H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒（AIV）A／Goose／HLJ／p46／2003（H5N1）的NSl基因，将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上，转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析，表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示，重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后，经0．3mmol／L的IPTG诱导，融合蛋白MBP-NS1得到大量表达，融合蛋白以可溶形式存在，分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明，融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应，而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法，为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。     

免疫增强剂提高抗体水平的比较试验

预防动物传染病，要用疫苗对动物进行免疫接种，在疫苗抗原的作用下，刺激机体的免疫器官，使其机体产生免疫应答反应，并产生特异性抗体，从而保护机体在受到相应病原体的侵袭时不被感染或感染后不引起发病，达到预防疫病的发生和保护动物的作用。动物在注射疫苗后，产生抗体水平的高低和抗体维持时间长短，标志着动物机体抵抗力的高低。实践证明，动物体接受免疫的次数愈来愈多，     

荷斯坦奶牛体型线性评定及其性状与产奶量的相关性分析

采用9分制线性评定法对湖北宜昌地区饲养的荷斯坦奶牛进行体型线性评定，9分制奶牛体型外貌评定系统分为5大块，即结构／容量、尻部、肢蹄、泌乳系统和乳用特征，共24个性状，对每一性状给予1．9分的评分，最终根据此评分，选育高产、健康、优秀、长寿的优质牛群以获得最好的经济效益。     

大珍宝赤月桃丰产栽培技术总结

大珍宝赤月桃为日本品种，1999年春引种到山东肥城试栽，定植第2年结果，第3年667m^2产量达1000kg，第4年含量2500kg。该品种在肥城表现适应性强，抗旱耐涝，抗病性强。平均单果质量295g，可溶性固形物含量16．5％，果面光洁鲜红，硬溶质，肉质细脆，风味甘甜浓香，黏核，品质极佳，耐贮运。在山东肥城7月下旬至8月初成熟，比肥城桃早熟40～50d(天)。     

大珍宝赤月桃丰产栽培技术总结

1)氮:土壤中氮素的主要来源是有机质,因此,缺乏有机质的土壤和多雨地区的砂土最容易缺氮。氮素是果树整个生长周期都需要的营养元素,不论哪种土壤,如不使用氮肥都可能发生缺素。 2)磷:最常见的缺磷土壤有:高度风化并呈酸性反应的土壤;石灰性土壤中磷含量可能很高,但对植物无效;泥炭和腐殖土多半需要施磷。另外,还有一些因素可以影响磷的有效性,如:土壤温度低,磷的有效性就低;土壤温度高,对植物有效的磷就多;酸化石灰性土壤,或在土壤中施用厩肥或有机质都会增加土壤中的有效磷。 3)钾:通常见到的缺钾的土壤为:轻砂土,其     

百合花发育相关MADS box基因的克隆

 利用RT-PCR的方法，从百合中克隆得到了3个接近全长的花发育相关MADS box基因片段 LfMADS1-3。其中LfMADS1和LfMADS3以往未见报道，分别与多种作物的AG、SEP同源基因具有较高的同源性；LfMADS2与已发表的LMADS2对应区段的氨基酸同源性高达98.99%，推测可能是同一个基因。     

红富士苹果无公害生产技术

根据我国<无公害农产品管理办法>无公害农产品的定义,无公害苹果是指产地环境、生产过程和产品质量符合有关标准和规范的要求,经过认证合格,获得认证证书,并允许使用无公害农产品标志的未经加工或者初加工的苹果.近几年,我们组织实施了"青岛市无公害果品生产基地建设"示范项目,共建立无公害果品生产基地1 963 hm2,其中无公害红富士苹果生产基地876 hm2,每年生产无公害红富士苹果2 500万 kg,新增经济效益1 500多万元,现总结如下.     

冷应激对猪生产性能的影响

低温环境显著改变猪的体组织的组成、代谢和生产性能,使之有别于适温区和热应激。我国大部分地区寒冷季节漫长,猪舍一般都缺乏加温设备或保温不足,致使猪群或长或短地处于冷应激状态。养猪生产者应该了解冷应激对猪群的影响,才能有效地应对低温对养猪生产造成的损害。为此,本文对研究相对少见的低温对猪群的影响这一主题进行综述。临界温度是指适温区的下限。当环境温度低于临界温度时,猪处于冷应激状态。因为部分摄食被用于产热来调节体温,所以,低温条件下养猪生产不能优化。此外,在冷应激情况下,猪群可能还要面对更多的健康问题。下表给出…     

phyA基因的克隆及其新型表达载体的构建

直接以黑曲霉菌株F246基因组为模板，对植酸酶基因phyA的成熟肽(分子长度为1347bp)进行了PCR扩增，再将PCR产物克隆入pMD18-T质粒，经DNA测序鉴定正确后，亚克隆入表达载体pET30a^ 和pMG36e，成功构建了phyA基因2种新型表达载体。植酸酶phyA基因2种新型表达载体的构建，为进一步获得大量、高活性植酸酶以及研究和开发新型微生态制剂打下了基础。     

贵州省鸡心包积液-肝炎综合征实验室诊断与病原基因分型

为证实鸡心包积液-肝炎综合征(hydropericardium hepatitissyndrome,HHS)在贵州省的流行、病原遗传变异和基因分型情况,对贵州首个疑似HHS病例进行实验室检测,并基于Hexon基因进行病原基因分型。结果显示:病例组织材料中PCR扩增获得约295 bp特异性Hexon基因片段;基于Hexon基因分型显示,本病例病原与国内外报道的禽腺病毒Ⅰ群血清4型(FAd V-4)同源性高达100%,与禽腺病毒Ⅰ群代表株CELO株(U46933)同源性达到64.5%;系统进化分析显示,FAd V-4贵州流行株与禽腺病毒Ⅰ群代表株CELO株和FAd V-4国内外流行株均处于同一进化分支,而与禽腺病毒Ⅱ群和禽腺病毒Ⅲ群处于不同进化分支。结果表明:本病例确为贵州省首次报道HHS病例,病原基因分型为禽腺病毒Ⅰ群血清4型,研究结果为贵州省HHS防控提供参考。