的数量、论文作者的合著率及高被引论文分布等方面进行统计分析,得出《茶叶科学》近8年发展的一些规律,即载文量增加,载文信息增大,论文作者涉及地域、单位极不平衡,核心作者群已形成,作者合作意识较强,合著率高;同时发现了一些存在的问题,并提出相应的解决办法,为《茶叶科学》的进一步发展提供依据。     

利用正交设计优化茶树ISSR反应体系

为优化茶树ISSR分子标记反应体系,对影响茶树ISSR反应较大的Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度5个因素在4水平上进行优化试验,建立了适合于茶树ISSR-PCR(Inter Simple Sequence Repeats-Polymerase Chain Reaction)的最佳体系:20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶0.75U/μL,10×buffer(含Mg2+)2.0mmol·L-1,模板DNA20ng,dNTP0.1mmol·L-1,引物0.3μmol·L-1。反应程序为:94℃预变性5min,94℃变性1min,50～60℃退火40s,72℃延伸90s,34次循环,72℃延伸7min,4℃保存。     

茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建

采用能有效转化双子叶植物的表达载体pBI121构建植物硒营养代谢关键酶基因的表达载体,将原载体中GUS基因用茶树ATP硫化酶基因(APS1和APS2)替换,将硒半胱氨酸甲基转移酶基因(CsSMT)连接到pBI121载体上直接与GUS基因相连,分别构建了目的基因植物表达载体pBI-APS1、pBI-APS2和pBI-CsSMT.通过三亲杂交法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,获得转化工程菌,为通过植物基因工程获得富硒农产品打下基础.     

茶树花发育相关的一个钙依赖蛋白激酶基因的克隆与表达分析

应用cDNA-AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)技术分析了结实率差异显著的龙井43和大叶乌龙两个茶树品种在花蕾发育过程中基因表达的差异。从获得的差异图谱中,克隆得到一个与茶树花发育相关的钙依赖蛋白激酶基因片段,然后用RCAE方法扩增获得其cDNA全长序列,命名为茶树TCK(Camellia sinensis calcium-dependent protein kinase)基因,GenBank登录号EU732607。该基因cDNA序列全长2281bp,编码760个氨基酸。用RT-PCR方法进一步研究该基因的功能,检测其表达特异性,结果表明该基因只在茶树花蕾发育后期特异表达,在叶、花蕾发育早期均无表达,提示TCK基因可能在茶树花发育过程中发挥重要作用。     

越南茶叶产业概况

正越南是典型的农业国家,农业人口占总人口的76%。近年来,越南茶叶发展很快,引起业界重视。应越南国家茶叶研究机构——越南北方山区农林业技术科学院的邀请,南京农业大学组团于2011年赴越南联合开展了越南茶叶生产状况的中越合作考察,现将越南茶叶产业概况简要介绍如下。     

茶树花粉的离体萌发研究

选用无性系茶树品种龙井长叶花粉为材料,通过离体条件下花粉的萌发来探讨茶树离体花粉萌发的最适条件及最适保存方法.取蕾白期茶树花苞,干燥15 h后取花粉,以30 mmol/L的MES缓冲液(pH值5.5)为母液配制0.01% H3BO4+0.03% Ca(NO3)2+10% 蔗糖+15% 聚乙二醇4000(PEG-4000)溶液(pH值6.5),作为基本培养基,统计不同组分的浓度、不同pH值和不同碳源对25 ℃处理1 h的花粉萌发率的影响.结果表明,茶树花粉萌发和花粉管生长的最适液体培养基是:0.01% H3BO4+0.05% Ca(NO3)2+5% PEG-4000+5%麦芽糖,pH值在5.0~6.0之间(30 mmol/L MES).在此条件下的萌发率为82.24%,花粉管生长长度为492 μm.     

谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸条件的优化

在不同诱导条件下,对谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸体系进行优化,确定最适诱导表达条件,为微生物发酵合成茶氨酸提供技术依据.研究结果表明:基因工程菌最佳培养温度为30 ℃,最佳诱导剂异丙基硫代-β-D半乳糖苷浓度为0.1 mmol·L-1,最佳诱导温度为28 ℃.合成茶氨酸的最适pH值为9.5,适合的缓冲液为100 mmol·L-1咪唑;反应体系中咪唑缓冲液优于磷酸钾缓冲液;低浓度L-谷氨酸钠、高浓度盐酸乙胺和高浓度三磷酸腺苷对茶氨酸的合成均有一定的促进作用,可以提高茶氨酸的生成量.     

全基因组关联分析在茶叶研究中的应用进展

全基因组关联分析（genome-wide association analysis,GWAS）是以高通量测序技术为基础,结合生物信息学和统计学方法,在全基因组水平上鉴定调控复杂性状的基因变异,是研究复杂农艺性状和遗传变异最有力和最有效的研究方法,其核心是研究遗传变异和目标性状之间的关联。GWAS研究检测到的关联位点一般很少,而且关联的位点仅能解释很少一部分性状变异。本文介绍了影响GWAS的主要因素,总结了GWAS在茶叶饮料消费、茶树重要农艺性状、茶叶品质和茶树群体结构研究中取得的一系列进展,提出了茶树GWAS研究中遇到的问题和未来的发展方向。